张娜娜
- 作品数：8 被引量：46H指数：4
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：江苏省教育厅自然科学基金安徽省教育厅重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 小菜蛾成虫蛋白质组双向电泳图谱的建立及条件优化被引量：4
- 2011年
- 通过选择合适的pH范围及长度的胶条,并对蛋白样品上样量、等电聚焦伏小时数、银染时间及样品前处理等进行优化,建立了以双向电泳技术为基础的小菜蛾成虫蛋白质组学研究方法.优化结果表明使用17 cm、pH3~pH10的非线性胶条可以得到分辨率较高的胶图.该方法的建立为小菜蛾抗药性差异蛋白质组学研究奠定了基础.
- 张娜娜许勤李风良程罗根
- 关键词：小菜蛾双向电泳蛋白质组学
- 溴氰菊酯抗感品系小菜蛾成虫差异表达蛋白的鉴定被引量：2
- 2010年
- 通过对小菜蛾Plutella xylostella(L.)抗溴氰菊酯品系和敏感品系成虫双向电泳图谱的比较,找到8个差异明显的点,并结合质谱分析技术和数据库信息检索最终鉴定出7个蛋白.其中包括2个代谢相关蛋白,2个调控蛋白,1个结构分子蛋白,其余2个蛋白质功能皆不明确.这些在抗性或敏感品系中差异表达蛋白质的发现,为进一步研究小菜蛾抗药性形成机制和抗性相关蛋白的寻找奠定了基础.
- 程滨张娜娜许勤杨小怡程罗根李忠英
- 关键词：小菜蛾双向电泳质谱分析溴氰菊酯
- 镉对HEK 293细胞线粒体损伤作用被引量：6
- 2008年
- 目的探讨线粒体在镉诱导人胚胎肾细胞(HEK293)凋亡中的作用。方法分离HEK293细胞的线粒体,采用分光光度法检测线粒体膜通透性转运孔(MPTP)的开放程度;电镜观察线粒体的形态改变;荧光分光光度法测定线粒体膜电位(MMP)和活性氧(ROS)含量的变化;ATP酶、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)含量的测定。结果随着CdCl2浓度的增加,MPTP开放程度增加,并且这种增加能被MPTP特异性的抑制剂环孢素A(CsA)所抑制。电镜观察发现线粒体染镉后肿胀变形;中、高浓度CdCl2处理组线粒体膜电位都显著下降(P<0.05),ROS含量也显著增加(P<0.05和P<0.01)。在高浓度组,Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性下降,MDA含量随CdCl2处理浓度增高而增加,LDH、SOD、GSH-Px活性随CdCl2处理浓度增高而下降,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论CdCl2破坏线粒体结构,引起MPTP的开放,MMP的降低,ROS含量增加,引起多种与凋亡相关的应激性损伤的发生。
- 毛伟平张娜娜魏传静周雷冯娟刘洪云
- 关键词：氯化镉线粒体膜电位活性氧
- 镉致HEK293细胞离体线粒体损伤的研究
- 镉可以诱导HEK 293细胞发生凋亡并且其凋亡依赖于线粒体途径。研究镉诱导的线粒体损伤对于镉的分子毒理学机制的阐明和镉所致的损伤与致癌机理的研究具有重要意义。本文对镉诱导的HEK 293细胞离体线粒体损伤做了如下研究工作...
- 张娜娜
- 关键词：镉线粒体线粒体膜电位活性氧抗氧化酶
- 文献传递
- 镉诱导HEK293细胞凋亡及其线粒体凋亡途径被引量：15
- 2007年
- 本课题研究了氯化镉(CdCl_2)诱导HEK293细胞(人胚胎肾细胞系)的凋亡,初步探讨了凋亡过程中Caspase-3、Bcl-2的变化和凋亡诱导因子(AIF)的转移以及它们的意义。MTT法检测CdCl_2对HEK293细胞增殖的抑制作用;通过倒置显微镜、电镜、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、激光共聚焦观察细胞凋亡;应用Western blot法和荧光免疫法测定Caspase-3酶原、Bcl-2蛋白的变化以及检测AIF蛋白在细胞中的定位。结果显示:CdCl_2对HEK293细胞具有显著的生长抑制作用,并呈明显的剂量和时间依赖性。在琼脂糖凝胶电泳中,显示有凋亡细胞特有的DNA梯状条带,其中30μmol/L作用6-9h梯状条带最为清晰,时间过长或浓度过高则梯状条带逐渐模糊,表明镉浓度过高或处理时间过长,细胞有坏死。流式细胞仪检测也印证了这一结果。形态学观察可见明显的细胞凋亡特征。同时线粒体膜电位明显下降,发现Caspase-3酶原蛋白、Bcl-2蛋白含量减少,并具有时间依赖性;另外检测到线粒体AIF向细胞核转移。而Bcl-2转染后有一定的抑制凋亡作用。实验结果提示,CdCl_2能够诱导HEK293细胞凋亡,线粒体损伤导致AIF转移与细胞色素c释放,从而引发的非Caspases与Caspases凋亡途径可能在镉引发的细胞凋亡过程中起重要作用,而Caspase-3, Bcl-2起着重要的调控作用。
- 叶记林毛伟平吴爱莲赵洁明张超张娜娜姜平田婷
- 关键词：镉细胞凋亡线粒体
- 小菜蛾溴氰菊酯敏感和抗性品系蛋白质表达谱的比较分析(英文)被引量：1
- 2013年
- 杀虫剂抗性是害虫防治中的一个主要挑战。为有效治理抗性,我们必须了解杀虫剂诱导的害虫生理生化变化。目前害虫抗药性的一些机理已经清楚,但更多的相关机制还有待探究。本研究通过蛋白质组学方法检测了小菜蛾Plutella xylostella溴氰菊酯敏感和抗性品系间蛋白质组的表达差异。结果显示:SDS-PAGE胶上有大约300个蛋白差异点,其中23个蛋白点具2.5倍以上的表达差异,通过MALDI-TOF-MS,我们成功鉴定出8个蛋白,其中包括化感蛋白CSP2、铜锌超氧化物歧化酶和peroxiredoxin样蛋白。通过实时定量PCR(real-time quantitativePCR,qPCR)分析了其中5个蛋白的mRNA表达水平,结果表明mRNA表达水平不能真实反映蛋白的表达水平。免疫印迹验证了双向电泳中SOD1的表达差异。本研究有力地证明溴氰菊酯诱导小菜蛾成虫蛋白质组表达变化,这为进一步筛选抗性靶标提供很大的帮助。
- 张娜娜张宏程晨李凤良高少奇程罗根
- 关键词：小菜蛾溴氰菊酯蛋白质组
- 镉致HEK293细胞凋亡中氧化应激作用被引量：18
- 2007年
- 目的探讨镉在诱导人胚胎肾细胞(HEK293)凋亡中氧化应激的作用。方法采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;采用流式细胞仪和激光共聚焦检测胞浆内的活性氧(ROS)水平,采用分光光度法检测细胞内丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量,蛋白印迹法检测Bcl-2蛋白、Caspase-3酶原表达量的变化。结果在一定浓度范围内随着镉浓度的升高,凋亡率升高。在60μmol/L氯化镉诱导细胞6h,凋亡率达到最高;细胞内ROS生成显著增多;MND含量明显增多(P<0.01),GSH含量大幅下降(P<0.01);Bcl-2表达量较镉处理3h时表达量有所下降;Cas-pase-3酶原蛋白表达下降。结论镉诱导HEK293细胞凋亡的机制与ROS上升及其导致的氧化损伤、Bcl-2蛋白表达下调和Caspase-3的激活有关。
- 田婷毛伟平张超叶记林张娜娜周雷魏传静
- 关键词：镉凋亡氧化应激
- 镉对人肝细胞WRL-68离体线粒体结构及功能的影响被引量：1
- 2008年
- 目的 研究氯化镉（CdCl2）对离体肝细胞线粒体结构及功能的影响。方法从培养肝细胞（WRL-68）中提取线粒体，各组分别用0、1、5、10μmol／LCdCl2进行处理。采用分光光度法检测线粒体膜通透性转运孔（MPTP）的开放程度；电镜下观察线粒体的形态改变；罗丹明123检测线粒体膜电位（MMP）的变化；测定线粒体内ATP酶LDH、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性以及丙二醛（MDA）的含量。结果随着CdCl2浓度的增加MPTP开放程度增加，并且MPTP的开放可被环孢霉素A（CsA）所抑制；电镜观察发现，线粒体经CdCl2处理后出现不同程度的肿胀变形；CdCl2诱导MMP显著降低；同时引起SOD、GSH-Px、Na^＋．K^＋-ATP酶、Ca^＋-Mg^＋-ATP酶LDH活性趋于下降，5、10μmol／L CdCl2显著下调了各种酶的活性（P〈0．05）；CdCl2处理组MDA含量升高，10μmol／LCdCl2处理组与对照组比较有统计学意义（P〈0．05）。结论CdCl2能引起离体肝细胞线粒体结构的破坏，并致MPTP开放、MMP下降、线粒体酶活性的改变等与细胞凋亡相关过程的发生。
- 张娜娜毛伟平魏传静周雷刘洪云冯娟
- 关键词：镉线粒体膜电位腺苷三磷酸酶抗氧化酶
