姚怡
- 作品数：2 被引量：7H指数：1
- 供职机构：山西医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- FoxO1转录因子在巨噬细胞中的表达与炎症的关系被引量：6
- 2016年
- 目的通过研究叉头框蛋白1(forkhead transcription factors of O class 1,FoxO1)转录因子mRNA水平和蛋白水平在巨噬细胞的表达以及检测Foxo1干扰和过表达后巨噬细胞分泌的炎症因子含量,从炎症进展的角度探讨FoxO1转录因子与炎症之间的关系。方法①利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激巨噬细胞Ana-1制作炎症模型,ELISA测炎症因子IL-6、TNF-α的浓度;②采用Real-Time PCR,Western Blot测FoxO1转录因子在mRNA水平以及蛋白水平的含量;③利用脂质体2 000将Fox O1 si RNA转染Ana-1细胞,采用ELISA检测对照组和干扰组分泌的炎症因子IL-6、TNF-α的含量;④利用脂质体2 000将FoxO1过表达质粒转染Ana-1细胞,采用ELISA检测LPS组和过表达组炎症因子IL-6、TNF-α的含量。结果①ELISA实验显示,在LPS的浓度为50 ng/mL时巨噬细胞分泌的炎症因子IL-6、TNF-α含量分别为2 190、1 124 ng/mL,干预时间为36 h时分别为2 190、1 995 ng/mL。此条件下炎症因子含量最高;②Real-Time PCR实验和Western blot实验结果显示,在LPS组FoxO1转录因子mRNA水平是对照组的0.36倍,蛋白水平的表达量是对照组的0.58倍;③Foxo1 siRNA干扰实验结果显示,与对照组相比,干扰组巨噬细胞分泌炎症因子TNF-α含量从782 ng/mL上升到1 290 ng/mL,IL-6的含量从161 ng/mL上升到251 ng/mL;4.脂质体转染过表达FoxO1质粒实验显示,与LPS组相比,过表达组巨噬细胞分泌炎症因子TNF-α的含量从1 785 ng/mL下降到1 329 ng/mL,IL-6含量从486 ng/mL下降到317 ng/mL。结论LPS刺激巨噬细胞Ana-1产生炎症反应,导致炎症因子的释放,同时下调Foxo1转录因子在mRNA水平和蛋白水平的含量,特异性FoxO1基因沉默可上调炎症因子的释放。过表达FoxO1可以使炎症反应减轻,证明Foxo1转录因子参与巨噬细胞引起的炎症反应。
- 张娜张紫燕赵凌霞姚怡杨莹张建林郑国平
- 关键词：巨噬细胞炎症反应
- 叉头框蛋白O3a表达下调对人肾小管上皮细胞EMT的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:研究叉头框蛋白O3a(forkhead box protein O3a,Fox O3a)下调对人肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间质转化(EMT)的影响和机制。方法:体外培养HK-2细胞,10 ng/m L TGF-β1诱导HK-2细胞建立EMT细胞模型,Western blot检测E-cadherin、α-SMA表达,证明细胞EMT模型建立成功。Western blot检测在EMT细胞和正常细胞中转录因子Fox O3a的表达变化。敲低正常HK-2细胞中的Fox O3a后,Western blot检测细胞的EMT程度。Western blot检测EMT细胞与低表达Fox O3a细胞中β-Catenin的表达变化。结果:TGF-β1处理HK-2细胞作用后E-cadherin表达量显著减少(P<0.01),α-SMA蛋白表达量明显增加(P<0.05),证明EMT细胞模型建立成功。与正常HK-2细胞相比,EMT细胞中转录因子Fox O3a显著减少(P<0.01)。敲低HK-2细胞中的Fox O3a后,E-cadherin表达量显著减少(P<0.01),α-SMA蛋白表达量明显增加(P<0.05),出现EMT现象。相比于正常细胞,EMT细胞的β-Catenin表达增加(P<0.05);Fox O3a敲低的细胞中β-Catenin表达也显著增加(P<0.01)。结论:HK-2细胞通过降低转录因子Fox O3a的表达,从而上调β-Catenin,促进细胞上皮-间质转分化。
- 姚怡张建林赵虹刘志贞杨莹张紫燕赵凌霞郑国平
- 关键词：肾小管上皮细胞FOXO3AΒ-CATENIN上皮-间质转化
