杨志芳 作品数:10 被引量:43 H指数:4 供职机构: 新疆医科大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
miR-27a-3p对肝癌细胞化疗敏感性的影响及机制探讨 被引量:6 2019年 背景与目的:肝细胞肝癌是一种临床上常见的恶性肿瘤,由于其对化疗药物的耐受,常导致预后较差。microRNA(miRNA,miR)是一类长链非编码小RNA,参与肿瘤的多种生物学功能。miR-27a-3p作为代谢相关的miRNA被广泛地研究,而与化疗敏感性之间关系的报道较少。通过探讨miR-27a-3p参与肝癌化疗敏感性及其可能机制,为肝癌化疗提供新的理论依据。方法:应用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析miR-27a-3p在肝细胞肝癌患者癌组织与癌旁组织中的表达。采用LipofectamineTM 3000脂质体瞬时转染方法,将miR-27a-3p过表达质粒和阴性对照质粒(miR-control)转染肝癌细胞株HepG2,将敲低质粒miR-inhibitor-27a-3p和阴性对照质粒(miR-inhibitor-control)转染PLC细胞,分别加入不同浓度的顺铂(cisplatin,DDP)处理48 h,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞增殖情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白[质]印迹法(Western blot)技术检测磷脂酰肌醇3激酶和蛋白激酶B(phosphoinosmde-3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路相关的蛋白表达。结果:miR-27a-3p在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P<0.05);在HepG2过表达细胞中,MTT结果显示,实验组miR-27a+DDP细胞对DDP的半数抑制浓度(IC50)为(1.02±0.03)μg/mL,较对照组miR-control+DDP(1.27±0.08)μg/mL、空白对照组+DDP(1.73±0.08)μg/mL均降低(P<0.05);细胞凋亡分析结果显示,实验组miR-27a+DDP的凋亡率[(31.03±0.20)%]显著高于对照组+DDP[(18.51±2.96)%]和空白对照组+DDP[(8.73±1.58)%](P<0.05);Western blot检测结果显示,miR-27a+DDP组的PI3K表达水平(0.28±0.01)较DDP组[(0.43±0.01)]、miR-27a组(0.57±0.11)及miR-control组(0.72±0.01)降低(P<0.05);miR-27a+DDP组的p-AKT的表达水平(0.29±0.01)与DDP组(0.46±0.05)、miR-27a组(0.67±0.01)及miR-control组(0.10±0.01)相比明显降低(P<0.05);而miR-27a+DDP组的C-caspase的表达水平(0.69±0.01)则高于DDP组(0.51 杨颖 杨志芳 才层 张瑞丽 路鹏霏 贾春丽 李志鹏 毛睿 张华 包永星关键词:肝癌细胞 PI3K/AKT通路 顺铂 化疗敏感性 薏苡仁注射液联合吉西他滨对人肝癌细胞株Bel-7402增殖及凋亡的影响 被引量:5 2017年 目的研究薏苡仁注射液(coix seed triglyceride)联合吉西他滨(gemcitabine)对人肝癌细胞株Bel-7402增殖及凋亡的影响及可能机制。方法本实验以体外培养的人肝癌细胞株Bel-7402为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、克隆形成实验测定薏苡仁、吉西他滨及两药联合作用对人肝癌细胞株Bel-7402活性及增殖能力的影响,流式细胞仪测定凋亡率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定Caspase-3、Bcl-2表达水平,Image-pro plus 6.0计数克隆形成细胞集落数。使用SPSS 17.0统计学软件对实验结果进行分析。结果薏苡仁及吉西他滨对人肝癌细胞株Bel-7402活性及增殖均有抑制作用,两者联合具有协同作用(F=509.677,P<0.01;F=562.100,P<0.01)。薏苡仁联合吉西他滨对人肝癌细胞株Bel-7402的凋亡率为(76.3±1.6)%,明显高于吉西他滨的单药作用[(53.2±2.0)%]及薏苡仁[(42.4±1.8)%]的单药作用(F=46.742,P<0.01)。两药联合组细胞Caspase-3表达增加(F=38.264,P<0.01),Bcl-2表达量降低(F=4.817,P<0.05)。结论薏苡仁可能通过影响细胞凋亡相关因子如Caspase-3、Bcl-2抑制肝癌细胞活性及增殖,诱导细胞凋亡,起到对吉西他滨化疗增敏的作用。 杨颖 贾春丽 李志鹏 杨志芳 张华 赵化荣 毛睿 艾斯克尔.吐拉洪 包永星关键词:薏苡仁注射液 吉西他滨 细胞增殖 细胞凋亡 肝癌 长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1在肝细胞癌患者血浆中的表达及其临床意义研究 被引量:3 2018年 目的探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)在肝细胞癌(HCC)患者血浆中的表达及临床意义。方法收集2015年4月—2017年4月就诊于新疆医科大学第一附属医院,经病理诊断为HCC的120例患者的血浆及血清样本。采用实时荧光定量聚核酶链式反应(qRT-PCR)检测HCC患者血浆MALAT1表达水平,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清基质金属蛋白酶(MMP)9、血管内皮生长因子(VEGF)水平。以血浆MALAT1表达水平的中位数将患者分为MALAT1高、低表达组,分析血浆MALAT1表达水平与HCC患者临床特征及血清VEGF、MMP9表达水平的关系。结果 MALAT1高、低表达组肿瘤分期、转移情况比较,差异有统计学意义(P<0.05);MALAT1高、低表达组性别、年龄、Child-Pugh分级、血清甲胎蛋白(AFP)表达水平、病理分级、HBV感染情况、肝硬化情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。COX多因素回归分析结果显示,年龄、肿瘤分期、Child-Pugh分级、有无转移、血浆MALAT1表达水平是HCC患者预后的独立影响因素(P<0.05)。MALAT1高、低表达组生存率比较,差异有统计学意义(P<0.010)。血浆MALAT1表达水平与血清MMP9、VEGF表达水平呈正相关(P<0.010)。结论血浆MALAT1高表达的HCC患者生存期短,容易出现转移。 贾春丽 杨颖 张华 李志鹏 杨志芳 张瑞丽 赵化荣 毛睿 才层 包永星关键词:肝肿瘤 转录因子 IL-2联合顺铂治疗恶性胸腔积液的有效性及安全性Meta分析 被引量:2 2017年 目的评价IL-2(白细胞介素-2)联合顺铂对比顺铂治疗恶性胸腔积液的有效性及安全性。方法计算机检索Pubmed、The Cochrane Library、Web of Science、Embase、中国知网、维普全文数据库和万方数据库。研究者筛选文献、提取数据并评价文献质量,采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果共纳入16项随机对照研究、894例患者。Meta分析结果显示:IL-2联合顺铂治疗恶性胸腔积液的有效率、完全缓解率、生活质量改善率明显高于单独用顺铂。不良反应中IL-2联合顺铂发热发生率高于单独应用顺铂,而胸痛、消化道反应、骨髓抑制的发生率两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-2联合顺铂治疗恶性胸腔积液的疗效、生存质量改善均明显优于单独用顺铂,仅发热发生率较单用顺铂高,有一定的临床推广应用价值,但须采取一定的措施预防不良反应的发生。 贾春丽 杨颖 李志鹏 张瑞丽 刘丹 杨志芳 包永星关键词:白细胞介素-2 顺铂 恶性胸腔积液 META分析 微小RNA-27a-3p对肝癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响 被引量:10 2019年 目的探究微小RNA-27a-3p(miR-27a-3p)对肝癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测正常肝细胞株(L02)和肝癌细胞株(HepG2和PLC)中miR-27a-3p的差异表达。细胞实验分4组:HepG2过表达细胞,miR-27a-3p过表达组(miR-27a)与阴性对照组(miR-Con);PLC敲低细胞,miR-27a-3p敲低组(miR-inhibitor-27a)与阴性对照(miR-inhibitor-Con),qPCR检测转染后各组miR-27a-3p的mRNA表达情况,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布差异。两组间均数比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)。结果qPCR结果显示,L02、HepG2及PLC的miR-27a-3p表达水平依次升高,相对表达水平分别为1.07±0.04、4.81±0.64和11.31±0.92(P<0.05)。MTT结果显示HepG2细胞转染miR-27a-3p过表达质粒后,细胞活性与阴性对照组相比相对减弱(P<0.05);细胞凋亡检测结果显示miR-27a-3p过表达组凋亡率高于阴性对照组(P<0.05);细胞周期结果显示miR-27a-3p过表达细胞组S期细胞比例明显低于阴性对照组(P<0.05)。进一步在PLC细胞中进行miR-27a-3p敲低验证,MTT、细胞凋亡和周期实验结果与HepG2过表达细胞的结果趋势相反,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-27a-3p可以明显抑制肝癌细胞增殖,促进细胞凋亡及改变细胞周期的分布,可能成为肝癌治疗的潜在靶点。 杨志芳 杨颖 张瑞丽 贾春丽 李志鹏 王文然 张华 李绍山 包永星关键词:细胞增殖 细胞周期 颅咽管瘤MSCT、MRI影像学特征及与病理学的对照研究 被引量:2 2021年 目的观察其MSCT、MRI影像学特征及与病理特征进行对照分析。方法回顾性分析本院2017年6月至2019年4月收治的60例颅咽管瘤患者的临床资料,观察MSCT检查及MRI检查平扫和增强扫描的影像特点,与病理特征进行对照;分析颅咽管瘤的MSCT和MRI表现,记录肿瘤平扫和增强后的相关数据。结果60例患者中T1WI上呈低信号34例,混杂信号19例,高信号7例。T2WI以高信号为主,31例内有低信号区;有49例钙化,囊肿壁钙化呈弧线状、蛋壳状,实质肿块钙化呈点状、斑点状。结论MSCT检查及MRI检查可清楚显示颅咽管瘤的影像学特点,为临床上诊断和鉴别颅咽管瘤提供了可靠的信息,并与临床病理具有良好的相关性,结合患者临床资料可有效提高诊断准确率。 李绍山 杨志芳 付强 周凯 王西宪关键词:多层螺旋CT 磁共振成像 颅咽管瘤 病理学 早期要素型肠内营养治疗在胃癌术后的应用效果 2023年 分析早期要素型肠内营养治疗在胃癌术后的应用效果。方法 研究在80例病例样本中开展,自2021年10月开始进行,一直延续至2022年4月结束,确保筛出的病例均是胃癌术后患者,样本纳入工作结束后,下一步进行组别的区分,共计两组,每组分得一样的人数。对照组给予米汤类半流质膳食(术后24h后开始)+肠外营养;观察组给予要素型肠内营养(术后24h后开始)+肠外营养,将两组不同方案呈现出的效果做出对比。结果 观察组的排气恢复时间、胃管总引流量、肠鸣音恢复时间、胃管留置时间和排便恢复时间更短(P<0.05);术后早期肠内营养干预前,两组的血清ALB、SCr、TB和Hb水平接近(P>0.05),干预后,观察组的更高(P<0.05);术后早期肠内营养干预前,两组的血清 IgA、TLC和血清IgG水平接近(P>0.05),干预后,观察组的水平更高(P<0.05)。结论 早期要素型肠内营养治疗在胃癌术后有较好的应用效果。 杨志芳关键词:胃癌术后 薏苡仁注射液提高人肝癌细胞Bel-7402放射敏感性的机制研究 被引量:4 2017年 目的 观察薏苡仁注射液对人肝癌细胞Bel-7402活性和放射敏感性的影响。方法 将Bel-7402细胞分为空白对照组、薏苡仁组、单纯照射组和联合处理组。采用X射线照射,同时联合薏苡仁注射液处理,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖活性的变化,流式细胞术观察细胞凋亡率的变化,应用RT-PCR和Western blot法检测肝癌细胞中Bax、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达变化。采用细胞克隆形成法观察存活细胞数,单击多靶模型拟合剂量存活曲线,计算细胞平均致死剂量(D0)值。结果 薏苡仁注射液和X射线对肝癌细胞的生长均有明显抑制作用,其中联合处理组的细胞抑制率明显高于薏苡仁组和单纯照射组(8 Gy),差异有统计学意义(t=17.03、11.26,P〈0.05);与薏苡仁组和单纯照射组相比,联合处理组的细胞凋亡率明显增加(t=24.80、20.19,P〈0.05)。薏苡仁组、单纯照射组及联合处理组Bax的mRNA和蛋白水平依次升高(F=437.92、67.91,P〈0.05),而Bcl-2的mRNA和蛋白水平逐渐降低(F=31.18、48.50,P〈0.05)。单纯照射和联合处理组D0值分别是4.27和3.34,放射增敏比为1.27。结论 薏苡仁注射液可能通过凋亡相关因子Bax和Bcl-2抑制肝癌细胞生长,诱导凋亡,具有放射增敏作用。 杨颖 李志鹏 贾春丽 刘强 杨志芳 张瑞丽 毛睿 张华 艾斯克尔·吐拉洪 包永星关键词:薏苡仁注射液 X射线 肝癌细胞 GP73调控PI3K/Akt通路介导肝癌细胞索拉非尼耐药机制的实验研究 被引量:7 2019年 目的研究高尔基体糖蛋白73(Golgi protein 73,GP73)与PI3K/Akt信号通路在肝癌细胞索拉非尼耐药中的作用机制。方法 MTT法检测索拉非尼对肝癌细胞活性的抑制率,采用浓度递增法对肝癌HepG2亲本细胞进行长时间培养,建立索拉非尼耐药细胞株模型,倒置显微镜观察细胞形态变化。应用质粒转染技术对耐药细胞HepG2进行GP73过表达和敲低干预,观察GP73的不同表达水平对索拉非尼敏感性的影响。Western blot法检测亲本细胞和耐药细胞中GP73、EMT标记蛋白及PI3K/Akt信号通路的蛋白表达。结果不同浓度索拉非尼对肝癌细胞Bel-7404、SK-Hep-1及HepG2的活性均有抑制作用。长期低浓度索拉非尼刺激HepG2细胞形态向长梭形改变。GP73过表达减弱了肝癌细胞对索拉非尼的敏感性; GP73敲低增加其敏感性。HepG2耐药细胞中GP73、N-cadherin及Vimentin蛋白表达上调,E-cadherin水平下调(均P <0. 05)。此外,HepG2耐药细胞中GP73、PI3K及p-Akt蛋白表达增加。结论 GP73表达上调及PI3K/Akt通路激活,促进EMT可能是肝癌索拉非尼的耐药机制。 杨颖 张瑞丽 杨志芳 刘强 才层 张华 赵化荣 李志鹏 贾春丽 包永星关键词:肝细胞肝癌 索拉非尼 高尔基体蛋白73 STC2在肝细胞癌组织中的表达及临床意义 被引量:4 2018年 目的探讨糖蛋白激素蛋白斯钙素2(stanniocalcin-2,STC2)表达水平与肝细胞癌患者临床病理特征及预后的临床意义。方法选取2011年11月—2017年5月新疆医科大学第一附属医院100例肝癌患者手术标体应用real-time PCR和免疫组织化学方法检测肝细胞肝癌组织中STC2的表达情况,分析STC2表达与肝细胞肝癌患者临床病理特征及预后的关系。结果肝细胞癌组织中STC2的阳性表达率[82.00%(82/100)]明显高于癌旁组织[37.00%(37/100)],差异具有统计学意义(χ~2=42.017,P<0.01)。肝细胞癌患者中STC2的表达与肿瘤大小(χ~2=5.978,P=0.041)、分化程度(χ~2=19.060,P=0.001)、肿瘤的TNM分期(χ~2=12.348,P=0.001)、门静脉癌栓(χ~2=11.718,P=0.001)明显相关;与性别(χ~2=0.130,P=0.719)、患者的年龄(χ~2=2.944,P=0.080)、肿瘤数目(χ~2=1.967,P=0.132)、是否合并肝硬化(χ~2=0.014,P=0.638)无明显相关。Kaplan-Meier生存曲线显示:STC2表达阳性的肝细胞癌患者较表达阴性者生存时间短(t=5.632,P=0.017)。此外,real-time PCR结果表明,肝细胞癌组织中STC2的mRNA表达明显高于对应的癌旁组织(t=8.273,P<0.01)。结论 STC2的表达可能与肝细胞癌的发生、发展过程密切相关,有可能成为潜在的治疗靶点。 李志鹏 杨颖 贾春丽 杨志芳 张瑞丽 包永星关键词:肝细胞癌 免疫组织化学