赵永军
- 作品数:4 被引量:7H指数:2
- 供职机构:中国人民解放军兽医大学更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 犬Ⅱ型腺病毒弱毒DNA的酶切分析及分子克隆被引量:1
- 1992年
- 犬Ⅱ型腺病毒(CAV-2)是犬喉气管炎的病原。CAV-2感染通常只引起轻微的呼吸道疾病,但在其它病毒或细菌继发感染下可诱发较严重的肺炎、支气管炎、扁桃体炎和咽炎。此病毒与引起传染性犬肝炎(ICH)的CAV-1有密切的抗原相关性。CAV-2弱毒株可产生抗CAV-1的保护性免疫,是目前用于预防ICH和狐狸脑炎的有效疫苗。由于CAV-2本身致病不严重,致弱的CAV-2更为安全。因此,用弱毒株构建成基因工程载体,把犬细小病毒或犬及狐狸的其它病毒的主要抗原基因重组到其中的非必需区,可获得安全、有效和多用的病毒载体疫苗。为此,我们首先分析了CAV-2弱毒DNA的酶切图谱,并克隆了全病毒DNA的76.5%。
- 童光志赵永军白丽萍吴保成郭英宁岳军明王玫殷震
- 关键词:酶切分析分子克隆
- 犬Ⅰ型腺病毒DNA的酶切分析及分子克隆被引量:2
- 1992年
- 犬Ⅰ型腺病毒(CAV-1)弱毒用限制性内切酶EcoR Ⅰ,BamH Ⅰ,Pst Ⅰ,Sph Ⅰ和Hind Ⅲ消化分析后其图谱与强毒株相比没有差异。将弱毒DNA用Pst Ⅰ完全消化后以鸟枪法克隆到载体质粒pBluescrip'SK中,经用光生物素标记的CAV-1 DNA杂交筛选以及Pst Ⅰ分析重组质粒证明已将分子量为5.5,3.5,2.85,1.2,0.32和0.28Kb的CAV-1DNA片段克隆到质粒中。克隆到的这些片段将可考虑进一步研究作为探针检测犬及狐狸等野生动物的腺病毒感染。
- 白丽萍童光志赵永军吴保成岳军明王玫殷震
- 关键词:克隆
- 貂肠炎病毒的核苷酸序列和基因组结构被引量:2
- 1993年
- 本试验测定了已克隆的貂肠炎病毒(MEV)复制型(RF)DNA的核苷酸序列,确定MEV基因组全长约为5064个核苷酸(nucleotides,nt),推测了3'端和5'端结构,在5'端非编码区有3个51 nt的重复。MEV基因组序列与犬细小病毒(CPV)、猫细小病毒(FPV)有很高的同源性,结构基因区的同源性分别达99.1%和99.9%,但在5'端非编码区有较大差异。MEV基因组结构与CPV和FPV基本一致,有两个大的开放阅读框架,分别编码688和722个氨基酸。在map unit(m.u.)3.7和m.u.39处有两个启动子,在m.u.97处有poly A位点。NS2、VP1和VP2的mRNA都发生剪接。
- 赵新泰殷震赵永军李载平吴祥甫
- 关键词:核苷酸序列肠炎病毒基因组
- 应用生物素标记的重组质粒作为探针的杂交条件及敏感性研究被引量:3
- 1990年
- 貂肠炎细小病毒复制中间型 DNA(MEV-RF-DNA)的 HindⅢ-C 片段被克隆到 pBR322中形成重组质粒pBM。用光生物素(photo biotin)标记 pBM 和 HindⅣ酶切片段的 pBM 作为探针分别与貂,太细小病毒感染的细胞培养物人工感染细小病毒的貂和犬粪便进行斑点杂交试验,结果发现两种探针检测的敏感性相差10倍以上.光生物素标记的完整重组质粒探针具有放大作用,酶切后的 pBM 敏感性不如前者.另外,本实验还证明在用生物素标记的探针杂交时,被检样品用热变性处理比碱变性处理效果更佳,而且简便。
- 童光志白丽萍宁希德赵永军赵奕殷震
- 关键词:生物素标记探针敏感性