张波
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
- 供职机构:中国农业大学动物科技学院动物营养国家重点实验室更多>>
- 发文基金:教育部“新世纪优秀人才支持计划”动物营养学国家重点实验室开放课题基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 扬奇青霉α-半乳糖苷酶agl1基因在大肠杆菌中的表达与纯化研究
- 2009年
- 提取扬奇青霉总RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增α-半乳糖苷酶agl1基因的编码区DNA序列,连接到原核表达载体pET28a(+)的多克隆位点,获得重组表达载体,转化大肠杆菌BL21,通过IPTG诱导获得agl1基因的特异性表达。结果表明:8mol/L尿素变性处理后的重组蛋白,经过Ni2+亲和柱纯化,SDS-PAGE检测该重组蛋白分子量约82ku,与预测结果相符。纯化的酶蛋白依次经过6、4、2mol/L和0mol/L尿素梯度透析复性后,α-半乳糖苷酶酶活为0.4U/mL。
- 张波陈轶群李志民李一航曹云鹤
- 关键词:Α-半乳糖苷酶基因表达蛋白纯化