许琳
- 作品数：133 被引量：138H指数：6
- 供职机构：南京工业大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程理学更多>>
- spt15突变基因对酿酒酵母木糖利用的影响被引量：3
- 2009年
- 利用基因工程手段得到重组菌YPH499-3中的spt15有效突变基因,通过表达载体pYX212转化入酿酒酵母原始菌株YPH499中,重新获得酿酒酵母重组菌株。对其性状进行研究,结果表明该菌株能有效利用木糖并共发酵木糖和葡萄糖。在30oC、200r/min,发酵72h时,50g/L木糖的利用率为82.0%,乙醇产率为28.4%;当木糖和葡萄糖以质量比1:1混合发酵时,木糖和葡萄糖的利用率分别为80.4%和100%,乙醇产率为31.4%;同时发现木糖醇的含量极低。从而验证了有效突变基因spt15-10对酿酒酵母共发酵木糖和葡萄糖产酒精的影响。
- 刘红梅唐雯来灿钢严明许琳欧阳平凯
- 关键词：酿酒酵母共发酵
- 醇脱氢酶的纯化、酶学性质及其不对称催化被引量：1
- 2016年
- 为了研究木兰假丝酵母(Candida magnolia)中的醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase)3(ADH3)的突变酶(AIDI)的纯化、酶学性质以及不对称还原合成(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯的能力。首先对AIDI进行(NH_4)_2SO_4沉淀、透析以及DEAE Sepharose离子交换层析。将纯化后的酶用于最适温度、pH、有机溶剂耐受等酶学性质的研究,同时考察底物浓度对催化效率的影响。结果发现:通过纯化获得了电泳纯的AIDI。酶的最适温度为40℃,最适pH为7.0。该醇脱氢酶的热稳定性较好,对环境pH的变化不敏感,在pH 4~8之间较为稳定。部分金属离子对该酶的活性具有抑制作用,特别是Fe2+对其具有显著抑制作用。在0.1 mol/L、pH 7.0的Na_3PO_4缓冲液中,底物质量浓度为50 g/L,30℃转化24 h,转化率能达到94%。
- 程书兰魏淼许琳严明
- 关键词：醇脱氢酶酶学性质
- gTME构建共发酵木糖和葡萄糖的重组酿酒酵母被引量：11
- 2008年
- 利用全转录工程(gTME)方法将全局转录因子spt15随机突变并克隆表达,构建突变库。将突变基因连接到表达载体pYX212上,醋酸锂法转化入不利用木糖的酿酒酵母YPH499中,经特定的培养基初筛获得高效利用木糖并共发酵木糖和葡萄糖的酿酒酵母重组菌株。对获得的重组菌株进行了初步研究,该菌株能够很好的利用木糖并共发酵木糖和葡萄糖。在30oC,200r/min,发酵96h时,50g/L木糖和葡萄糖的利用率为94.0%和98.9%,乙醇产率为32.4%和31.6%,原始菌株乙醇产率为44.3%;当木糖和葡萄糖以质量比1:1混合发酵时,木糖和葡萄糖利用率分别为91.7%和85.9%,乙醇产率为26%。木糖醇的含量极低。
- 刘红梅许琳严明来灿钢欧阳平凯
- 关键词：重组酵母菌木糖共发酵
- 一株木质素耐受性酿酒酵母菌及其在生物乙醇生产中的应用
- 本发明公开了一株能耐受木质素毒性的酿酒酵母LTY-1（ Saccharomyces cerevisiae LTY-1），已于2014年5月6日保藏于中国典型培养物保藏中心（简称CCTCC），其保藏编号为CCTCC NO：...
- 缪冶炼尤业兵季萌陈君李文莉许琳
- 文献传递
- 醇脱氢酶突变体及其应用
- 本发明公开了一种醇脱氢酶突变体，为野生型醇脱氢酶的氨基酸发生如下任意一种情况的突变：野生型醇脱氢酶的序列中第35位丝氨酸突变为天冬氨酸；野生型醇脱氢酶的序列中第35位丝氨酸突变为天冬氨酸，且第36位精氨酸突变为异亮氨酸；...
- 严明许琳邱晓鸾
- 文献传递
- Thermus thermophilus HB8葡萄糖异构酶在大肠杆菌中表达被引量：1
- 2006年
- 为了增加高热稳定性的葡萄糖异构酶的得率,采用PCR技术扩增得到Thermus thermophilusHB8葡萄糖异构酶基因xylA,连接到表达载体pET-22b(+)上,获得重组质粒pET-22b(+)-xylA。将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导后,通过半胱氨酸-咔唑法测葡萄糖异构酶酶活。重组菌经诱导培养,SDS-PAGE电泳结果显示出明显的分子量约为44 kD特异性蛋白质条带,比酶活约为18.562 U/mg,比野生型菌株提高了2倍。
- 丁莉许伟严明许琳
- 关键词：THERMUSTHERMOPHILUS葡萄糖异构酶克隆
- 一种不对称转化制备(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯的重组酵母菌及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种不对称转化制备(S)－4－氯－3－羟基丁酸乙酯的重组酵母菌，它是导入羰酰还原酶基因和葡萄糖脱氢酶基因的酿酒酵母菌。本发明还公开了上述重组酵母菌的构建方法。利用本发明重组酵母菌制备(S)－4－氯－3－羟基丁...
- 应汉杰许琳叶齐严明熊健柏建新陈勇李振江
- 文献传递
- 过量表达异柠檬酸裂解酶对ldh^(-1)谷氨酸棒状杆菌产丁二酸的影响被引量：1
- 2013年
- 谷氨酸棒状杆菌SA001是缺失了乳酸脱氢酶基因(ldhA)的菌株。为了增加厌氧条件下经异柠檬酸到丁二酸的代谢通量,以提高丁二酸的产量。将来自大肠杆菌Escherichia coli K12的异柠檬酸裂解酶基因导入谷氨酸棒状杆菌SA001(SA001/pXMJ19-aceA)中。该菌经0.8 mmol/L的IPTG有氧诱导12 h后,转入厌氧发酵16 h,丁二酸的产量为10.38 g/L,丁二酸的生产强度为0.83 g/(L·h)。与出发菌株比较,异柠檬酸裂解酶的酶活提高了5.8倍,丁二酸的产量提高了48%。结果表明过量表达异柠檬酸裂解酶可以增加由乙醛酸途径流向丁二酸的代谢流。
- 杨超郝宁严明高璐许琳
- 关键词：谷氨酸棒状杆菌丁二酸
- 酿酒酵母CICC1747醛糖还原酶基因的克隆及表达被引量：1
- 2006年
- 采用PCR技术以酿酒酵母CICC1747基因组DNA为模板扩增得到醛糖还原酶基因GRE3,插入到pET-15b载体的NdeⅠ和BamHⅠ酶切位点之间,构建了酿酒酵母醛糖还原酶原核表达载体pET-15b-GRE3。将该载体转化到大肠杆菌菌株Rosetta(DE3)中,重组菌株用IPTG诱导表达,采用紫外分光光度法测定醛糖还原酶活力,并对其表达条件进行初步优化。SDS-PAGE电泳结果显示在分子量约37 kD处有明显的特异性蛋白质条带。发酵液的比酶活最高为54.94 mU/mg,与酿酒酵母野生菌株相比提高了近10倍。
- 曹丹燕李艳张清许琳严明
- 关键词：酿酒酵母醛糖还原酶克隆
- 产脑苷脂鸡枞菌Termitomyces clypeatus CTM-1的分子生物学鉴定及生长特性研究被引量：2
- 2015年
- 脑苷脂A和B具有显著的镇痛作用和脑神经保护作用。鸡枞菌(Termitomyces clypeatus)子实体含有脑苷脂A和B,但是野生鸡枞菌子实体资源稀少。笔者在前期研究中以野生鸡枞菌子实体为原料,通过组织分离、菌种纯化及筛选,培育出菌株CTM-1。本研究中,采用分子生物学方法鉴定了菌株CTM-1与鸡枞菌的菌种同源性,测定了该菌株平板培养、液体培养中菌丝体的生长速率和脑苷脂含量。实验结果表明:菌株CTM-1及其出发野生子实体与Termitomyces clypeatus的同源性为99%。在PDAY平板培养中,菌落直径的增长速率在27 d内基本稳定在1.5mm/d。比菌落直径增长速率在1 d时为0.21 d-1,然后逐渐下降。在DPt液体培养中,9 d以后为菌丝体生长的稳定期,此时的生物量为3.57 g/L。比菌丝体生长速率在1 d时为2.00 d-1,然后逐渐下降。菌丝体的脑苷脂A、B含量分别为0.152%、0.066%。由此可见,鸡枞菌CTM-1的大规模培养可以成为脑苷脂A、B原料生产的有效途径。
- 花卫俊缪冶炼陈介余尤业兵孙唱袁丽红许琳
- 关键词：鸡枞菌菌丝体脑苷脂
