蒲勤
- 作品数：63 被引量：284H指数：9
- 供职机构：天水市第四人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金高等学校骨干教师资助计划军队杰出人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学语言文字化学工程更多>>
- 人牙周膜成纤维细胞与牙龈成纤维细胞差异表达一条新基因的克隆被引量：4
- 2000年
- 目的 :克隆人牙周膜成纤维细胞 (periodontalligamentfibroblast,PDLF)与牙龈成纤维细胞 (gin givalfibroblast,GF)差异表达的新基因。方法 :采用基于PCR和消减杂交的基因克隆技术构建体外培养的人PDLF与GF差异表达基因的扣除文库 ,采用酶切和反向杂交的方法筛选目的克隆 ,并进行测序和计算机分析。结果 :从构建的人PDLF与GF细胞差异表达基因的扣除文库中筛选到 818bp新基因。结论
- 郭希民吴补领肖明振蒲勤赵忠良
- 关键词：牙周膜成纤维细胞牙龈成纤维细胞基因克隆
- 人骨形成蛋白-3成熟肽cDNA的扩增、克隆和序列测定
- 1997年
- 骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)作为TGF-β超家族成员,可以诱导未分化的间质细胞向软骨细胞分化,然后通过软骨内成骨形成骨组织,对难治性骨折的愈合及各种骨缺损的修复有明显的促进作用。另外,BMP在胚胎发生和神经发育过程中也起重要作用。但是由于BMP在骨组织中含量甚微,提取方法繁琐,故不能满足临床应用和基础研究需要,随着人BMP(hBMP)1～13 cDNA基因的克隆,人们已在COS。
- 朱帮福蒲勤张俊杰陈南春陈苏民
- 关键词：成熟肽大肠杆菌中表达CDNA文库胚胎发生
- 简化提取核心蛋白聚糖的方法及扩大活性检测范围被引量：2
- 2001年
- 目的简化分离、纯化核心蛋白聚糖的程序 ,了解其对瘤细胞生长的抑制作用。方法经匀浆、溶解沉淀、透析、研磨等步骤制备核心蛋白聚糖 ,MTT染料结合法检测A5 49、BT32 5等四种癌细胞体外生物学活性。结果简化法制备的核心蛋白聚糖得率为 3mg/g大鼠肌肉 ,SDS PAGE显示在相对分子质量 36～ 38kD间有两条带 ,除明显抑制A5 49生长外 ,对Hela、胃 790 1及BT32 5三者同样具有抑制生长活性 ,抑制率依次为 6 9.19%、48.19%、5 4.47%、6 7.80 %。结论此法成本低、纯度好。
- 王国华陈志阳王晓锁蒲勤药立波
- 关键词：核心蛋白聚糖癌细胞株活性检测
- 用消减杂交技术克隆人成骨样细胞机械牵张力敏感基因的研究被引量：2
- 2004年
- 目的 对人成骨样细胞机械牵张力敏感基因进行克隆研究。方法 对人成骨样细胞Saos_2进行二维方向上的加载 ,变形幅度为 12 % ,牵拉频率为 6周期 分钟 ,加载 12h后分别提取牵张力作用后Saos_2细胞及未作处理的正常Saos_2对照细胞的mRNA ,反转录制备cDNA ,将cDNA进行消减杂交 ,构建加载细胞与未加载细胞的差异表达基因的扣除cDNA文库 ,克隆后进行序列测定。结果 克隆到的基因片段中 ,功能已知基因片段 15个 ,功能未知基因片段 2个 ,其中牵张力敏感基因 1(SSG1)位于 9号染色体上 ,功能未知 ;牵张力敏感基因 2 (SSG2 )位于 18号染色体上 ,与转录因子 2 ,4高度同源。结论 用消减杂交技术可以对人成骨细胞样机械牵张力敏感基因进行有效的克隆研究。
- 冯雪丁寅段银钟林珠欧阳为明蒲勤
- 关键词：消减杂交基因克隆成骨细胞机械牵张力
- 论《傅青主女科》对月经经期的调节
- 本文对《傅青主女科》调经篇中月经经期调节的理、法、药进行了探索，就清肝肾之虚火与补肝肾之经血在调理月经经期错乱上的灵活应用予以探讨，进而加深对傅氏调经思想的理解。
- 蒲勤
- 关键词：中医妇科学《傅青主女科》中药治疗
- pcDNA_3-hBMP_2基因转染成纤维细胞及其稳定表达被引量：13
- 2001年
- 目的 探讨外源性hBMP2 基因在成纤维细胞获得稳定表达的可行性。 方法 将hBMP2 的cDNA连入真核表达载体pcDNA3 ,形成重组真核表达载体pcDNA3 hBMP2 ,在脂质体介导下 ,将其导入小鼠成纤维细胞株 (NIH3T3)。通过G418筛选获得阳性克隆 ,并继续培养 4周 ,然后用原位杂交和免疫组织化学方法检测BMP2 基因在成纤维细胞NIH3T3内的稳定表达情况。 结果 经原位杂交和免疫组织化学证实 ,转染pcDNA3 hBMP2 后的成纤维细胞NIH3T3内有大量hBMP2 mRNA的转录和蛋白的表达。 结论 在脂质体介导下 ,hBMP2
- 栗向东胡蕴玉蒲勤朱邦福
- 关键词：骨缺损基因表达成纤维细胞基因转染基因治疗
- 骨形成蛋白对小鼠造血型急性放射损伤治疗作用的研究被引量：8
- 2001年
- 小鼠经60 Coγ射线 6 .5 - 7.5Gy照射后 ,分别于肌袋内植入纯化牛BMP ,或腹腔内注入可溶性rhBMP - 2m ,或移植Pbk -hBMP - 2 /NIH3T3入腹腔内 ,观察动物的 30d活存情况 ,并检测几种造血参数。结果表明 ,pbBMP(纯化牛骨形成蛋白 )、hBMP - 2m (重组骨形成蛋白 - 2多肽 )Pbk -BMP - 2 /NIH3T3cellline(PBKhBMP - 2转基因细胞株 )对小鼠 6 .5、7.0、7.5Gyγ射线照射后急性放射造血损伤有治疗作用 :GM -CFU集落形成率、各项造血参数和 30d活存率均较对照组有显著性差异 (p <0 .0 1)。本工作结果提示 ,BMP对成年动物放射所致造血损伤具有治疗作用 ,其机理与促进已损伤的造血功能的修复作用有关。
- 田琼张绍章蒲勤张发科Hannah X.H.
- 关键词：BMP骨形成蛋白急性放射病
- rhBMP-2/聚乳酸与聚乙醇酸共聚物载药微球的制备及成骨活性研究被引量：9
- 2006年
- 目的制备一种具有良好降解性和成骨活性可注射的rhBMP-2载体材料。方法采用复乳-溶剂蒸发技术制备携载rhBMP-2的聚乳酸与聚乙醇酸共聚物P(LGA)微球。测定材料的制备参数及其特性,包括材料的形貌、载药率、释药速度,并将载药微球植入鼠股部肌袋,通过X线、组织学评价载体材料的异位成骨能力。结果载药微球粒径为(253±64)μm,载药率0.52%±0.14%,载药微球rhBMP-2体外释放24h时为15.2%±0.8%,随后呈持续缓慢释放,28d时总计达48.6%±5.3%。载药微球植入鼠股部肌袋4周,材料周围有明显的骨形成。结论载有rhBMP-2的PLGA微球具有良好的缓释效果和生物活性,是一种较为理想的生长因子载体材料和释放系统。
- 费正奇胡蕴玉吴道澄吴红蒲勤
- 关键词：RHBMP-2载药微球
- 重组人骨形成蛋白-2对细胞成骨分化的作用被引量：11
- 2002年
- 目的进一步探讨ｒｈＢＭＰ－２的促细胞成骨分化作用，以期找到合适的成骨分化标志作为ｒｈＢＭＰ－２的定量活性测定指标。方法 首先表达制备ｒｈＢＭＰ－２，用小鼠股部肌袋包埋法进行诱骨活性实验，然后检测ｒｈＢＭＰ－２作用后的骨髓基质细胞（ＭＳＣ）、ＮＩＨ３Ｔ３和Ｃ２Ｃ１２等３种细胞的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）和骨钙素（ＯＣ）、细胞总蛋白合成量以及细胞增殖的变化。结果 ｒｈＢＭＰ－２具有良好的诱导骨形成的活性，可增加３种细胞的ＯＣ含量和蛋白合成量，对ＭＳＣ的ＡＬＰ活性变化影响明显，且可促进ＭＳＣ的增殖，抑制ＮＩＨ３Ｔ３细胞的生长。结论 ｒｈＢＭＰ－２具有促进上述细胞向成骨细胞分化的作用；在一定剂量范围内，ｒｈＢＭＰ－２的作用与细胞骨钙素合成量的增加呈线性正相关，故定量测定ＯＣ的含量基本可反映ｒｈＢＭＰ－２的活性。
- 朱帮福张斌李毅纪宗玲蒲勤柴玉波陈南春陈苏民
- 关键词：重组人骨形成蛋白-2成骨分化细胞分化
- 三种抗人TNF-α重组抗体的重折叠
- 2002年
- 目的 探讨重组抗体蛋白的复性规律 .方法 用共溶剂氧化还原、表面活性剂介导、变性剂介导及抗原介导复性四种条件对抗人 TNF- α单域抗体、单链抗体 GST融合蛋白进行了分离纯化 .结果 复性产物的可溶率为 1 0 %左右 .结论 几种复性方法均可使目的蛋白复性 。
- 陈萍徐鹏蒲勤邓健蓓药立波
- 关键词：复性抗体肿瘤坏死因子重折叠
