刘玉莹
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：广西医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西研究生教育创新计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脐带间充质干细胞与牙髓细胞共培养对LPS诱导细胞炎症因子表达的影响
- 目的：研究人牙髓细胞(human dental pulp cells，hDPCs)和人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUCMSCs)在不同浓度脂...
- 刘玉莹
- 关键词：牙髓细胞脐带间充质干细胞细胞炎症因子
- BMP-2和地塞米松对人牙髓细胞增殖和分化的影响被引量：2
- 2017年
- 目的通过将BMP-2和地塞米松分别及联合作用于体外培养的人牙髓细胞,探讨两者对牙髓细胞增殖和分化能力的影响。方法取25岁以下患者因正畸原因拔出的无病变牙牙髓组织,采用组织块法体外培养人牙髓细胞并传至第3代,行波形蛋白和角蛋白免疫细胞化学染色鉴定。取生长状况良好的第3~5代牙髓细胞分为4组,A、B、C组分别加入100 ng/m L BMP-2、1×10–8 mol/L地塞米松、100 ng/m L BMP-2以及1×10–8 mol/L地塞米松,D组不添加诱导剂作为对照组。培养1、3、5、7 d绘制细胞生长曲线;培养5、7 d行RT-PCR检测成牙本质细胞形成标记基因表达情况,包括牙本质涎磷蛋白(dentin sialophoshoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP-1)、ALP;培养14 d行ALP染色并计算阳性染色面积占总面积比值;培养21 d行茜素红染色并测定562 nm波长处吸光度(A)值。结果成功分离培养呈长梭形的人牙髓细胞,经波形蛋白和角蛋白免疫细胞化学染色鉴定显示符合牙髓细胞的生物学特征。随培养时间延长,各组细胞均逐渐增加,5 d时达峰值,7 d时降至3 d水平。培养5 d,A、B、C组细胞显著多于D组,C组多于A组,A组多于B组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测示,培养5 d,A、B、C组ALP、DSPP、DMP-1 m RNA相对表达量均显著高于D组,C组显著高于A、B组,差异均有统计学意义(P<0.05);A、B组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。培养7 d,除A、B、C组DSPP m RNA相对表达量显著高于D组(P<0.05)外,其余各组间各基因相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。培养14 d ALP染色示,各组可见紫黑色沉淀,其中C组着色程度最深;经半定量测定,C组阳性染色面积占总面积比值显著高于A、B、D组,A、B组高于D组,差异均有统计学意义(P<0.05);A、B组间差异无统计学意义(P>0.05)。培养21 d茜素红染色示,C组矿化结节呈片状大面积分布,A、B组呈散在分布,D�
- 陆彦玲林田刘玉莹包丽荣吴煜
- 关键词：BMP-2地塞米松牙髓细胞增殖分化
- 人脐带间充质干细胞培养体系的优化被引量：3
- 2017年
- 目的:探讨LG-DMEM、DMEM/F12、α-MEM 3种培养基对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)体外培养生物学行为的影响,以优化hUCMSCs的培养条件。方法:分别用LG-DMEM、DMEM/F12、α-MEM 3种培养基培养已去除外膜及血管并剪碎的脐带组织块,采用流式细胞仪检测细胞表面标志物的表达情况;油红O染色及茜素红染色法检测细胞的多向分化能力;比较3种条件下组织块的细胞迁出情况及细胞增殖能力。结果:所培养细胞的细胞表面标志物和细胞分化能力均符合hUCMSCs的特性。α-MEM组hUCMSCs迁出速度和迁出率明显优于LG-DMEM组和DMEM/F12组。DMEM/F12组hUCMSCs增殖速度最快(P<0.05)。结论:α-MEM培养基能显著促进hUCMSCs从组织块爬出,DMEM/F12培养基可显著促进hUCMSCs的增殖。本研究为优化hUCMSCs的培养提供一种适用的方法。
- 林田陆彦玲包丽荣刘玉莹吴煜
- 关键词：脐带间充质干细胞培养基细胞培养
- 与脐带间充质干细胞共培养对脂多糖诱导的牙髓细胞炎症的影响
- 2021年
- 目的:探讨人牙髓细胞(h DPCs)和人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)共培养系统对脂多糖(LPS)诱导的炎症微环境的调节作用。方法:用不同浓度LPS(1μg/m L、10μg/m L、20μg/m L、50μg/m L)处理hDPCs和hUCMSCs,以获得诱导细胞炎症反应的适宜浓度。按1∶1的比例建立hDPCs与hUCMSCs直接及间接共培养体系,MTT法检测细胞增殖,分别采用qRT-PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测IL-6、IL-10和HGF mRNA相对表达量和蛋白分泌量。结果:10μg/m L LPS可以诱导细胞炎症反应。与单培养hDPCs组相比,直接共培养系统可促进细胞增殖,提高IL-10和HGF mRNA表达量及蛋白分泌量,降低IL-6 m RNA表达量及蛋白分泌量(P<0.05)。在间接共培养系统中,IL-6、IL-10和HGF的蛋白分泌量也显示出相同的趋势。此外,与单培养组的hDPCs相比,来自共培养系统的h DPCs高表达IL-10和HGF mRNA,但低表达IL-6(P<0.05)。结论:与单培养h DPCs组相比,共培养系统在下调LPS诱导的牙髓细胞炎症方面表现出更强的能力。
- 何凯丽刘玉莹林田林田吴煜
- 关键词：脐带间充质干细胞牙髓细胞共培养脂多糖
- 人脐带间充质干细胞与牙髓细胞体外共培养对细胞生物学的影响被引量：4
- 2018年
- 目的 :研究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)与经骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导后的人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)共培养对细胞生物学特性的影响。方法:分别取原代培养的hUCMSCs和hDPCs,分别通过流式细胞术、成骨诱导、成脂诱导以及免疫组织化学染色鉴定细胞;使用BMP2诱导hDPCs,14 d后检查其DSPP、ALP、DMP1的mRNA表达情况;按照1∶1、1∶5、5∶1的比例直接共培养hUCMSCs与经BMP2诱导后的hDPCs,实时定量PCR检测其DSPP、ALP、DMP1、OCN、VEGF、HGF、Nanog的mRNA表达情况。根据实时定量PCR结果选取1∶1组与单独培养hUCMSCs组、hDPCs组比较,分别培养21 d后进行茜素红染色,在酶标仪上于562 nm处检测沉淀物形成情况。采用SPSS21.0软件包对数据进行统计学分析。结果:直接共培养14 d后,1∶1细胞组的DSPP、ALP、DMP1、OCN、VEGF、HGF的mRNA表达量比单独培养的hUCMSCs组显著升高(P<0.05),而Nanog mRNA表达量比单独培养的hUCMSCs组降低(P<0.05)。茜素红染色结果显示,1∶1组的OD值显著高于hUCMSCs组(P<0.05)。结论:将hUCMSCs与经BMP2诱导后的hDPCs按照1∶1比例共培养,可以诱导细胞向成牙本质细胞方向分化,并促进血管生成因子的表达。
- 林田赵文青陆彦玲刘玉莹包丽荣吴煜
- 关键词：人脐带间充质干细胞牙髓细胞
