高然朋
- 作品数：11 被引量：6H指数：1
- 供职机构：山西医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 构建靶向性载脂蛋白E修饰脂质体介导的HSVtk/丙氧鸟苷系统被引量：1
- 2015年
- 背景:自杀基因系统无选择性,不仅能杀伤癌细胞,对正常细胞也有同样作用,所以构建靶向性基因治疗载体成为迫切需要解决的问题。目的:评价载脂蛋白E修饰脂质体(apo E-lipoplexes)介导TK/丙氧鸟苷自杀基因质粒转染对Li-7肝癌细胞的杀伤效果。方法:apo E-lipoplexes包裹p AFP-TK-IRES2-EGFP真核表达质粒转染Li-7细胞,筛选HSVtk稳定表达细胞克隆(Li-7-tk),荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白表达,Western blotting检测HSVtk基因表达,MTT法评价HSVtk/丙氧鸟苷系统对Li-7肝癌细胞的杀伤作用。结果与结论:自杀基因质粒转染Li-7细胞经筛选得到稳定克隆(Li-7-tk),HSVtk/丙氧鸟苷系统作用于Li-7细胞后,细胞凋亡明显增加(P<0.01)。在甲胎蛋白阳性的Li-7肝癌细胞中,自杀基因载体稳定表达并有效杀灭癌细胞。
- 张悦红高然朋于保锋王惠珍张栋弓韬郭睿王海龙程牛亮解军牛凯秦琴徐钧
- 关键词：脂质体甲胎蛋白肝癌细胞增强型绿色荧光蛋白
- 一种靶向肝脏细胞的运载体及其制备方法
- 本发明提供了一种将基因靶向性导入肝脏细胞的运载体及其制备方法，所述运载体是由脂质体和载脂蛋白组成的复合物，其中脂质体为由双十二烷基二甲基溴化铵与二油酰磷脂酰乙醇胺制成，并经二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺修饰的...
- 于保锋牛栓成郭睿解军张小曼李春锋高然朋刘丹郝宇卉牛璐婷梁样红杨丽娟胡晓年向前张悦红陈显久
- ApoE修饰脂质体定向介导TK基因对肝癌细胞杀伤作用
- 目的:生物体内载脂蛋白apoE可以与肝细胞膜上的H-DL受体结合,介导生物体内胆固醇和脂类向肝细胞的转运过程.本课题尝试将载脂蛋白apoE与脂质体结合,构建成为apoE修饰脂质体,作为肝癌非病毒基因治疗载体的主要构成元件...
- 莱智勇弓韬于保锋徐钧牛凯解军张小曼李春锋高然朋王海龙张悦红
- 一种靶向肝脏细胞的运载体及其制备方法
- 本发明提供了一种将基因靶向性导入肝脏细胞的运载体及其制备方法，所述运载体是由脂质体和载脂蛋白组成的复合物，其中脂质体为由双十二烷基二甲基溴化铵与二油酰磷脂酰乙醇胺制成，并经二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-马来酰亚胺修饰的...
- 于保锋牛栓成郭睿解军莱智勇张小曼李春锋高然朋刘丹郝宇卉牛璐婷梁样红杨丽娟胡晓年向前张悦红陈显久
- 文献传递
- 新型靶向基因载体介导TK基因对肝癌细胞选择性杀伤作用研究
- 目的:1.使用载脂蛋白E(apoE)与阳离子脂质体组合成一种具有靶向性结合肝(癌)细胞的基因运输载体apoE-lipoplexes,检测其转染肝(癌)细胞的效率。2.采用甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)启动...
- 高然朋
- 关键词：肝癌细胞胸苷激酶
- 文献传递
- 载脂蛋白E修饰脂质体介导pGenesil-1质粒高效转染HL-7702肝细胞
- 2015年
- 我们将肝靶向蛋白载脂蛋白E（apoE）与脂质体结合[1-2],构建apoE修饰脂质体（apoE-lipoplexes）,提高基因对肝细胞的转染效率.
- 于保锋高然朋李春锋莱智勇牛凯秦琴解军徐钧
- 关键词：载脂蛋白E脂质体介导肝细胞质粒APOE转染效率
- 利用间接免疫荧光染色检测生精细胞核蛋白的方法
- 利用间接免疫荧光染色检测生精细胞核蛋白的方法，是从动物的睾丸组织中分离曲精小管，利用低渗液处理生精细胞，采用间接免疫荧光染色方法检测生精细胞核蛋白，其中，所述的低渗液中包括有17mM柠檬酸钠、50mM蔗糖、5mMEDTA...
- 郭睿闫萍于保锋梁样红杨丽娟张小曼刘丹李春锋高然朋解军
- 文献传递
- 几种脂质体对Li-7肝癌细胞株的转染效率研究被引量：1
- 2014年
- 目的比较Lipofectamine2000、lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体对Li-7肝癌细胞的转染效率。方法构建普通阳离子脂质体lipoplexes和载脂蛋白apoE修饰脂质体apoE-lipoplexes;使用Lipofectamine2000,lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体运载以EGFP为报告基因的pGenesil-1质粒转染Li-7肝癌细胞,通过荧光显微镜观察EGFP蛋白的表达,流式细胞术检测三种脂质体的转染效率。结果 Lipofectamine2000、lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体转染效率分别为(18.63±0.57)%,(24.07±0.91)%,(28.93±0.50)%,3组间两两比较均有显著性差异(P<0.01)。结论 Li-7肝癌细胞的转染效率与脂质体的结构有关,提示脂质体结构改造可能成为提高转染效率的新策略。
- 高然朋于保锋李春锋莱智勇牛凯秦琴解军徐钧
- 关键词：脂质体肝癌细胞转染效率
- 载脂蛋白ApoE修饰脂质体对肝癌细胞的靶向转染被引量：3
- 2014年
- 目的 将载脂蛋白E （ApoE）和普通脂质体（Lipoplexes）耦联,构建一种具有肝癌细胞靶向性的基因转运载体ApoE-Lipoplexes,以提高转染效率.方法 将ApoE与Lipoplexes耦联,形成ApoE-Lipoplexes,分别用两种载体包裹pGenesil-1质粒并转染HepG2和Huh-7肝癌细胞,用倒置荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的表达,并用流式细胞仪检测转染效率,比较两种载体对肝癌细胞的转染效率.结果 构建了粒径150 nm的Lipoplexes和ApoE-Lipoplexes两种脂质体,Lipoplexes对HepG2和Huh-7的转染效率分别为（4.7±1.4）％和（21.0±0.6）％,ApoE-Lipoplexes的转染效率分别为（13.8±1.8）％和（51.5±1.8）％,ApoE-Lipoplexes对肝癌细胞的转染效率显著高于Lipoplexes（P＜0.05）.结论 成功构建一种对肝癌细胞具有较高转染效率的非病毒基因转运载体.
- 秦琴莱智勇高然朋牛凯于保锋解军徐钧
- 关键词：基因治疗载脂蛋白E靶向治疗
- PBI-SUR-TK载体靶向介导HSV-TK自杀基因诱导肝癌细胞凋亡
- 2016年
- 目的:构建Survivin启动子调控的表达载体,并检测在启动子调控下HSV-TK自杀基因对肝癌细胞HepG_2和正常肝细胞HL-7702凋亡的影响。方法:合成含TK基因的质粒PBI-SUR-TK,利用脂质体Lipofectamine 2000将其导入肝癌细胞和肝细胞。然后分别运用RT-PCR和Western blot特异性检测基因和蛋白的表达情况;利用CCK8方法检测细胞增殖情况,流式细胞仪上机检测细胞凋亡情况。结果:肝癌细胞转染组有更多的TK基因表达产物,增殖情况减弱,凋亡情况明显。结论:Survivin启动子驱动的HSV-TK/GCV自杀基因系统对肝癌可能有一定的治疗作用。
- 张英敏赵娜李勇芳孟凡秀张琪高然朋张悦红于保锋郭睿王海龙解军徐钧
- 关键词：SURVIVIN启动子肝癌HSV-TK/GCV
