董超 作品数:7 被引量:7 H指数:2 供职机构: 中国人民解放军海军总医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
新城疫病毒修饰的自体瘤疫苗在脑胶质瘤中的研究进展 被引量:1 2010年 脑胶质瘤是一种最常见的颅内恶性肿瘤,约占脑肿瘤的半数以上。尤其是恶性胶质瘤侵袭性强、易转移、易复发,传统的手术治疗、放射治疗和化学药物治疗效果并不理想,而溶瘤治疗是近年来国内外学者提出的一种针对肿瘤的新型免疫治疗方法。新城疫病毒就是溶瘤病毒的一种,将其改造成免疫原性更高、效价性更多、安全性更好的新城疫病毒修饰的自体瘤疫苗,已逐渐得到国内外学者的认可。本文就其在脑胶质瘤中的最新进展情况进行综述。 董超 张剑宁关键词:新城疫病毒 胶质瘤 HER2高表达的人乳腺癌原代细胞模型的建立 2011年 目的:探讨人乳腺癌恶性胸水肿瘤细胞的分离、纯化、培养与肿瘤细胞的鉴定,为HER2阳性的人乳腺癌的研究提供肿瘤原代细胞模型。方法:利用淋巴细胞分离液及密度梯度离心法分离、纯化恶性胸水肿瘤细胞,分离得到的细胞培养并传至第5代,通过流式细胞仪分选肿瘤细胞、Q-PCR技术、Western blot技术验证细胞HER2分子的表达水平、通过裸鼠荷瘤实验检测细胞的成瘤能力。结果:淋巴细胞分离液及密度梯度离心法分离得到乳腺癌原代细胞;流式细胞分选结果显示未分选出HER2高表达的肿瘤细胞;Q-PCR及Western blot检测发现分离得到的细胞在mRNA及蛋白水平HER2的表达水平高于乳腺癌MCF-7细胞;裸鼠荷瘤实验结果显示分离得到的细胞可以成功荷瘤。结论:胸水中分离得到的细胞为HER2阳性的乳腺癌原代细胞;对于原代细胞的鉴定需要采用不同的方法加以论证。 王丽娟 赵悦 肖华卫 白娥 董超 杨韬 杨安钢 朱青关键词:恶性胸水 密度梯度离心法 RNA干涉CD44基因抑制脑胶质瘤细胞U251的增殖与侵袭性研究 被引量:3 2014年 目的通过合成靶向分化抗原簇44(CD44)基因的siRNA片段,下调CD44在脑胶质瘤细胞U251中的表达,揭示其在胶质瘤增殖、迁移和侵袭中所起的作用。方法根据CD44基因序列设计并合成的siRNA片段转染U251细胞,利用荧光实时定量(qRT-PCR)检测细胞中CD44基因mRNA水平的变化;蛋白印迹实验(Western blot)检测CD44基因蛋白水平的变化;四甲基偶氮唑蓝染色(methyhhiazolyl tetrazolium,MTT)法检测U251细胞增殖;单细胞划痕愈合实验、Transwell小室侵袭实验检测U251细胞的迁移与侵袭能力变化。结果体外合成的CD44-siRNA能有效抑制U251细胞中CD44基因在mRNA水平与蛋白水平的表达(P<0.05),并抑制细胞的增殖(P<0.05)和迁移侵袭能力(P<0.05)。结论 CD44-siRNA能够有效抑制U251脑胶质瘤细胞的增殖及其迁移侵袭力,为以CD44为靶点的肿瘤基因治疗奠定了基础。 董超 张剑宁 杨安钢 任君琳 张雷鸣 方丹东 陈晓燕 杨韬 郭张燕关键词:CD44 RNA干涉 U251 针对CD44的siRNA对脑胶质瘤细胞A172增殖与凋亡的影响 2012年 目的:通过RNA干涉下调CD44在脑胶质瘤细胞A172中的表达,观察CD44下调后对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:根据CD44基因序列设计并合成的siR-NA片段(CD44-siRNA)转染A172细胞,利用荧光实时定量qRT-PCR检测细胞中CD44基因mRNA水平的变化;Westernblot检测CD44蛋白水平的变化;MTT法检测A172细胞增殖;流式细胞术(FCM)检测A172细胞周期与凋亡。结果:CD44-siRNA下调了A172细胞中CD44 mRNA水平与蛋白水平的表达,A172细胞的增殖能力明显降低,并将A172细胞阻滞于G0/G1期,A172细胞的凋亡数量明显增加,尤其是晚期凋亡细胞数。结论:CD44-siRNA能够下调CD44的表达,有效抑制A172脑胶质瘤细胞的增殖,并促进其凋亡,为以CD44为靶点的脑胶质瘤基因治疗提供理论依据。 董超 任君琳 张雷鸣 杨双武 方丹东 陈晓燕 孟艳玲 杨安钢 张剑宁关键词:CD44 RNAI 脑胶质瘤 针对CD44的siRNA对脑胶质瘤细胞U87增殖与侵袭的抑制作用 2011年 目的:通过RNA干涉下调CD44在脑胶质瘤细胞U87中的表达,观察CD44的表达抑制对胶质瘤增殖、迁移和侵袭的影响。方法:根据CD44基因序列设计并合成的siRNA片段(CD44-siRNA)转染U87细胞,利用荧光实时定量qRT-PCR检测细胞中CD44基因mRNA水平的变化;Western blot检测CD44蛋白水平的变化;MTT法检测U87细胞增殖;单细胞划痕愈合实验、Transwell小室侵袭实验检测U87细胞的迁移与侵袭能力变化。结果:CD44-siRNA下调了U87细胞中CD44mRNA水平与蛋白水平的表达,转染细胞的增殖和迁移侵袭能力下降。结论:CD44-siRNA能够下调CD44的表达,并有效抑制U87脑胶质瘤细胞的增殖及其迁移侵袭力,为以CD44为靶点的脑胶质瘤基因治疗奠定基础。 董超 任君琳 张雷鸣 杨双武 方丹东 杨韬 孟艳玲 杨安钢 张剑宁关键词:CD44 RNAI 脑胶质瘤 胶质瘤细胞系A172、U251、U87和SHG-44中HER2的表达及意义 被引量:1 2011年 目的探讨人表皮生长因子受体2(HER2)在人神经胶质瘤细胞系A172、U251、U87和SHG-44中的表达情况。方法采用W estern b lot和流式细胞术(FCM)于蛋白质水平检测HER2在四种人胶质瘤细胞系中的表达。结果 W estern b lot检测出HER2在人胶质瘤细胞系A172中的表达量最高,U251次之,U87和SHG-44表达量较低。FCM检测结果显示HER2在A172、U251、U87和SHG-44中的阳性率分别为36.5%、21.5%、3.3%和3.5%。结论人胶质瘤细胞系A172和U251中HER2的表达量较高,这两种细胞系可作为良好的细胞模型来研究HER2分子在胶质瘤中的作用机制以及以HER2为靶点的生物治疗等。 张雷鸣 张剑宁 杨双武 董超 方丹东 李娟 陈晓燕关键词:胶质瘤 细胞系 Her-2与CD44在恶性脑肿瘤中的表达及意义 被引量:2 2011年 目的探讨人类表皮因子受体2型(Her-2)及CD44在常见恶性脑肿瘤中的表达情况及与肿瘤预后的关系。方法采用免疫组织化学和间接免疫荧光标记法检测胶质母细胞瘤、胶质肉瘤、髓母细胞瘤、间变性少突胶质细胞瘤共120例及10例正常脑组织标本中Her-2、CD44的表达,对数据进行统计学分析。结果 Her-2的表达阳性率在胶质母细胞瘤、胶质肉瘤、髓母细胞瘤和间变性少突胶质细胞瘤中分别是80.0%、73.3%、66.7%和33.3%。CD44的表达阳性率在上述四种肿瘤中分别为86.7%、80.0%、90.0%和73.3%。Her-2在正常脑组织中无表达,CD44在正常脑组织中表达阳性率为20.0%。Her-2与CD44在恶性脑肿瘤中的表达无相关性(P>0.05),但两者均与肿瘤预后关系密切。免疫荧光标记显示两者存在共表达现象。结论 Her-2在胶质母细胞瘤、胶质肉瘤、髓母细胞瘤中高表达,而在间变性少突胶质细胞瘤中相对低表达,CD44则普遍高表达。未发现两者在恶性脑肿瘤中表达具有相关性,但二者均与肿瘤的预后有密切关系,具有协同作用。因此Her-2与CD44有望成为脑肿瘤联合免疫治疗的联合靶位,在脑肿瘤诊治中发挥重要作用。 杨双武 董超 张雷鸣 杨双文 陈晓燕 方丹东 张剑宁关键词:恶性脑肿瘤 HER-2 CD44 免疫组化