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一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌及其应用: 本发明公开了一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌，它是将UGT76G1编码基因插入PYes2载体的EcoRI和XhoI酶切位点之间，构建了重组质粒，再将重组质粒导入表达宿主酿酒酵母Saccharomyces ...; 严明李艳刘欢许琳郝宁魏淼许昇安明东王珊珊安芳芳郝思清顾金海; 文献传递

一种醇脱氢酶在催化生成(R)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用: 本发明公开了一种氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的醇脱氢酶在4-氯乙酰乙酸乙酯不对称还原制备(<I>R</I>)-4-氯-3羟基丁酸乙酯中的应用。即以氨基酸序列如SEQIDNO：2所示的醇脱氢酶为催化剂，以4-氯乙酰乙...; 严明许琳顾金海郝宁李艳魏淼; 文献传递

醇脱氢酶CADH催化合成(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的研究: (R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((R)-CHBE)是一种重要的手性醇，主要作为L-肉碱(L-carnitine)的手性中间体。利用氧化还原酶催化不对称还原4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)，具有反应条件温和、环境友好、立体...; 顾金海; 关键词：丁酸乙酯催化合成醇脱氢酶

一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌及其应用: 本发明公开了一种产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1的基因工程菌，它是将UGT76G1编码基因插入PYes2载体的EcoRI和XhoI酶切位点之间，构建了重组质粒，再将重组质粒导入表达宿主酿酒酵母Saccharomyces ...; 严明李艳刘欢许琳郝宁魏淼许昇安明东王珊珊安芳芳郝思清顾金海; 文献传递

交联醇脱氢酶聚集体的制备及其在(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯合成中的应用被引量：1: 2015年; 基于基因组序列数据库挖掘新酶的技术,从白色念珠菌Candida albicans基因组中克隆了一条新型醇脱氢酶(CADH)基因,并在大肠杆菌Escherichia coli Rosetta(DE3)中表达。为克服游离酶稳定性差、不能重复使用的缺点,探索并优化了交联醇脱氢酶聚集体(CLEAs-CA)的制备条件。结果表明:重组CADH对底物四氯乙酰乙酸乙酯(COBE)的比活力为1.8 U/mg,产物(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((R)-CHBE)的对映体过量值大于99%。CLEAsCA沉淀剂选择为60%饱和度的(NH_4)_2SO_4,交联剂为10 mmol/L戊二醛。在固定化操作前,加入50 mmol/L异丙醇和0.1 mmol/L NAD^+对CADH催化活性位点、辅酶结合位点进行保护,CLEAs-CA的活力回收率提高了48.3%。将CLEAs-CA用于不对称合成(R)-CHBE,经过19次的重复使用,CLEAs-CA的活性仍保留有50%。; 沙凤顾金海许琳严明; 关键词：醇脱氢酶固定化

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顾金海