- 载脂蛋白E修饰脂质体介导pGenesil-1质粒高效转染HL-7702肝细胞
- 2015年
- 我们将肝靶向蛋白载脂蛋白E（apoE）与脂质体结合[1-2],构建apoE修饰脂质体（apoE-lipoplexes）,提高基因对肝细胞的转染效率.
- 于保锋高然朋李春锋莱智勇牛凯秦琴解军徐钧
- 关键词：载脂蛋白E脂质体介导肝细胞质粒APOE转染效率
- 食管癌患者外周血CD4<'+>CD25<'Hi>CD127<'lo>调节性T细胞的水平变化及其临床意义
- 目的：观察食管癌患者外周血中CD4+CD25HiCD127lo调节性T细胞(T regulatory cells，Treg)及相关免疫细胞和IL-10、TGF—β1的变化及其与临床及病理特征之间的关系，探讨其临床意义(C...
- 牛凯
- 关键词：调节性T细胞外周血酶联免疫吸附法
- 文献传递
- 载脂蛋白ApoE修饰脂质体对肝癌细胞的靶向转染被引量：3
- 2014年
- 目的 将载脂蛋白E （ApoE）和普通脂质体（Lipoplexes）耦联,构建一种具有肝癌细胞靶向性的基因转运载体ApoE-Lipoplexes,以提高转染效率.方法 将ApoE与Lipoplexes耦联,形成ApoE-Lipoplexes,分别用两种载体包裹pGenesil-1质粒并转染HepG2和Huh-7肝癌细胞,用倒置荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的表达,并用流式细胞仪检测转染效率,比较两种载体对肝癌细胞的转染效率.结果 构建了粒径150 nm的Lipoplexes和ApoE-Lipoplexes两种脂质体,Lipoplexes对HepG2和Huh-7的转染效率分别为（4.7±1.4）％和（21.0±0.6）％,ApoE-Lipoplexes的转染效率分别为（13.8±1.8）％和（51.5±1.8）％,ApoE-Lipoplexes对肝癌细胞的转染效率显著高于Lipoplexes（P＜0.05）.结论 成功构建一种对肝癌细胞具有较高转染效率的非病毒基因转运载体.
- 秦琴莱智勇高然朋牛凯于保锋解军徐钧
- 关键词：基因治疗载脂蛋白E靶向治疗
- HepG-2、Bel-7402细胞裸鼠皮下移植性肝癌模型成瘤条件探索及其病理、免疫组化分析
- <正>目的:肝细胞癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一,为深入研究肝癌的发病机理,需要建立肝癌动物模型。本课题拟通过比较HepG-2、Bel-7402两种人肝癌细胞株在不同条件下行裸鼠皮下移植时成瘤率的不同,以及两种细胞成瘤后...
- 牛凯莱智勇徐钧解军张小曼李春锋高然朋王海龙张悦红弓韬于保锋
- 文献传递
- 构建靶向性载脂蛋白E修饰脂质体介导的HSVtk/丙氧鸟苷系统被引量：1
- 2015年
- 背景:自杀基因系统无选择性,不仅能杀伤癌细胞,对正常细胞也有同样作用,所以构建靶向性基因治疗载体成为迫切需要解决的问题。目的:评价载脂蛋白E修饰脂质体(apo E-lipoplexes)介导TK/丙氧鸟苷自杀基因质粒转染对Li-7肝癌细胞的杀伤效果。方法:apo E-lipoplexes包裹p AFP-TK-IRES2-EGFP真核表达质粒转染Li-7细胞,筛选HSVtk稳定表达细胞克隆(Li-7-tk),荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白表达,Western blotting检测HSVtk基因表达,MTT法评价HSVtk/丙氧鸟苷系统对Li-7肝癌细胞的杀伤作用。结果与结论:自杀基因质粒转染Li-7细胞经筛选得到稳定克隆(Li-7-tk),HSVtk/丙氧鸟苷系统作用于Li-7细胞后,细胞凋亡明显增加(P<0.01)。在甲胎蛋白阳性的Li-7肝癌细胞中,自杀基因载体稳定表达并有效杀灭癌细胞。
- 张悦红高然朋于保锋王惠珍张栋弓韬郭睿王海龙程牛亮解军牛凯秦琴徐钧
- 关键词：脂质体甲胎蛋白肝癌细胞增强型绿色荧光蛋白
- 华蟾素对人肝癌细胞Bel-7402细胞增殖及周期的影响被引量：10
- 2013年
- 目的:观察华蟾素注射液对人肝癌Bel-7402细胞增殖及周期的影响。方法:将不同浓度的华蟾素注射液作用于Bel-7402细胞,应用噻唑蓝还原法(MTT比色法)检测华蟾素注射液对Bel-7402细胞增殖的影响;应用流式细胞术(FCM)检测Bel-7402细胞周期分布。结果:华蟾素注射液可以抑制Bel-7402细胞增殖,其抑制作用与作用时间和剂量呈正相关,并可使细胞阻滞于G2/M期。结论:华蟾素注射液能够抑制人肝癌细胞Bel-7402的增殖,并可使细胞阻滞于G2/M期,诱导细胞凋亡。
- 牛凯成宇晶
- 关键词：华蟾素肝癌BEL-7402细胞周期
- 索拉非尼对Bel-7402细胞裸鼠移植性肝癌模型的疗效观察
- 2013年
- 肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是临床上最常见的恶性肿瘤之一，对于肝癌的治疗，手术切除仍然是最主要的方法。但很多肝癌发现时已到晚期，丧失了手术的机会。索拉非尼（sorafenib）是一种新型的抗肿瘤药物，被认为是治疗晚期肝癌的有效药物，它同时作用于肿瘤细胞和肿瘤血管，对抑制肿瘤生长及远处转移有一定疗效。本实验利用裸鼠移植性肝癌模型来研究索拉非尼对肝癌的抑制作用及其对肿瘤远处转移效应的影响。
- 牛凯成宇晶
- 关键词：移植性肝癌模型BEL-7402细胞索拉非尼裸鼠抑制肿瘤生长
- 几种脂质体对Li-7肝癌细胞株的转染效率研究被引量：1
- 2014年
- 目的比较Lipofectamine2000、lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体对Li-7肝癌细胞的转染效率。方法构建普通阳离子脂质体lipoplexes和载脂蛋白apoE修饰脂质体apoE-lipoplexes;使用Lipofectamine2000,lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体运载以EGFP为报告基因的pGenesil-1质粒转染Li-7肝癌细胞,通过荧光显微镜观察EGFP蛋白的表达,流式细胞术检测三种脂质体的转染效率。结果 Lipofectamine2000、lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体转染效率分别为(18.63±0.57)%,(24.07±0.91)%,(28.93±0.50)%,3组间两两比较均有显著性差异(P<0.01)。结论 Li-7肝癌细胞的转染效率与脂质体的结构有关,提示脂质体结构改造可能成为提高转染效率的新策略。
- 高然朋于保锋李春锋莱智勇牛凯秦琴解军徐钧
- 关键词：脂质体肝癌细胞转染效率
- ApoE修饰脂质体定向介导TK基因对肝癌细胞杀伤作用
- 目的:生物体内载脂蛋白apoE可以与肝细胞膜上的H-DL受体结合,介导生物体内胆固醇和脂类向肝细胞的转运过程.本课题尝试将载脂蛋白apoE与脂质体结合,构建成为apoE修饰脂质体,作为肝癌非病毒基因治疗载体的主要构成元件...
- 莱智勇弓韬于保锋徐钧牛凯解军张小曼李春锋高然朋王海龙张悦红
- 胸外科术后并发急性肺动脉栓塞的诊治体会被引量：1
- 2009年
- 杨斌牛凯丁悌
- 关键词：急性肺动脉栓塞胸外科手术后术后并发PULMONARY诊治
