张雅洁
- 作品数：2 被引量：18H指数：2
- 供职机构：中国人民解放军第二〇五医院更多>>
- 发文基金：吉林省自然科学基金国家科技重大专项武汉市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肠出血性大肠埃希菌O157免疫磁珠的制备被引量：4
- 2017年
- 目的制备可高效、特异性富集肠出血性E.coli O157(enterohemorrhagic Escherichia coli O157,EHEC O157)的免疫磁珠。方法分别用5种不同规格磁珠与E.coli O157特异性单克隆抗体偶联制备免疫磁珠,通过比较磁珠蛋白偶联量,选取包被效果最佳的磁珠规格;对制备工艺进行优化(包括活化时间、温度,偶联缓冲液p H值,偶联温度、时间);对制备的O157免疫磁珠选择性集菌的敏感性和特异性进行评价,并与进口磁珠吸附率进行比较。结果直径0.5~1.0μm羧基磁珠抗体包被效果及目的菌分离效果最好。加入NHS后,活化30 min为最佳时间;4℃磁珠活化温度、0.01 mol/L PBS(p H 7.4)构成的体系对磁珠偶联单克隆抗体效果最佳;偶联温度为37℃、偶联时间为120 min时,偶联蛋白量最高,且波动范围较小,为最佳偶联温度及时间。在复杂的微生物环境中,O157免疫磁珠的敏感性达到20 CFU/ml。在混合菌液中,E.coli O157菌含量在1.4×10~3 CFU/ml时,免疫磁珠特异性捕获率达到90%。结论获得羧基磁珠与E.coli O157单克隆抗体偶联的最佳条件。制备的免疫磁珠能够特异性富集EHEC O157,具有操作简便,分离速度快,捕获率高等特点,可用于临床样品或食品中EHEC O157的分离鉴定。
- 梁冰张雅洁纪雪祝令伟郭学军刘彦晶刘军周伟李丽红冯书章孙洋
- 关键词：单克隆抗体免疫磁珠
- 中药黄芩对NDM-1乙酸钙不动杆菌的抑菌及质粒消除的研究被引量：14
- 2017年
- 目的探讨中药黄芩不同提取部位对NDM-1乙酸钙不动杆菌的抑菌效果及质粒消除作用。方法测定黄芩醇提剂和水煎剂对NDM-1乙酸钙不动杆菌的最小抑菌浓度(MIC);观察亚抑菌浓度下对NDM-1乙酸钙不动杆菌生长曲线的变化;利用亚抑菌浓度黄芩醇提剂和水煎剂对乙酸钙不动杆菌NDM-1质粒进行消除,用平板影印法筛选质粒消除株,并比较质粒的消除率及表型变化。结果黄芩醇提剂对NDM-1乙酸钙不动杆菌的MIC值为1.56 mg·m L^(-1),水煎剂MIC值为6.25 mg·m L^(-1)。生长曲线实验结果表明,醇提剂对细菌的繁殖抑制作用更强。黄芩醇提剂和水煎剂均有不同程度的质粒消除作用,以醇提剂传代消除作用更为明显,消除率最高可达61.27%,水煎剂亦能达到49.78%。结论黄芩能够抑制NDM-1乙酸钙不动杆菌的生长并有效消除其耐药质粒,且醇提组分作用效果更佳,可用于控制超耐药不动杆菌的传播或临床感染的辅助治疗。
- 刘彦晶张雅洁纪雪李丽红孙洋
- 关键词：黄芩不动杆菌抑菌作用质粒消除
