李小英
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
- 供职机构:广东药科大学更多>>
- 发文基金:国家重点实验室开放基金广东省自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- AIV PB2基因靶向性M1GS核酶的构建及其体外切割活性测定被引量:1
- 2017年
- 目的针对禽流感病毒(AIV)复制酶PB2亚基的基因构建具有靶向切割作用的M1GS核酶,为新型抗AIV反义药物的开发奠定基础。方法基于大肠埃希菌的核糖核酸酶P(RNase P),根据AIV PB2基因的序列特征,设计一小段与之互补的引导序列GS,通过PCR技术将其共价连接至大肠埃希菌RNase P催化性亚基(M1 RNA)的3'末端,以构建靶向性M1GS核酶。通过体外切割试验测定M1GS核酶的活性。结果构建了M1GS-T_(436)、M1GS-C_(341)两种M1GS核酶。体外切割实验证实,核酶M1GS-T_(436)可对靶RNA片段产生特异性切割;核酶M1GS-C_(341)虽可切割靶RNA片段,但可能属于非特异性切割。结论成功构建并筛选出一种具有显著体外切割活性的M1GS核酶(M1GS-T_(436)),为今后进一步研究其胞内及体内抗病毒活性奠定了基础。
- 李小英伍婧茹刘琳张文军
- 关键词:禽流感病毒抗病毒
- EGS-C^(67)抑制HCV基因表达及其抗病毒活性的测定
- 2017年
- 目的基于丙肝病毒(HCV)基因组保守区5'UTR的序列,设计一段相应的外部引导序列(EGS),鉴定其体外靶向切割活性及胞内抗病毒作用。方法用计算机软件对HCV基因保守区的5'非翻译区(5'UTR)序列与结构进行分析,选择针对HCV第67位胞嘧啶C与第68位鸟嘌呤G之间的位点,作为设计的靶位,设计相应的EGS(EGS-C^(67)),将该EGS导入HCV感染的Huh7.5.1细胞,通过Northern blot及Western blot试验检测HCV基因的表达,通过荧光定量PCR检测EGS-C^(67)的抗病毒活性。结果体外切割试验表明EGS-C^(67)对HCV RNA片段具有明显的靶向引导活性。在宿主细胞内EGS-C^(67)可显著抑制HCV基因的表达,可使Huh7.5.1细胞培养上清中HCV的滴度降低约150倍(P<0.01)。结论 EGS-C^(67)作为一种新型抗HCV核酸分子,其成功构建为抑制HCV增殖提供了一种新的抗病毒策略。
- 张成成李小英伍婧茹张文军
- 关键词:丙型肝炎病毒抗病毒
- AIV-PB2特异性M1GS核酶的构建及其活性研究
- 本论文针对禽流感病毒(AIV)的关键基因--复制酶基因PB2,设计并构建了八种M1GS核酶,分别是M1GS-T436、M1GS-T934、M1GS-T1105、M1GS-T1523、M1GS-T1771、M1GS-C34...
- 李小英
- 关键词:禽流感病毒复制酶基因抗病毒效应
- 文献传递