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金永明
作品数:
3
被引量:18
H指数:2
供职机构:
第二军医大学
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相关领域:
医药卫生
生物学
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合作作者
陆峰
第二军医大学基础部
周永春
第二军医大学
林爱友
第二军医大学
陆德如
第二军医大学基础部
贾林
第二军医大学
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巨噬细胞集落...
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蛋白质纯化
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包涵体
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大肠杆菌表达
机构
3篇
第二军医大学
作者
3篇
陆峰
3篇
金永明
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林爱友
2篇
周永春
2篇
陆德如
1篇
贾林
1篇
贾林
1篇
吴丹
1篇
郭嘉
1篇
瞿卉
传媒
2篇
生物工程学报
1篇
药物生物技术
年份
2篇
1997
1篇
1996
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3
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由大肠杆菌表达的重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的纯化和鉴定
被引量:3
1997年
由重组大肠杆菌表达的人粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 (rh GM- CSF)通过包涵体抽提、凝胶过滤、复性、疏水和离子交换层析获得纯度达到 97%的产品 ,比活为 3.2× 10 7IU/ mg,分子量为 14.84 k D.纯化获得的 rh GM- CSF为一酸性蛋白 ,等电点约为 5.2 ,NH2 ,-末端序列测定与文献报道一致 ,NH2 -末端不均一 ,其中带 Met的分子约占 59.5% ,成熟蛋白分子约占 2 5%。蛋白的纯化倍数为 3.9,生物活性回收率为 85.3%。
周永春
贾林
陆峰
金永明
林爱友
关键词:
粒细胞
巨噬细胞
集落刺激因子
纯化
重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子包涵体提取、复性和纯化的研究
被引量:15
1997年
由基因工程大肠杆菌表达的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGMCSF)以包涵体的形式存在于细胞中,通过破菌、洗涤获得包涵体,再经过溶解、凝胶过滤、复性、疏水和离子交换柱层析得到了均一的产品,经高压液相和SDSPAGE电泳测定纯度均大于98%,rhGMCSF的比活为32×107IU/mg,纯化获得的rhGMCSF为一酸性蛋白,等电点约为52,NH2末端前20个氨基酸序列测定结果与文献报道一致。rhGMCSF的NH2末端不均一,其中带Met的分子约占595%,第一个氨基酸为Ala的分子约占246%,为Pro的分子约占146%。纯化过程中蛋白的纯化倍数为39,生物活性总得率为691%,工艺重复性好。
周永春
陆峰
金永明
贾林
林爱友
陆德如
关键词:
包涵体
复性
纯化
重组人α8型干扰素的纯化与鉴定
1996年
采用酵母表达载体进行重组人α8型干扰素(HuIFNα8)的表达,该表达菌株可将重组α8型干扰素分泌进入培养基中,回收培养基进行纯化,然后利用超滤浓缩,先过S.SepharoseFF柱,再进行DEAESepharoseFF层析和G25脱盐,最后用高效液相HPLC,SDSPAGE丙烯酰胺凝胶电泳及肽图等方法对纯化产品进行鉴定。采用以上两步纯化方法纯化酵母分泌表达的重组人α8型干扰素纯度可达95%以上,其比活性为30×108u/mg。
郭嘉
陆峰
金永明
瞿卉
吴丹
陆德如
关键词:
蛋白质纯化
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