王国柱
- 作品数：18 被引量：35H指数：4
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学农业科学更多>>
- 血吸虫病快速诊断试剂盒的研究和应用
- 辛晓芳王国治朱荫昌何伟张瑾王国柱薄淑英徐明曹国群
- 通过流行病学调查，在血吸虫病流行区与非流行区筛查收集血清，经过不同的试验方法和不同实验室反复测定，确定候选样本，标定并建立血吸虫病诊断试剂的国家参考品和质量控制标准，从而规范诊断试剂研发过程，促进新产品的应用推广，方便不...
- 关键词：
- 关键词：血吸虫病试剂盒
- 恶性疟原虫组氨酸富集蛋白Ⅱ、Ⅲ的序列多态性分析被引量：1
- 2014年
- 目的分析恶性疟原虫富组氨酸蛋白Ⅱ/Ⅲ（Pf HRPⅡ/Ⅲ）的序列多态性。方法采集云南疟疾流行区恶性疟患者血样20份,血涂片后镜检,并进行疟疾快速诊断试剂检测（RDTs）,同时提取各血样中恶性疟原虫基因组DNA,进行PCR扩增Pfhrp2和Pfhrp3核酸片段并测序。使用Bioedit软件对Pfhrp2和Pfhrp3基因序列进行比对,使用TRANSEQ软件推导出其编码的氨基酸序列。结果 20份血样经镜检和RDTs检测均为恶性疟原虫阳性。PCR扩增结果显示,各血样的Pfhrp2核酸片段约389～986 bp,Pfhrp3核酸片段大小约329～640 bp,应用测序获得的核酸序列推导出相应的氨基酸序列,Pf HRPⅡ氨基酸残基序列以1型（AHHAHHVAD）起始并最终以12型（AHHAAAHHEAATH）作为结尾,Pf HRPⅡ特征性氨基酸残基重复序列数量相对较多的分别有7型（AHHAAD）、2型（AHHAHHAAD）和6型（AHHATD）;Pf HRPⅢ含有重复较多的型别是16型（AHHAAN）和17型（AHHDG）;Pf HRPⅡ和Pf HRPⅢ均未发现11型（AHN）。结论 20份恶性疟患者血样中Pfhrp2和Pfhrp3存在诸多的核酸变异,Pf HRPⅡ和Pf HRPⅢ共享一些特征性重复序列。
- 杨英超张瑾王国柱薄淑英张影辛晓芳
- 关键词：恶性疟原虫
- 两种佐剂系统对重组疟疾蛋白疫苗免疫效果的影响
- 2014年
- 目的比较两种佐剂系统对重组疟疾蛋白疫苗免疫效果的影响。方法将BALB/c小鼠随机分为02、03佐剂组、Pr组和NS组,每组24只。02、03佐剂组、Pr组分别经大腿内侧肌肉注射15μg恶性疟原虫融合蛋白-2.9(combine protein 2.9 of Plasmodium falciparum,PfCP-2.9)+15μg恶性疟原虫环孢子蛋白-2(circumsporozoite protein of Plasmodium falciparum 2,PfCSP-2)+02佐剂系统[75μg BCG-CpG-DNA+0.2 mg A(lOH)3)]、15μg PfCP-2.9+15μg PfCSP-2+03佐剂系统[(50μg PolyI:C+0.2 mg A(lOH)3]和15μg PfCP-2.9+15μg PfCSP-2,NS组注射生理盐水。隔周免疫1次,共5次,于初次免疫2周后每周内眦采血,分离血清,采用ELISA法检测血清IgG值及抗体效价;于2、3、4、5次免疫后2周,无菌取小鼠脾脏,制备脾细胞悬液,采用ELISPOT法,对分泌IFNγ、IL-2、IL-4的特异性淋巴细胞数量进行检测。结果 02佐剂组小鼠血清IgG抗体效价在2次免疫后2周即可达到1∶105,03佐剂组在3次免疫后1周达到1∶105,而Pr组在5次免疫后2周达到1∶105,4次免疫后02、03佐剂组达到最高值。分泌IL-4的特异性淋巴细胞数,03佐剂组均明显高于02佐剂组、Pr组及NS组,02佐剂组3、4、5次免疫后才明显高于NS组,5次免疫后才明显高于Pr组(P均<0.05);分泌IL-2的特异性淋巴细胞数,02佐剂组与03佐剂组比较差异无统计学意义(P>0.05),3次免疫后02、03佐剂组均明显高于NS组,且03佐剂组也明显高于Pr组,4次免疫后02、03佐剂组、Pr组均明显高于NS组(P均<0.05),但三者之间差异无统计学意义(P>0.05);分泌IFNγ的特异性淋巴细胞数,02、03佐剂组、Pr组间差异无统计学意义(P>0.05),且03佐剂组在3次免疫后明显高于NS组,而02佐剂组、Pr组在5次免疫后才明显高于NS组(P均<0.05);02、03佐剂组分别在3、5次免疫后分泌IL-4的特异性淋巴细胞数量达到最高,且分别在5、3次免疫后,分泌IL-2的特异性淋巴细胞数量达到最高,二者均需5次免疫后分泌IFNγ的特异性淋�
- 刘向芹张影张金龙张瑾王国柱田喜凤辛晓芳
- 关键词：佐剂疟疾体液免疫
- 钩端螺旋体疫苗鉴别试验及其国家参考品的建立被引量：1
- 2005年
- 目的建立钩端螺旋体疫苗鉴别试验方法,制备系列免疫血清作为国家参考品。方法应用疫苗生产用菌株免疫家兔,制成免疫血清,冻干后进行标定,并经上海生物制品研究所和武汉生物制品研究所两单位采用试管凝集试验进行验证。结果冻干参考品血清效价符合要求,协作标定14批钩端螺旋体疫苗,结果一致。结论所制备的冻干参考品合格。钩端螺旋体疫苗鉴别采用试管凝集试验是可行的。
- 辛晓芳秦进才王国柱薄淑英张谨王国治
- 关键词：钩端螺旋体免疫血清试管凝集试验
- 冻干血吸虫病诊断试剂IgG免疫血清国家参考品的制备及标定被引量：7
- 2006年
- 目的建立血吸虫病诊断试剂IgG免疫血清国家参考品。方法收集血吸虫病疫区粪检筛查阳性病人血清和非疫区正常人血清,经标定和验证合格,制成冻干参考品。结果冻干参考品血清效价符合要求,2家协作单位用3种免疫学方法标定,结果一致。结论所制备的冻干参考品可以用于血吸虫病抗体诊断试剂的检定。
- 辛晓芳朱荫昌何伟张谨王国柱梁幼生徐明薄淑英曹国群王国治
- 关键词：血吸虫病诊断试剂
- 高效液相色谱法测定钩端螺旋体疫苗中的苯酚含量被引量：7
- 2013年
- 目的 采用高效液相色谱法（high performance liquid chromatography,HPLC）测定钩端螺旋体疫苗中的苯酚含量。方法 色谱条件：色谱柱：Novo-Pak C-18层析柱（3.9 mm×150 mm,4μm）,流动相：甲醇-超纯水（40：60,v：v）,流速：1.0 ml/min,检测波长：270 nm,柱温：30℃,进样量：10μl。对建立的方法进行线性范围、精密性、重现性、准确性验证及初步应用。结果 苯酚浓度在18.552～129.864μg/ml范围内,色谱峰面积与苯酚浓度呈良好的线性关系（r=0.999 7）;苯酚对照品溶液连续进样6次,主峰面积的相对标准偏差（RSD）为0.25%,保留时间的RSD为0.10%;用建立的方法检测6份钩端螺旋体疫苗样品中苯酚含量的RSD为0.5%;准确性试验的总平均回收率为100.6%,RSD为1.0%;HPLC法和溴量滴定法测定4批钩端螺旋体疫苗样品中苯酚含量的结果基本一致。结论HPLC法可以更准确地测定苯酚含量,且该方法操作简便、快速,精密性高,重现性好,无干扰,适用于钩端螺旋体疫苗成品中苯酚含量的检测。
- 张瑾王瑾杨英超张影薄淑英王国柱辛晓芳
- 关键词：高效液相色谱法苯酚
- 生物制品中杀菌防腐剂苯酚可能导致的异常反应被引量：3
- 2014年
- 目的了解生物制品中杀菌防腐剂苯酚可能导致的异常反应及其可能存在的剂量-反应关系。方法根据《中国药典》三部(2010版)附录ⅫF"异常毒性检查法",经小鼠腹腔注射浓度为0.3%、0.35%、0.4%、0.45%、0.5%的苯酚溶液(pH 6.10),观察其可能导致的异常反应,并记录及评分。结果不同浓度的苯酚溶液注射后第7天,各组小鼠体重均较注射前增加;浓度≥0.4%的苯酚组小鼠,可观察到异常反应;随着苯酚浓度的升高,小鼠出现的异常反应有逐渐加重的趋势。结论苯酚与其所导致的异常反应之间存在明显的剂量-反应关系。生物制品中苯酚浓度≥0.4%的产品不适宜选用该检查法。
- 杨英超王国柱张金龙张影薄淑英张瑾辛晓芳
- 关键词：苯酚生物制品异常毒性
- 检测螨变应原注射液中铝含量的电感耦合等离子体质谱法的建立及验证
- 2014年
- 目的建立电感耦合等离子体质谱（inductively coupled plasma-mass spectrometry,ICP-MS）法测定螨变应原注射液中的铝含量,并进行验证及初步应用。方法样品经微波消解后,采用ICP-MS法测定其中的铝含量。确定ICPMS法的线性范围及最低检出限,并进行精密性、重现性、准确性验证。用建立的ICP-MS法检测2批螨变应原注射液样品的铝含量;分别采用建立的ICP-MS法和该制品进口检验标准中的比色法检测5批螨变应原注射液样品的铝含量。结果建立的ICP-MS法的线性范围为0-100 ng/ml,r=0.9999;最低检出限为0.111 ng/ml;该方法重复检测6次10 ng/ml标准溶液铝含量的相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）为2.56%;检测6份样品铝含量的RSD值为1.13%;检测9份样品铝含量的总平均加标回收率为95.7%,RSD值为1.37%。该方法检测2批螨变应原注射液样品中的铝含量,结果均符合其标准要求;建立的ICP-MS法与比色法检测5批螨变应原注射液样品中铝含量的结果基本一致。结论建立了ICP-MS法检测螨变应原注射液中的铝含量,该方法操作简便、快速,精密性、重现性、准确性良好,为螨变应原注射液质量标准的提高奠定了基础。
- 张瑾杨英超张影薄淑英王国柱辛晓芳王瑾
- 关键词：铝电感耦合等离子体质谱
- 日本血吸虫感染经吡喹酮治疗后血清中抗体及细胞因子水平的变化被引量：1
- 2014年
- 目的:观察人感染日本血吸虫经吡喹酮治疗后血清中可溶性虫卵抗原(SEA)特异性抗体IgG、IgM及IL-4、IFN-γ水平的变化,并观察治疗后外周血中SEA特异性分泌IFN-γ的淋巴细胞数量的变化。方法:阳性组血清采自湖北省江陵市荆州县粪检血吸虫虫卵阳性患者15例,治疗组血清采自当地吡喹酮治疗8个月后3次粪检虫卵阴性者15例,阴性组血清采自当地的健康人群15例。通过ELISA的方法检测血清中SEA特异性IgG、IgM抗体及IL-4、IFN-γ的水平。取各组样本中3例进行ELISPOT实验,检测外周血中SEA特异性IFN-γ淋巴细胞数量。结果:ELISA结果表明,血清中SEA特异性IgG、IgM治疗组与阳性组相比显著性降低,且治疗组、阳性组均显著高于阴性组(P<0.05);血清中IL-4、IFN-γ水平治疗组比阳性组显著性降低(P<0.05)。ELISPOT实验结果显示外周血中SEA特异性分泌IFN-γ淋巴细胞数量阳性组显著高于治疗组及阴性组(P<0.05),而治疗组与阴性组之间的差异不具显著性(P>0.05)。结论:血清中IL-4、IFN-γ水平及外周血中IFN-γ淋巴细胞数量的检测可以用于吡喹酮治疗血吸虫感染疗效的考核,而血清中IgG、IgM水平变化对于吡喹酮疗效的考核也具有一定的辅助作用。
- 刘向芹张影张瑾王国柱薄淑英田喜凤辛晓芳
- 关键词：日本血吸虫可溶性虫卵抗原细胞因子酶联免疫斑点试验
- 高效液相色谱法测定螨变应原注射液中防腐剂苯酚含量被引量：10
- 2014年
- 目的：建立高效液相色谱法测定螨变应原注射液中苯酚含量。方法：采用Watershed Novo-Pak C18（4μm,3.9 mm×150 mm）色谱柱,流动相为甲醇-水（40∶60）,流速1.0 mL·min-1,检测波长为270 nm。结果：苯酚浓度在21.56~107.8μg·mL-1范围呈良好的线性,r=0.9999;平均回收率（n=9）为99.1%。结论：本文方法经方法学验证可用于螨变应原注射液苯酚含量的测定。
- 张瑾王瑾杨英超张影薄淑英王国柱辛晓芳
- 关键词：高效液相色谱法
