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陈美玲: 作品数：14 被引量：55H指数：4; 供职机构：华中农业大学动物科学技术学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金农业部农业结构调整重大技术研究专项项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

合作作者

胸膜肺炎放线杆菌基因分型方法的建立及其临床应用被引量：9: 2004年; 根据胸膜肺炎放线杆菌各血清型之间外毒素 (Apx) ,外膜脂蛋白 (OmlA) ,转铁蛋白B(TbpB)的基因差异 ,分别对各血清型进行PCR扩增 ,得到不同的特异性片段 ,可区分开生物Ⅰ型 13个标准菌株血清型中的 8个血清型。临床检测结果与血清学分型一致 ,将此分型系统用于临床送检的 12 6份肺脏和 4 2份扁桃体的病原学检测 ,可直接检测出胸膜肺炎放线杆菌感染。此方法还可以将一些尚未定型的菌株进行归类 ,弥补了血清学方法的不足 ,为细菌的流行病学调查提供了可靠的技术手段。; 陈凡陈美玲陈焕春何启盖PatBlackall; 关键词：胸膜肺炎放线杆菌 PCR 基因分型病原学检测

抗猪圆环病毒Ⅱ型ORF2蛋白单克隆抗体的制备鉴定及Ⅰ型ORF2功能基因的研究: 猪圆环病毒存在PCV1和PCV2两种基因型,该病毒属于圆环病毒科,其病毒粒子是无囊膜的环状单链DNA。其中PCV2被认为是引起仔猪多系统衰竭综合征的主要病原体,该病可导致新生仔猪高热、生长发育不良、体表苍白以及呼吸障碍等...; 陈美玲; 关键词：猪圆环病毒 ORF2基因单克隆抗体; 文献传递

猪圆环病毒1型ORF2基因的克隆与序列分析被引量：1: 2005年; 参照Genbank上公开发表的PCV1 全基因序列设计引物,以质粒pSK PCV为模板扩增出PCV1 ORF2基因,插入pMD18 T载体,对筛选出的阳性质粒进行测序,将测序结果同Genbank上发表的PCV1 基因序列相比较,同源性达97%,再与Genbank 上发表的PCV2 的ORF2 基因序列相比较发现PCV1 ORF2 和PCV2 ORF2的差异表现在两者在核苷酸序列的2个部位互相存在基因缺失现象。将推导出的PCV1 ORF2 的氨基酸序列同PCV2 ORF2进行比较,发现二者在几个功能区相当保守,尤其是N 末端的核定位序列、N 糖基化位点以及酪氨酸磷酸化位点。; 陈美玲陈焕春宋云峰黄红亮; 关键词：猪圆环病毒1型 ORF2基因克隆

胸膜肺炎放线杆菌毒素apxIVA基因的克隆与表达及间接ELISA方法的建立被引量：18: 2005年; 参照APP血清 1型apxIVA基因序列合成了一对特异性引物 ,从本实验室分离鉴定的胸膜肺炎放线杆菌 (APP)血清 2型中扩增了apxIVA基因 5′端 2 4 4 5bp的片段。将该片段克隆到原核表达载体pET_2 8b的T7启动子下游 ,与 6×HisTag融合 ,再转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,在IPTG的诱导下表达大小约 90kD的蛋白。表达产物以包涵体的形式存在 ,且能与APP标准阳性血清发生特异性反应。将包涵体变性和复性后包被酶标板建立了间接ELISA方法 (ApxIVA_ELISA) ,特异性良好。用ApxIVA_ELISA检测猪胸膜肺炎三价 (1、2和 7型 )灭活菌苗和基因工程类毒素菌苗免疫猪血清抗体均为阴性 ,而 1、2、7型APP活菌感染动物的血清抗体均为阳性。实验证明 ,ApxIVA_ELISA不仅可以用于检测所有血清型APP的抗体 ,而且还可以用于APP自然感染猪和灭活菌苗免疫猪的鉴别诊断。; 黄红亮周锐陈美玲刘建杰徐晓娟陈焕春; 关键词：胸膜肺炎放线杆菌 APXIV ELISA

鸡neurexophilin 1基因在毕赤酵母中的表达被引量：1: 2015年; Neurexophilin 1是母鸡子宫阴道结合部位的差异表达基因。根据鸡nxph1的序列,结合毕赤酵母密码子的偏好性,合成nxph1基因,设计引物以合成基因为模板,扩增其去除信号肽的DNA序列△nxph1,将合成的nxph1基因及去除信号肽的nxph1基因片段△nxph1分别插入pPICZαA真核表达载体,构建重组表达质粒pPICZαA/nxph1和去除信号肽的重组表达质粒pPICZαA/△nxph1,电转入毕赤酵母GS115,阳性菌用终浓度为1%的甲醇诱导表达,SDS-PAGE电泳和Western blot检测表达产物,结果表明重组菌成功分泌鸡NXPH1蛋白和去除信号的△NXPH1蛋白,大小约29 kD,为探索NXPH1在母鸡生殖道内的功能奠定基础。; 陈美玲聂彬姜勋平刘桂琼; 关键词：毕赤酵母基因表达

抗猪圆环病毒Ⅱ型ORF2蛋白单克隆抗体的制备鉴定及Ⅰ型ORF2基因的研究: 猪圆环病毒存在PCV1和PCV2两种基因型，该病毒属于圆环病毒科，其病毒粒子是无囊膜的环状单链DNA。其中PCV2被认为是引起仔猪多系统衰竭综合征的主要病原体，该病可导致新生仔猪高热、生长发育不良、体表苍白以及呼吸障碍等...; 陈美玲; 关键词：圆环病毒 ORF2基因单克隆抗体; 文献传递

抗猪圆环病毒Ⅲ型ORF2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：18: 2005年; 利用本室构建的质粒PGEX-ORF 2转化BL 21(DE3),经IPTG诱导表达,得到PCV 2-ORF 2的重组蛋白,经复性纯化后作为免疫原,采取常规免疫与体外脾脏免疫结合的方式免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0的骨髓瘤细胞融合,经间接酶联免疫吸附试验(EL ISA)筛选,获得了2株抗PCV 2-ORF 2蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3B 2F 4和9C 3D 2,其细胞培养上清效价分别为1∶1 024、1∶512,小鼠腹水效价分别为1∶204 800、1∶102 400。EL ISA结果显示,3B 2F 4和9C 3D 2仅与融合表达的PCV 2-ORF 2蛋白反应,而与PGEX-KG表达的蛋白、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)不反应,说明此2株单抗特异性好。间接免疫荧光结果显示,3B 2F 4和9C 3D 2能与PCV 2发生反应,而不与PCV 1发生交叉反应,表明所获得的2株单抗是PCV 2型特异性的。这2株单抗的获得为进一步研究PCV 2-ORF 2基因的功能,及建立准确快速的鉴别PCV 1和PCV 2的诊断方法提供了强有力的手段。; 陈美玲陈焕春黄红亮琚春梅宋云峰; 关键词：单克隆抗体

胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅳ基因3'-端的克隆、原核表达及单克隆抗体的制备: 本研究参照胸膜肺炎放线杆菌血清1型apxⅣA基因序列合成两条特异性引物,从本实验室分离鉴定的菌株中扩增到apxⅣA3,大小2993bp,克隆到pMD-18T中构建克隆载体pTapxⅣA3,鉴定后,将apxⅣA3插入原核表...; 黄红亮陈焕春陈美玲贝为成严琳; 关键词：胸膜肺炎放线杆菌单克隆抗体; 文献传递

猪圆环病毒I型ORF2蛋白序列与其核定位功能的相关性被引量：3: 2005年; 软件分析PCV1-ORF2的核苷酸序列发现其N端的氨基酸序列中包含一段核定位序列,将具有核定位序列特征的区域删除,构建缺失核定位序列的PCV1-ORF2基因与绿色荧光蛋白的真核融合表达载体,同时构建PCV1-ORF2全基因与绿色荧光蛋白的真核融合表达载体,分别转染Hela细胞,可观察到后者绿色荧光聚集在细胞核区域;而前者转染Hela细胞结果显示核定位现象消失,从而可以推断这一区域是CPV1-ORF2蛋白核定位的功能区。; 陈美玲陈焕春宋云峰黄红亮; 关键词：HELA细胞