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采用我国痘苗病毒天坛株载体表达单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D被引量：3: 1991年; 木文从单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)基因组EcoRI H片段中分离出含有糖蛋白D(gD)基因的2.5kb DWA片段,插入带有痘苗病毒天坛株TK基因区段的pJC—2质粒p7.5k启动子的下游,转染TK^-143细胞,获得带有HSV-1 gD基因的重组痘苗病毒。采用HSV-1 gD单克隆抗体免疫胶体金技术进行电镜观察表明,重组痘苗病毒感染的细胞内有特异性HSV-1 gD抗原.重组病毒免疫家兔后6周可产生明显的HSV-1中和抗体。; 李景赞胡裕文容敏清阮力侯云德朱既明; 关键词：痘苗病毒单纯疱疹病毒糖蛋白D

柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)转移载体质粒pAp M2614的组建被引量：5: 1990年; 自从美国科学家G.Smith等首次建立苜蓿尺蠖核型多角体病毒(AcNPV)转移载体表达系统以来,已被广泛用于外源基因的表达,成为世界上一新的具有巨大潜力的载体表达系统。为了进一步提高表达产量,降低成本,日本科学家前田进建立了家蚕核型多角体病毒(BmNPV)载体表达系统,并获得了高效表达。柞蚕是我国特产,以蛹滞育越冬,保存时间长,个体大,可工厂化生产。因此,组建柞蚕NPV转移载体,进而建立该载体表达系统,是目前利用昆虫活体为宿主进行外源基因表达较理想的昆虫杆状病毒载体表达系统。; 张春发胡裕文范琦Roy Duncan李广泽Patrick Lee侯云德; 关键词：柞蚕核多角体病毒

β干扰素转基因小鼠的建立和特性研究: 1989年; 选择ICR小鼠为受试动物,应用显微注射仪,将线状人β干扰素基因,按2940～10000拷贝,1～3pL的剂量注射到供体受精卵的雄前核,然后移植到假孕受体的输卵管。实验先后注射了301个受精卵,移植到20只假孕受体,其中5只妊娠,产仔25只。从所获得的25只亲代小鼠的尾组织提取DNA,用内切酶BamHI消化,以[α-^(32)P]-dCTP标记的上述外源基因为特异性核酸探针,应用DNA印迹法检测这些小鼠DNA内外源基因的整合状况.结果表明,亲代小鼠中有人β干扰素基因重组子的转基因小鼠,杂交带在6.8kb位置。应用上述同样方法对亲代转基因小鼠的子1代组织DNA检测发现,绝大多数小鼠的标本除见到1条1.8kb人β干扰素基因的较弱杂交带外,还有数条5.0kb以上强弱各异的杂交带,表明这种外源基因不仅整合到了亲代小鼠的遗传物质内,而且可经垂直方式传给子代。人β干扰素基因的鼠体水平表达检测发现,1只子1代转基因小鼠的肿瘤组织浸出液中含有人β干扰素,滴度达160U/mL,表明整合在小鼠DNA内的人β干扰素外源基因不经诱导而有一定表达。; 史元元胡裕文陆德裕刘景华郝崇殷震; 关键词：转基因 Β干扰素小鼠胚胎移植

重组人α2a型干扰素在大肠杆菌中的表达被引量：1: 1990年; 作者应用DNA重组技术,将去信号肽的重组人x2a型干扰素(IFN)基因分别克隆入具有不同启动子的表达载体,转化相应的宿主菌后表达,结果显示具有P_RP_L双重启动子的表达载体表达x2a IFN最高,滴度可达22×10~9IU/L菌液。具有trp启动子的表达载体经β-吲哚乙酸诱导后,表达x2a IFN的水平可增加3～5倍,; 智刚侯云德张德震苏成芝胡裕文王克为; 关键词：DNA 干扰素大肠杆菌

人β干挠素基因在SV40晚期启动子控制下在小鼠骨髓瘤细胞中表达: 1989年; 人成纤维细胞干挠素(Hu-IFN-β)基因的HindⅡ片段,插入载体pSV2-dhfr质粒中SV40晚期启动子(Lp)下游PvuⅡ位点处。用此重组质粒与带有黄嘌呤磷酸核糖转移酶(XGPRT)基因的质粒pSV2-gpt共转染次黄嘌吟核糖转移酶(HGPRT)基因缺陷的小鼠骨髓瘤(SP2/0)细胞。在含有霉酚酸和氨基喋呤的选择培基中,筛选出有效地组成性表达的细胞株。在未加氨甲喋呤压力倍增的条件下,Hu-IFN-β抗病毒活性为1275U/10~5细胞,1ml,48小时。; 王晓鸣于曼王嘉玺吴淑华胡裕文侯云德; 关键词：共转染重组质粒

IFNβ基因编码序列在SV40早期启动子控制下在中国地鼠卵细胞中表达被引量：3: 1989年; 含有人成纤维细胞干扰素(IFNβ)基因编码序列的HindⅡ片段,去掉了IFNβ基因5′全部侧翼调控序列,与SV40早期区RNA起始部位下游60个bp处连接,与可选择标记二氢叶酸还原酶(dhfr)基因一道共转化dhfr缺陷的中国地鼠卵(CHO)细胞,经过初步筛选,在未经病毒等诱导条件下,在转化细胞株中测到构成性表达水平为852U/2×10~6细胞·ml·48小时的IFNβ干扰素活性。; 王晓鸣于曼王嘉玺吴淑华胡裕文侯云德; 关键词：启动子

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胡裕文