周志艳
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：河北科技大学更多>>
- 发文基金：河北省高等学校科学技术研究指导项目博士科研启动基金石家庄市科学技术研究与发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 重组人脑利钠肽制备中内毒素的去除工艺被引量：1
- 2018年
- 在重组人脑利钠肽(BNP)的分离纯化过程中去除内毒素,选用Chelating Sepharose FF亲和柱层析、Q Sepharose FF阴离子交换柱层析、Source 15反相柱层析、SP Sepharose FF阳离子交换柱层析组合的方法对BNP进行分离纯化。按照2015版药典中鲎试剂法检测各层析柱纯化阶段得到蛋白溶液中的内毒素含量;用HPLC方法检测各阶段所得蛋白的浓度和纯度。BNP制备过程中每一步层析在内毒素去除方面都有良好的效果,内毒素去除率超过90%;最终纯化所得BNP原液内毒素含量降至0.34 EU/0.5 mg,去除率高于99.99%,蛋白纯度高于98%。所设计的四步层析纯化分离方法在纯化重组人脑利钠肽的同时也能高效的去除蛋白溶液中内毒素,所得原液内毒素的含量远远低于国家药典对注射剂内毒素含量的最低限制,为重组人脑利钠肽的工业化生产奠定了基础。
- 朱重悦李力周志艳邹卫周晓雷
- 关键词：内毒素重组蛋白柱层析
- NDRG2上调PTEN表达抑制乳腺癌细胞迁移的实验被引量：6
- 2017年
- 目的利用具有相同遗传背景但不同转移能力的乳腺癌细胞模型MCF-7、LM-MCF-7以及MDA-MB-231细胞,研究NDRG2调控乳腺癌细胞迁移的作用及机制。方法利用RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测MCF-7、LM-MCF-7以及MDA-MB-231细胞中NDRG2和PTEN mRNA和蛋白表达水平;构建pCMV-NDRG2和pCMV-PTEN表达载体以及设计合成NDRG2和PTEN siRNA,通过转染过表达或沉默NDRG2和PTEN表达,Transwell迁移实验检测转染后细胞迁移能力改变,Western blot检测NDRG2和PTEN表达调控关系。结果 MCF-7细胞中NDRG2和PTEN mRNA水平和蛋白表达水平显著高于LM-MCF-7和MDA-MB-231细胞(P<0.05);在LM-MCF-7和MDA-MB-231中上调NDRG2表达可降低细胞迁移能力至13.02%和26.33%(P<0.01);在MCF-7细胞中沉默NDRG2表达可增强细胞迁移能力至354.62%(P<0.01);蛋白免疫印迹检测显示PTEN表达受NDRG2调控;沉默(或过表达)NDRG2表达,同时过表达(或沉默)PTEN,MCF-7(或LM-MCF-7)细胞迁移能力未发生显著变化(P>0.05)。结论乳腺癌细胞中,NDRG2的表达下调,导致PTEN表达下降,解除了对乳腺癌细胞迁移的抑制作用。NDRG2/PTEN信号途径的沉默是乳腺癌细胞获得高迁移能力的重要机制。
- 周晓雷朱重悦张世光周志艳李海潮邹卫
- 关键词：乳腺肿瘤NDRG2PTEN细胞迁移
- NDRG2通过抑制β-catenin表达和入核调控乳腺癌细胞增殖被引量：5
- 2016年
- 背景与目的:乳腺癌是女性发病率最高的恶性肿瘤之一,肿瘤细胞的恶性增殖是造成患者死亡的重要原因。本研究利用具有相同遗传背景但不同增殖能力的乳腺癌细胞模型,研究N-myc下游调节基因2(N-myc downstream regulated gene 2,NDRG2)调控乳腺癌细胞增殖的作用及分子机制。方法:通过蛋白[质]印迹法(Western blot)检测MCF-7/LM-MCF-7细胞中NDRG2蛋白表达水平;构建NDRG2真核表达载体及si RNA干扰片段,通过转染上调或沉默NDRG2表达,流式细胞实验检测细胞增殖能力,Western blot检测β-连环蛋白(β-catenin)表达,免疫荧光染色检测β-catenin细胞定位;共转染MCF-7细胞NDRG2 si RNA和pCMV-Tcfδ,流式细胞实验检测细胞增殖能力。结果:NDRG2的蛋白表达水平同乳腺癌细胞增殖能力负相关;在增殖的LMMCF-7细胞中上调NDRG2表达,细胞增殖指数(proliferation index,PI)由47.18%下降至31.78%(P<0.001);在低增殖的MCF-7细胞中沉默NDRG2表达,PI由32.00%上升至52.59%(P<0.001);Western blot及免疫荧光结果显示,NDRG2可抑制β-catenin表达,并抑制其聚集入核;流式细胞检测结果显示,共转染si RNA和pCMV-Tcfδ的MCF-7细胞增殖能力未增强,进一步说明NDRG2是通过抑制β-catenin的转录调节作用抑制肿瘤细胞增殖。结论:在乳腺癌细胞中,NDRG2的表达水平下调,导致β-catenin聚集入核,并激活下游靶基因,促进乳腺癌细胞增殖。此分子机制对阐明乳腺癌细胞增殖调控机制具有重要意义。
- 周晓雷朱重悦张世光周志艳李海潮邹卫
- 关键词：乳腺肿瘤Β-连环蛋白细胞增殖
- 重组蛋白药物临床前生物活性及含量检测技术研究
- 人脑利钠肽(Human Brain Natriuretic Peptide,hBNP)又称B型利钠肽(B-type Natriuretic Peptide),是心室分泌的具有代偿功能的一种内源性多肽,通过舒张血管,促进排...
- 周志艳
- 关键词：人脑利钠肽酶联免疫吸附测定血药浓度测定
- 文献传递
- 一种用于BNP检测的试剂盒
- 本实用新型涉及一种用于BNP检测的试剂盒，其包括低温试剂存放盒、分别固定设置在低温试剂存放盒左右两侧的第一立柱和第二立柱以及设置在低温试剂存放盒下方且与第一立柱和第二立柱滑动连接的抽拉盒；所述低温试剂存放盒上方设置有第一...
- 周志艳宗立伟苏蕊周晓雷邹卫
- 文献传递
