陈轶群
- 作品数:12 被引量:24H指数:3
- 供职机构:中国农业大学动物科技学院动物营养国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 一种酸性木聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达及体外活性评价研究被引量:1
- 2013年
- 通过构建硫色曲霉酸性木聚糖酶基因xynA串联双拷贝工程菌,提高酶的发酵活力。10 L发酵罐中,双拷贝菌株发酵活力达3 574 U/mL。重组木聚糖酶的最适催化温度为50℃,最适反应pH为2.2~3.4,在pH 1.7的酸性缓冲液下保持100 min,酶活残留70%以上。重组木聚糖酶对胃蛋白酶和胰蛋白酶也具有较好的耐受性。该木聚糖酶在低pH条件下的高催化活性、耐酸性及蛋白酶耐受性,使之具有较好的应用前景。通过体外模拟猪胃肠道环境以快速评价重组酶的作用效果。试验以小麦型日粮作为基础日粮,设计4个处理组,重组酶的添加量分别为0 U/kg、2 000 U/kg、4 000 U/kg和6 000 U/kg,每个处理5个重复,使用SDS-Ⅱ单胃动物仿生消化系统模拟猪的胃肠道环境消化试验日粮,消化后的残渣烘干后测定其总能、粗蛋白质、中性洗涤纤维含量以计算其消化率。结果表明,添加重组酸性木聚糖酶显著提高了总能、粗蛋白质(线性和二次;P<0.01)和中性洗涤纤维的消化率(线性和二次;P<0.05)。重组酶的最适宜添加量为4 000 U/kg。
- 杨雯涵郭晓晶陈轶群吕俊楠谢飞曹云鹤
- 关键词:毕赤酵母体外法
- 扬奇青霉α-半乳糖苷酶的定向进化及其毕赤酵母表达产物在生长猪日粮中的应用研究
- 陈轶群
- 关键词:Α-半乳糖苷酶定向进化毕赤酵母生长猪
- 枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的分泌表达被引量:8
- 2010年
- 目的:研制高效分泌表达枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的毕赤酵母基因工程菌株。方法与结果:将优化设计的枯草芽孢杆菌MA139β-甘露聚糖酶基因用EcoRⅠ/XbaⅠ双酶切,克隆到诱导型表达载体pPICzαA中α因子信号肽编码序列的下游,转化大肠杆菌筛选重组质粒,转化毕赤酵母X-33感受态细胞,经Zeocin筛选,获得重组表达菌株X-33/mann。将重组菌株在10L全自动发酵罐中进行高密度发酵培养,甲醇诱导72h发酵活力达到2100U/mL。重组甘露聚糖酶的最适催化温度为40℃,最适催化pH值为6.0。结论:枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中获得了高效分泌表达,具有开发作为饲料添加剂的潜能。
- 马威沈志娜陈轶群李志民曹云鹤
- 关键词:Β-甘露聚糖酶枯草芽孢杆菌毕赤酵母分泌表达
- 扬奇青霉α-半乳糖苷酶的定向进化及其在毕赤酵母中的表达
- 本试验旨在通过体外分子定向进化技术,提高野生型α-半乳糖苷酶的酶活.在前期研究中,本实验室从扬奇青霉中成功克隆到1个新的α-半乳糖苷酶,但该酶的野生型酶活不高,发酵活力仅为254U/ml.本试验中,利用易错PCR和DNA...
- 陈轶群曹云鹤
- 关键词:定向进化Α-半乳糖苷酶毕赤酵母
- α-半乳糖苷酶对生长猪生长性能及营养物质体内外消化率的影响被引量:5
- 2015年
- 本试验旨在探讨日粮不同仪一半乳糖苷酶添加水平对生长猪生长性能和营养物质表观消化率的影响,并研究仿生酶法对酶制剂评价试验的准确性。试验选用180头生长猪(杜×长×大),试验初始体重为(18.45±2.00)kg,按照随机区组试验设计,分为5个处理,每个处理6个重复,每个重复6头猪(公、母各半)。日粮d一半乳糖苷酶添加量为0、100、200、300、400U/l(g,试验期为24d。仿生酶法使用相同处理,每个处理5个重复,每个重复1根模拟消化管。结果表明:相对于其他处理组,添加300U/kg α-半乳糖苷酶显著提高了平均日采食量和平均日增重(P〈0.05);随着α-半乳糖苷酶添加量的增加,大部分营养物质的体内外消化率呈二次提高(P〈0.05);仿生酶法的消化率与体内消化率高度相关。本试验证明,18~33kg生长猪的该α-半乳糖苷酶最适宜添加水平为300U/kg,且仿生酶法可准确预测体内消化率,用于酶制剂的体外评价试验。
- 陈轶群杨雯涵郭晓晶韩帅娟杨勇智曹云鹤
- 关键词:Α-半乳糖苷酶消化率
- 扬奇青霉α-半乳糖苷酶的定向进化及其在毕赤酵母中的表达
- 本试验旨在通过体外分子定向进化技术,提高野生型α-半乳糖苷酶的酶活。在前期研究中,本实验室从扬奇青霉中成功克隆到1个新的α-半乳糖苷酶,但该酶的野生型酶活不高,发酵活力仅为254U/ml。本试验中,利用易错PCR和DNA...
- 陈轶群曹云鹤
- 关键词:定向进化Α-半乳糖苷酶毕赤酵母
- 一种制备抗菌肽的方法及其专用菌株
- 本发明公开了一种制备抗菌肽的方法及其专用菌株。本发明提供的一种制备抗菌肽的方法,包括如下步骤:1)种子培养:将巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115/Fow CGMCC No.3814接种到种子培养基...
- 曹云鹤董冰王春林陈轶群王晓秋林刚李德发
- 文献传递
- 抗菌肽研究进展被引量:10
- 2009年
- 抗菌肽是指存在于生物体内能抵抗外界微生物侵害,消除体内突变细胞的一类小分子多肽。自从Boman从天蚕蛹中分离出抗菌肽cecropin后,已在多种生物体内发现并分离出多种不同类型的抗菌肽,按其结构可分为4类。抗菌肽对微生物具有广谱抗菌作用,但其分离和合成的成本昂贵。用基因工程方法生产抗菌肽是将其大规模应用的有效手段,其中巴斯德毕赤酵母是最有效的表达体系之一。
- 陈轶群曹云鹤
- 关键词:抗菌肽生物活性基因工程
- 抗菌肽Fowlicidin-3在毕赤酵母中的表达及产物活性
- 目的:本研究的目的是在毕赤酵母中表达一种新型抗菌肽Fowlicidin-3。方法:选择酵母偏好密码子合成Fowlicidin-3基因,将其连接到pPIC9K载体上。重组质粒经过SacⅠ线性化后电转化毕赤酵母GS115,在...
- 陈轶群李志民曹云鹤
- 关键词:抗菌肽毕赤酵母抑菌活性
- 文献传递
- 扬奇青霉α-半乳糖苷酶agl1基因在大肠杆菌中的表达与纯化研究
- 2009年
- 提取扬奇青霉总RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增α-半乳糖苷酶agl1基因的编码区DNA序列,连接到原核表达载体pET28a(+)的多克隆位点,获得重组表达载体,转化大肠杆菌BL21,通过IPTG诱导获得agl1基因的特异性表达。结果表明:8mol/L尿素变性处理后的重组蛋白,经过Ni2+亲和柱纯化,SDS-PAGE检测该重组蛋白分子量约82ku,与预测结果相符。纯化的酶蛋白依次经过6、4、2mol/L和0mol/L尿素梯度透析复性后,α-半乳糖苷酶酶活为0.4U/mL。
- 张波陈轶群李志民李一航曹云鹤
- 关键词:Α-半乳糖苷酶基因表达蛋白纯化