侯伟杰
- 作品数:5 被引量:12H指数:2
- 供职机构:西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金:陕西省科技统筹创新工程计划项目陕西省科学技术研究发展计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 山羊IFN-γ基因的克隆表达与多克隆抗体制备被引量:1
- 2014年
- 为获得山羊IFN-γ重组蛋白,提取山羊外周血淋巴细胞总RNA,反转录得到cDNA,以此为模板经PCR扩增获得IFN-γ的ORF区,构建重组克隆载体。经PCR扩增得到编码山羊IFN-γ成熟肽的基因序列,连入重组表达载体pET-32a,转入BL21(Codon Plus)感受态细胞中,测序并分析。重组表达载体经IPTG诱导后,对产物进行SDS-PAGE分析,并过镍柱纯化。用获得的纯化蛋白免疫家兔制备抗体。结果显示,编码山羊IFN-γ成熟肽部分的片段长432bp;SDS-PAGE分析显示,融合蛋白大小约为34.9ku,在30℃条件下,以0.3mmol/L的IPTG诱导6h,可得到大量可溶性表达的目的蛋白;间接ELISA测定制得的多克隆抗体效价为1∶106。
- 安贝赵玄多杨雯昱侯伟杰高洋陈德坤
- 关键词:山羊IFN-Γ原核表达抗体制备
- 奶山羊乳房炎灭活疫苗的制备及免疫效果检测被引量:3
- 2014年
- 为评估奶山羊乳房炎灭活疫苗的免疫效果,以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌为材料,经甲醛37℃灭活,按照6∶1(V/V)与铝胶盐充分混匀,分别经腹股沟皮下、颈部皮下注射途径,免疫泌乳期奶山羊,免疫剂量均为2mL,共免疫2次,每次间隔14d。分别在免疫前及第1次免疫后10、24、60、180d采集血样和乳样,ELISA测定抗体效价,用快速诊断液检测隐性乳房炎,统计患病奶山羊的数量。结果显示,与对照组相比,两次免疫后血液及乳汁中针对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌的抗体效价含量均显著增加(P<0.05),抗体维持时间长;颈部皮下免疫组免疫后180d,腹股沟皮下免疫组免疫后的60d,隐性乳房炎奶山羊数量均明显下降。结果表明,本研究制备的奶山羊乳房炎疫苗不仅能够刺激机体产生较好的体液免疫应答,而且还对隐性乳房炎有显著的治疗效果。
- 侯伟杰张立强高洋赵玄多赵燕清刘方高晶晖张淼涛陈德坤
- 关键词:乳房炎灭活疫苗免疫抗体效价隐性乳房炎
- 羊口疮病毒威海株的分离鉴定被引量:2
- 2014年
- 利用犊牛睾丸原代细胞对山东省威海市某奶山羊养殖场疑似羊口疮(Orf)山羊病料进行病毒分离,通过细胞病变观察、病毒滴度和聚合酶链反应(PCR)等方法对分离毒株进行鉴定。结果表明,研磨处理的病毒液接种于犊牛睾丸原代细胞后盲传至第5代出现病变,测得第6代分离株病毒滴度为106.5 TCID50/mL。扩增羊口疮病毒特异性B2L基因,发现该毒株与34个羊口疮毒株核苷酸序列同源性高达99%,包括福建株(KC588399.1、KC568398.1)。本研究成功分离鉴定了羊口疮病毒山东威海株。
- 高晶晖张瑜侯伟杰张立强高洋张淼涛陈德坤
- 关键词:羊口疮病毒聚合酶链反应
- 奶山羊乳房炎灭活疫苗的制备及其免疫效果评估
- 奶山羊乳房炎常发生于泌乳期,在产前及干乳期有时也发生此病,目前我国奶山羊隐性乳房炎的检出率较高,不仅会降低乳产量和乳质量,造成严重的经济损失,还会直接影响奶山羊的泌乳机能,甚至造成羊只死亡,是对奶山羊养殖业危害最严重的疫...
- 侯伟杰
- 关键词:乳房炎灭活菌苗抗体效价隐性乳房炎
- 文献传递
- 三种佐剂对奶山羊乳房炎灭活疫苗免疫效果的影响被引量:4
- 2015年
- 为筛选奶山羊乳房炎灭活疫苗的有效佐剂,以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌为材料,经甲醛37℃灭活,分别与铝胶盐、蜂胶和转移因子混合,制备铝胶盐佐剂疫苗、蜂胶佐剂疫苗和转移因子佐剂疫苗,免疫泌乳期奶山羊,免疫剂量为2mL,共免疫2次,免疫间隔14d。分别在免疫前及每次免疫后第10天采集血样和乳样,ELISA测定抗体效价,用快速诊断液检测隐性乳房炎,统计隐性乳房炎检出率。结果显示,铝胶盐佐剂疫苗刺激机体产生的抗体水平在首免和二免后均显著高于对照组(P<0.05);3个免疫组中,铝胶盐组抗体水平最高,转移因子组次之,蜂胶组则不显著;铝胶盐佐剂疫苗还能显著降低隐性乳房炎的检出率,使隐性乳房炎检出率由免疫前的60%下降至二免后的30%。结果表明,同蜂胶和转移因子相比,铝胶盐佐剂能刺激机体产生更强的体液免疫应答,对隐性乳房炎的治疗效果更显著。
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- 关键词:乳房炎灭活菌苗佐剂抗体效价隐性乳房炎