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岳军明: 作品数：31 被引量：126H指数：7; 供职机构：解放军农牧大学更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>; 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>

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牛αsl乳酪蛋白基因上游调控序列的克隆及序列分析被引量：1: 1995年; 应用ＰＣＲ技术从国内小牛胸腺基因组ＤＮＡ中克隆了１．０ｋｂ牛αｓｌ酪蛋白基因的上游调控序列，并进行了序列分析，发现有少量的缺失或突变，其ＴＡＴＡ框和ＣＡＡＴ框均未发生变异，表明已成功克隆了其启动子序列，这为乳腺定位表达的研究奠定了基础。; 岳军明张宏权王允玲任宏波周廷冲王会信殷震; 关键词：酪蛋白基因克隆乳腺

通用真核表达载体的构建及其活性检测: 2000年; 以质粒 pc DNA3和 p SV2 -dhfr为基础 ,构建了 2个通用表达载体 p MCD-A和 p MCD-B,然后将 EPOminigene克隆于它们的多克隆位点之中 ,得到表达载体 p AE和 p BE,经脂质体导入 CHO-dhfr- 细胞瞬时表达 ,结果表明 ,p MCD-A和 p MCD-B表达效果较好 ,表达产物经网织红细胞法测定。; 梅柱中岳军明张茂林乔桂林殷震; 关键词：真核表达人促红细胞生成素生物活性

小鼠输精管内转染法建立人组织型纤溶酶原激活剂(tPA)乳腺定位表达生物反应器的研究被引量：11: 1999年; 外源基因受精卵内显微注射目前仍然是种常用的建立转基因动物的方法,但此方法操作复杂,成本高。因此利用精子作为载体将外源基因带入卵细胞内建立转基因动物成了极具吸引力的方法,并且已有一些成功的报道。虽然该方法简单,但总体来说可重复性较差。我们在建立乳腺定位表达人组织型纤溶酶原激活剂(tPA)小鼠模型中,对此方法做了改进,即将脂质体包裹的外源基因在小鼠输精管及附睾管内转染精子,而非以往的在体外转染,结果:(1)五只转染小鼠,术后10天内共使10只正常母鼠受精;(2)共繁殖出79只首建者小鼠,存活42只;(3)用PCR检测首建者小鼠外源基因的整合,阳性率为7/42(16.67%);(4)用凝胶平板溶圈试验检测5只PCR阳性的雌性首建者小鼠泌乳期乳汁中的活性tPA,3/5表达,表达量在12—20IU/ml之间(约相当于48—80ng/ml);(5)PCR检测4只子一代小鼠外源基因的遗传情况,阳性率为2/4。; 黄伟民赖良学乔桂林岳军明安靓王凯付殿国殷震李进; 关键词：TPA 乳腺转基因

未知基因p2.18: 1998年; 用根据GRF设计的引物,以猪的下丘脑总RNA和mRNA为模板、进行RT—PCR扩增.将扩增产物纯化并克隆到T载体(pGEM3—Zf),自动测序仪测定其序列.发现所克隆的基因并非GRF基因.应用BLAST软件对其在INTERNET作了分析,未能确定为何种基因.; 张永亮欧阳红生冯立文岳军明刘松财张玉静; 关键词：GRF PCR 基因扩增 T载体

组织型纤溶酶原激活剂cDNA在BHK21细胞中的表达被引量：1: 1999年; 将组织型纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ）基因ｃＤＮＡ经多次亚克隆插入到真核表达载体ｐＳＶＬ的ＳＶ４０启动子和ｐｃＤＮＡ３的ＣＭＶ启动子下游，构建了重组表达质粒ｐＳＶＬ－ｔＰＡ和ｐｃＤＮＡ３－ｔＰＡ。分别将这２种表达质粒以脂质体载体法转染ＢＨＫ２１细胞，ＥＬＩＳＡ检测结果表明，ｐＳＶＬ－ｔＰＡ和ｐｃＤＮＡ３－ｔＰＡ在哺乳动物细胞中能够表达，７２ｈ表达量分别是５２．８μｇ／Ｌ和７０．４μｇ／Ｌ。; 李银聚赖良学扈荣良岳军明徐秀英金宁一殷震; 关键词：CDNA 基因表达 T-PA

犬Ⅱ型腺病毒弱毒DNA的酶切分析及分子克隆被引量：1: 1992年; 犬Ⅱ型腺病毒(CAV-2)是犬喉气管炎的病原。CAV-2感染通常只引起轻微的呼吸道疾病,但在其它病毒或细菌继发感染下可诱发较严重的肺炎、支气管炎、扁桃体炎和咽炎。此病毒与引起传染性犬肝炎(ICH)的CAV-1有密切的抗原相关性。CAV-2弱毒株可产生抗CAV-1的保护性免疫,是目前用于预防ICH和狐狸脑炎的有效疫苗。由于CAV-2本身致病不严重,致弱的CAV-2更为安全。因此,用弱毒株构建成基因工程载体,把犬细小病毒或犬及狐狸的其它病毒的主要抗原基因重组到其中的非必需区,可获得安全、有效和多用的病毒载体疫苗。为此,我们首先分析了CAV-2弱毒DNA的酶切图谱,并克隆了全病毒DNA的76.5％。; 童光志赵永军白丽萍吴保成郭英宁岳军明王玫殷震; 关键词：酶切分析分子克隆

精原干细胞体内转染途径建立转基因小鼠的可行性研究被引量：9: 1997年; 目前,生产转基因动物的难度很大,成功率很低,这是因为制备转基因动物的主要方法是向受精卵原核中注射DNA。这种方法有其弱点,首先作为外源基因受体细胞的受精卵数量有限;其次外源基因的整合和表达的筛选工作不能在细胞水平上进行,只能在子代动物出生后,即在个体水平上进行选择,这就增加了工作量,而且周期长,成功率低,成本大,在大动物上实施起来尤其困难。这就要求我们找到一种更为有效而又简捷的转基因动物的制备方法。; 赖良学张学明安靓岳军明扈荣良殷震; 关键词：精原干细胞转基因动物体内转染外源基因小鼠曲细精管

人组织型纤溶酶原激活剂c-DNA乳腺定位表达载体的构建及其在兔乳腺中的表达被引量：2: 1997年; 人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)是一种用于治疗血栓性心血管疾病的特效药物,它能激活血纤维蛋白酶原,后者使血块溶解,所以这种药物的开发为社会普遍重视。t-PA在人体血液中的含量极低,很难从天然材料中提取。如果应用转基因技术,将人t-PA基因转入动物体内,使其在乳腺中高效表达,从乳汁中提取大量的t-PA,将具有可观的经济效益和社会效益。转基因动物建立的前提条件是构建乳腺定位高效表达载体。为此,我们先将本所保存的t-; 赖良学王凯付殿国黄伟民岳军明李银聚扈荣良殷震; 关键词：人组织型纤溶转基因动物

肌注组织型纤溶酶原激活剂基因在小鼠体内表达: 1997年; 组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)是人体内重要的丝氨酸蛋白酶,它能特异地激活血栓中的纤溶酶原,使之成为具有溶解纤维蛋白能力的纤溶酶,临床上将提纯的t-PA作为心血管栓塞性疾病急救和康复治疗的首选药物。由于t-PA在天然材料中含量甚微,难以大量制备,基因工程产品产量有限,临床应用货源紧缺且价格昂贵。; 李银聚扈荣良赖良学岳军明殷震; 关键词：组织型基因治疗小鼠纤溶酶原丝氨酸蛋白酶

生长激素释放因子(GRF)的基因改造及化学合成被引量：11: 1998年; 为了提高生长激素释放因子（ＧＲＦ）的体内活性，根据猪ＧＲＦ的天然序列，设计了改造后ＧＲＦ（１～３２）的基因序列（含信号肽），两端加设ＥｃｏＲＩ、ＨｉｎｄⅢ的粘性末端，分４段由ＤＮＡ合成仪合成，每段长度分别为９５、９７、８６、１０６ＮＴ，２条链间有１５个碱基的粘端。用尿素变性ＰＡＧＥ纯化合成片段，用Ｔ４多核苷酸激酶对合成ＤＮＡ磷酸化，混合４个片段复性，然后用Ｔ４连接酶连接。提取ｐＢｌｕｓｃｒｉｐｔ质粒，用ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ在Ｍｕｌｔｉｃｏｒｅｂｕｆｅｒ中酶切完全后，琼脂糖电泳，由ＧｅｎｅＥｌｕｔｅＡｇｒｏｓｅＳｐｉｎＣｏｌｕｍｓ回收酶切大片段。将该酶切片段与上述合成的ＧＲＦ基因由Ｔ４连接酶连接，并转化至氯化钙致敏的ＤＨ５α。选取重组菌落，提取质粒，用ＰＣＲ及双酶切鉴定阳性克隆。用Ｍｉｎｉｐｒｅｐ提取重组质粒，ＡＢＩ３７３自动测序仪测序。测序结果表明已克隆到合成的ＧＲＦ基因。; 冯立文张永亮张玉静欧阳红生刘松财岳军明申建新刘万臣; 关键词：生长激素 GRF 基因改造化学合成

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