张璐
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：南京医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：南京医科大学科技发展基金南京市医学科技发展项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 低氧处理不同时间对人肺腺癌A549细胞增殖的影响及相应缺氧模型探讨
- 2019年
- 目的:观察低氧处理不同时间对人肺腺癌A549细胞增殖的影响,探讨合理的人肺腺癌细胞株A549体外模拟缺氧时间。方法:将人肺腺癌细胞A549细胞株在低氧环境下分别培养12 h、24 h、48 h、72 h,设置常氧对照组,通过CCK8法测定A549细胞存活率,RT-PCR和免疫印迹分别检测细胞缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor, VEGF)mRNA及蛋白的表达。结果:低氧24 h组A549细胞存活率最高,低氧48 h、72 h组A549细胞存活率呈时间依赖性明显下降(P<0.001)。自低氧12 h起,A549细胞HIF-1αmRNA和VEGFmRNA的表达开始随低氧时间延长而显著增加(P均<0.001);HIF-1α和VEGF蛋白表达自24 h开始随低氧时间延长而显著增加(P均<0.001)。结论:低氧诱导的A549细胞存活率呈时间依赖性降低,而HIF-1α、VEGF表达呈时间依赖性增高,人肺癌细胞株A549缺氧模型最适时间为24 h。
- 张璐沈红沈立朱祎娜崔进
- 关键词：低氧缺氧诱导因子-1Α血管内皮生长因子
- 低氧环境下肺腺癌A549细胞对顺铂化疗抵抗的实验研究被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨低氧对肺癌A549细胞顺铂化疗抵抗作用,并分析可能机制。方法:将A549细胞分为常氧、常氧顺铂、低氧、低氧顺铂组。在常氧顺铂组和低氧顺铂组,加入不同浓度顺铂(10、40、80、100、200μmol/L)后,采用CCK8法测定半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)和抑制率。流式细胞仪检测各组细胞周期和凋亡率。RT-PCR和Western Blot检测各组缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及切除修复交叉互补基因1(excision repair cross complementation group 1,ERCC1)的转录和蛋白表达变化。结果:常氧顺铂组IC50为25.82nmol/L,低氧顺铂组为39.98 nmol/L,常氧顺铂组和低氧顺铂组之间各个浓度顺铂抑制率有统计学差异(P<0.05)。低氧顺铂组的细胞凋亡和G2/M期细胞阻滞较常氧顺铂组减少。RT-PCR和Western Blot显示,低氧组HIF-1α、VEGF、ERCC1转录和表达水平较常氧组明显上升(P<0.01),顺铂作用后表达均下降,在常氧顺铂组和低氧顺铂组之间有显著差异性(P<0.01)。相关分析显示HIF-1α、VEGF、ERCC1之间有显著正相关关系(P<0.01)。结论:低氧诱导A549细胞对顺铂化疗抵抗,与低氧激活HIF-1α、VEGF及ERCC1高表达有关。
- 朱祎娜张璐秦湧崔进沈红
- 关键词：低氧顺铂化疗抵抗ERCC1
- 低氧降低肺腺癌A549细胞紫杉醇敏感性及其机制的探讨被引量：2
- 2017年
- 目的 :研究低氧环境下肺腺癌A549细胞对紫杉醇的敏感性及凋亡的变化,并探讨其可能的作用机制。方法 :A549细胞加入不同浓度的紫杉醇(6.25、12.5、25、50和100 nmol/L)后,分别在常氧和低氧条件下培养24 h,采用CCK-8法检测紫杉醇对A549细胞增殖的抑制作用;FCM法检测对细胞周期和凋亡的影响;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及β-微管蛋白Ⅲ(classⅢbeta tubulin,β-tubulinⅢ)m RNA和蛋白的表达情况。以未用紫杉醇处理的常氧组和低氧组A549细胞分别作为对照。结果 :常氧条件下紫杉醇对A549细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值为(14.35±1.95)nmol/L,低氧条件下则为(20.54±2.22)nmol/L,两者间差异有统计学意义(P<0.05);2种培养条件下,紫杉醇浓度从12.5~100 nmol/L对A549细胞增殖的抑制率差异均有有统计学意义(P值均<0.05)。与常氧下相比,低氧下紫杉醇诱导的细胞凋亡和G2/M期细胞阻滞明显减少(P<0.01和P<0.05)。低氧组中HIF1-α、VEGF、β-tubulinⅢm RNA和蛋白的表达水平均明显上升(P值均<0.01),但紫杉醇处理能明显下调它们的表达(P值均<0.01);低氧+紫杉醇组中HIF-1α、VEGF、β-tubulinⅢm RNA和蛋白的表达水平均较常氧+紫杉醇组明显升高(P值均<0.01)。结论 :低氧可降低A549细胞对紫杉醇的药物敏感性,这可能与低氧环境下HIF1-α、VEGF及β-tubulinⅢ的高表达有关。
- 沈红朱祎娜秦湧张璐崔进
- 关键词：紫杉酚肿瘤微环境细胞低氧化疗敏感性
