朱旭红
- 作品数：4 被引量：19H指数：2
- 供职机构：甘肃省人民医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养及其生长特性和表型被引量：15
- 2007年
- 间充质干细胞（MSC）是一种具有多向分化、体外扩增、自我更新能力的细胞。本研究旨在分离rMSCs，并观察其类型特征及生长特性。
- 李爽朱家源朱斌唐冰李新强朱旭红毕良宽
- 关键词：骨髓间充质干细胞体外分离培养表型自我更新能力多向分化
- 大鼠白细胞介素10复制缺陷型重组腺病毒前体质粒的构建被引量：2
- 2007年
- 目的:构建含有大鼠白细胞介素10基因的重组复制缺陷型腺病毒前体质粒pAd.rIL-10,为后续病毒构建、真核表达及其动物模型研究提供实验基础。方法:实验于2005-07/2006-04在中山大学附属第一医院普通外科实验室完成。①实验材料:SD大鼠购自中山大学动物实验中心(SCXK(粤)2004-0011)。AdEasy系统由美国John Hopkins肿瘤研究中心惠赠。Thermoscript TMR Tkit和Trizol为Invitrogen产品;质粒小量提取试剂盒(QIAGENE公司);PCR试剂盒、限制性内切酶HindⅢ和SaⅡ、DNA marker(大连宝生物公司);限制性内切酶PmeⅠ(英国NEB公司)。克隆大鼠白细胞介素10基因引物合成及测序由上海博亚生物技术有限公司完成。②实验方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从健康SD大鼠脾脏新鲜组织中提取的总RNA中,克隆大鼠白细胞介素10基因,采用AdEasy-1腺病毒载体系统,经两步氯化钙法通过E.ColiB J5183细菌内同源重组而获得重组腺病毒前体质粒pAd.rIL-10。③实验评估:使用PCR、酶切及DNA测序方法证实重组质粒中的目的基因。结果:①克隆大鼠白细胞介素10基因:用RT-PCR的方法从健康SD大鼠脾脏组织提取的总RNA中扩增出大鼠白细胞介素10基因,基因两端加上了限制酶酶切位点,均经测序证实。②重组腺病毒前体质粒pAd.rIL-10的鉴定:重组转移质粒pAdTrack-CMV.rIL-10及腺病毒前体质粒pAd.rIL-10均含大鼠白细胞介素10基因,经Hind Ⅲ和SaⅡ双酶切后均获得538bp的大鼠白细胞介素10片段。结论:采用AdEasy-1系统经两步氯化钙法成功构建出大鼠白细胞介素10重组腺病毒前体质粒,方法简便易行,结果稳定可靠。
- 李爽朱家源唐冰朱斌李新强朱旭红毕良宽
- 关键词：白细胞介素10腺病毒载体基因治疗
- 肿瘤新生淋巴管生成与肿瘤淋巴转移被引量：3
- 2012年
- 引言肿瘤的侵袭和转移是癌症患者死亡的重要因素之一,血管和淋巴管转移是癌细胞形成远处转移的主要途径。过去认为血管发生（angiogenesis）在肿瘤生长和演进过程中发挥着关键作用,
- 李爽朱旭红
- 关键词：淋巴管生成淋巴转移肿瘤干细胞血管内皮生长因子
- SD大鼠白细胞介素10复制缺陷型重组腺病毒的构建及鉴定(英文)被引量：1
- 2009年
- 背景:重组腺病毒质粒的构建是重组腺病毒制备过程中的中枢环节,传统的细胞内同源重组法步骤多、成功率低、实验周期长。目的:构建含有大鼠白细胞介素10(rIL-10)基因的重组复制缺陷型腺病毒Ad.rIL-10,为真核表达及其动物模型的研究提供实验基础。设计、时间及地点:开放性实验,于2005-07/2006-04在中山大学附属第一医院完成。材料:SD大鼠1只。AdEasy系统由美国JohnHopkins肿瘤研究中心惠赠。ThermoscriptTMRTkit和Trizol为Invitrogen产品;HEK-293保存于中山大学动物实验中心细胞库;克隆大鼠白细胞介素10基因引物合成及测序由上海博亚生物技术有限公司完成。方法:采用反转录聚合酶链反应的方法从健康SD大鼠脾脏新鲜组织中提取的总RNA中克隆rIL-10基因,采用AdEasy-1腺病毒载体系统经E.ColiBJ5183细菌内同源重组及HEK-293包装而获得重组腺病毒Ad.rIL-10。主要观察指标:用Westernblot和RT-PCR的方法鉴定Ad.rIL-10并进行滴度测定。结果:自健康SD大鼠脾脏组织中克隆rIL-10基因,构建出重组腺病毒Ad.rIL-10。经PCR扩增、酶切鉴定、DNA测序最终确定插入序列为rIL-10,Westernblot和RT-PCR均检测出细胞内rIL-10基因及其蛋白表达。再通过扩增、纯化后获得滴度为1.0×1014pfu/mL的重组腺病毒。结论:采用AdEasy-1系统,经细菌内同源重组及HEK-293细胞包装、扩增,纯化后获得足够数量和质量的病毒,方法简便易行,结果稳定可靠。
- 李爽宋仁刚唐冰朱斌朱旭红朱家源毕良宽
- 关键词：白细胞介素10腺病毒载体基因疗法
