毛伟平
- 作品数：32 被引量：130H指数：6
- 供职机构：南京师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：江苏省教育厅自然科学基金江苏省重点实验室开放基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 镉对人肝细胞WRL-68离体线粒体结构及功能的影响被引量：1
- 2008年
- 目的 研究氯化镉（CdCl2）对离体肝细胞线粒体结构及功能的影响。方法从培养肝细胞（WRL-68）中提取线粒体，各组分别用0、1、5、10μmol／LCdCl2进行处理。采用分光光度法检测线粒体膜通透性转运孔（MPTP）的开放程度；电镜下观察线粒体的形态改变；罗丹明123检测线粒体膜电位（MMP）的变化；测定线粒体内ATP酶LDH、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性以及丙二醛（MDA）的含量。结果随着CdCl2浓度的增加MPTP开放程度增加，并且MPTP的开放可被环孢霉素A（CsA）所抑制；电镜观察发现，线粒体经CdCl2处理后出现不同程度的肿胀变形；CdCl2诱导MMP显著降低；同时引起SOD、GSH-Px、Na^＋．K^＋-ATP酶、Ca^＋-Mg^＋-ATP酶LDH活性趋于下降，5、10μmol／L CdCl2显著下调了各种酶的活性（P〈0．05）；CdCl2处理组MDA含量升高，10μmol／LCdCl2处理组与对照组比较有统计学意义（P〈0．05）。结论CdCl2能引起离体肝细胞线粒体结构的破坏，并致MPTP开放、MMP下降、线粒体酶活性的改变等与细胞凋亡相关过程的发生。
- 张娜娜毛伟平魏传静周雷刘洪云冯娟
- 关键词：镉线粒体膜电位腺苷三磷酸酶抗氧化酶
- 抗ICOSL核糖体展示单链抗体库的构建被引量：4
- 2013年
- [目的]构建出鼠源抗ICOSL核糖体展示抗体库。[方法]通过RT-PCR从人B淋巴瘤细胞Daudi的总RNA中扩增出ICOSL胞外区基因,并将此基因插入到原核表达载体pET28a中进行表达。以表达纯化的ICOSL蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾脏提取总RNA,通过RT-PCR扩增小鼠的重链可变区和Linker(VH-linker)序列,以及轻链可变区和Linker(Vκ-linker)序列。经重组PCR将两段基因连接起来,将VH/κ与pMD19-T载体链接产物转化E.coli DH 5α,PCR鉴定并测序。[结果]VH和κ链得到正确的扩增,长度分别为421和689 bp,VH/κ连接产物正确,连接产物长度为1 079 bp。[结论]所采用的引物及反应条件能够扩增出目的基因,成功构建了鼠源抗ICOSL核糖体展示抗体库,为进行核糖体展示体外筛选抗ICOSL特异性单链抗体奠定基础。
- 严浩王芳毛伟平王文倩孟素芳邵峦峦刘小綪
- 关键词：单链抗体核糖体展示技术原核表达
- 重组人ICOS胞外区原核表达载体的构建及表达
- 2011年
- 构建重组人ICOS胞外区原核表达载体,并进行初步表达。根据GenBank基因库中ICOS胞外区基因序列设计引物,用RT-PCR法从人T淋巴瘤细胞Jurkat的总mRNA中扩增出ICOS胞外区基因并运用重叠延伸PCR技术扩增出ICOS胞外区同源二聚体,并将ICOS胞外区同源二聚体插入到原核表达载体PET-28a中,并对重组质粒进行鉴定。转化E.coliBL21,IPTG诱导表达目的蛋白。结果获得ICOS胞外区同源二聚体基因大小为757 bp,构建的重组表达载体中目的基因序列完全正确。IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析表明目的蛋白在E.coliBL21(DE3)中高效表达,相对分子质量约为31 ku。这说明成功地构建人重组ICOS胞外区同源二聚体的原核表达载体,并实现在大肠杆菌中大量表达。为下一步蛋白纯化及制备抗ICOS单克隆抗体奠定了基础。
- 李文秀周凤云毛伟平潘杨滨何志娟徐翀刘宣宣
- 关键词：ICOSJURKAT细胞重叠延伸PCR原核表达
- B淋巴细胞刺激因子的药学前景被引量：3
- 2005年
- B淋巴细胞刺激因子(BlyS)是肿瘤坏死因子(TNF)超家族的一名新成员,它与某些免疫疾病的致病机制密切相关。从BlyS的生物学结构和功能入手,阐述与其相关的免疫缺陷病、自身免疫疾病和淋巴瘤等免疫疾病,以及BlyS治疗性蛋白、BlyS蛋白拮抗物、放射性BlyS蛋白的临床应用前景。
- 石晓娟毛伟平
- 关键词：B淋巴细胞刺激因子免疫缺陷自身免疫疾病淋巴瘤
- 唾液腺提取物的生物活性及对烫伤疗效的研究
- 2006年
- 目的探讨唾液腺提取物(ESG)对离体成纤维细胞生长的影响及对烫伤豚鼠皮肤愈合的疗效。方法原代培养SD大鼠胚胎成纤维细胞,MTT法测定ESG不同浓度同一作用时间、和一定浓度不同作用时间对离体成纤维细胞生长活力的影响;建立深Ⅱ度烫伤动物模型,分成对照组、1%CTS组、1%和2%ESG组,烫伤后4h开始涂药,每天观察及测量创伤皮肤愈合情况。结果合适浓度的ESG对离体成纤维细胞有较强的促生长作用;1%CTS组与对照组之间差异无显著性(P>0.05),1%和2%ESG组与对照组之间差异均有显著性(P<0.05),而1%ESG组与2%ESG之间差异无显著性(P>0.05)。结论ESG对离体成纤维细胞的生长有促进作用,并对烫伤皮肤愈合有较好的疗效,有一定的药用价值。
- 姜平毛伟平唐梓进程光宇吴京燕刘瑾杨佐宪
- 关键词：细胞培养烫伤
- 水栖爬行类呼吸与心脏活动的生理学研究
- 我们对水栖爬行类的呼吸与心脏活动的比较生理进行了研究.主要成果有:1)提出了鳖水呼吸口咽为主要途径,皮肤其次的新结论;2)首次报道鳖口咽水呼吸运动影响因素和生理可调性,及缺氧是主要调节因素;3)正确描述鳖咽壁绒毛适于气体...
- 王昭贤毛伟平孙宁珍
- 关键词：心脏活动生理学
- 文献传递
- 中华鳖睾丸、附睾结构和血浆睾酮水平的季节性变化被引量：7
- 1997年
- 为探讨中华鳖睾丸活动的年周期变化，对其睾丸和附睾进行了组织学检查，并对其血浆睾酮进行放射免疫（ＲＩＡ）测定．睾丸重量在５月至８月逐渐增加，而后逐渐下降．睾丸生精活动开始于４月末至５月初，并且持续活跃到８月，精原细胞分裂在９月开始减慢，直至１１月末停止．附睾重量在８月至１１月间渐渐上升，在冬眠期保持高重量．到第二年交配期，附睾重量迅速下降，下降幅度达５３．７６％．７月到９月附睾管上皮细胞进入快速生长期，表现为细胞高度增长．同时，在细胞质中有大量的分泌颗粒．血浆睾酮浓度从４月开始上升，但在５、６月间有所下降，到７月其浓度迅速上升到最高水平，而后下降到最低．结果表明：中华鳖外周睾酮对其生殖行为有促动作用。
- 毛伟平王昭贤
- 关键词：睾丸睾丸酮附睾中华鳖
- Endo G基因过表达对镉诱导HEK-293细胞凋亡影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察细胞凋亡因子核酸内切酶G(endonuclease G,Endo G)基因过表达在镉诱导人胚胎肾细胞HEK-293凋亡中的影响。方法从人肝癌细胞系(human hepatocarcinoma cells,HepG 2)中提取RNA,经逆转录获取互补DNA cDNA),通过聚合酶链反应(PCR)扩增Endo G基因,与pcDNA 3.0相连,构建pcDNA 3.0-Endo G真核表达载体,转染HEK-293细胞,并结合不同浓度氯化镉处理细胞;通过蛋白印迹实验(Western blot)验证基因过表达,吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)双染法及流式细胞术(FCM)检测Endo G基因过表达对镉诱导HEK-293细胞凋亡的影响,噻唑蓝法(MTT)检测细胞存活率。结果成功构建pcDNA 3.0-EndoG真核表达载体,Endo G基因扩增片段大小约1 100 bp;该载体转染细胞后,Endo G成功过表达,使HEK-293细胞凋亡率>37%,且随氯化镉浓度增加,Endo G表达量先上升后下降。结论 Endo G以诱导细胞早期凋亡和晚期凋亡为主要形式。
- 周凤云潘杨滨何志娟毛伟平李文秀刘宣宣徐翀
- 关键词：氯化镉真核表达HEK-293细胞
- B淋巴细胞刺激物单克隆抗体的制备与特性鉴定被引量：6
- 2005年
- 石晓娟毛伟平张双全姜平赵洁明
- 关键词：单克隆抗体细胞融合
- 唾液腺提取物抗龋作用的实验研究被引量：2
- 2004年
- 目的 :研究唾液腺提取物 (SGE)的防龋效果。方法 :给SD大鼠接种致龋菌 ,饲喂 2 0 0 0致龋饲料 ,造成大鼠龋齿模型 ,在造模的同时 ,给予低、高剂量SGE ( 4 0 0mg/kg和 15 0 0mg/kg) ,并以氟化物作为阴性对照 ,以喂全价颗粒饲料的正常大鼠为空白对照 ,用Keyes计分法评定患龋情况 ,用NBT法测定血细胞SOD活性。SGE对牙钙的溶出量的测定 ,采用电化学人工龋模型在离体条件下进行。结果 :空白对照不形成龋齿 ,SGE的釉质龋、牙本质浅龋和牙本质深龋级的龋齿计分均非常显著低于模型组 (P <0 .0 0 1或P <0 .0 1) ,SGE能明显抑制牙钙的溶出 ,显著提高血液SOD活性。结论 :SGE有与氟化物相似的抗龋作用 ,可能成为一种新型生物抗龋剂。
- 程光宇唐梓进陶明煊吴京燕毛伟平
- 关键词：抗龋作用龋齿动物模型超氧化物歧化酶
