陈明龙
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CTP-NPRL2融合蛋白对肾癌原代细胞迁移侵袭能力的抑制及机制研究被引量：1
- 2016年
- 目的将原核表达的氮酶调节因子2(nitrogen permease regulator 2-like,NPRL2)融合蛋白通过胞浆转导肽(cytoplasmic transduction peptide,CTP)转入肾癌原代细胞内,观察其对肾癌原代细胞迁移侵袭的影响,并分析与肾癌上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系。方法胶原酶消化法培养肾癌原代细胞;构建原核表达质粒pET15b-CTP-NPRL2和pET15b-NPRL2,表达融合蛋白CTP-NPRL2和NPRL2,并通过Western blot鉴定目的蛋白的表达。将培养成功的原代细胞分为BLANK组、NPRL2组和CTP-NPRL2组。免疫荧光检测目的蛋白的细胞定位;Transwell迁移侵袭实验检测导入NPRL2蛋白后,对肾癌细胞迁移侵袭能力的影响;Real-time PCR检测Raptor、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤粘蛋白(Fibronectin)m RNA表达水平;Western blot检测Raptor、E-cadherin、Vimentin、Fibronectin蛋白表达水平。结果成功培养出肾癌原代细胞并通过鉴定;测序结果及Western blot检测结果显示质粒构建成功并表达出目的蛋白;免疫荧光检测结果显示CTP-NPRL2融合蛋白可以穿过胞膜并定位于胞浆;迁移和侵袭实验显示CTP-NPRL2组肾癌细胞迁移侵袭能力明显下降(P<0.05);Real-time PCR和Western blot检测结果显示CTP-NPRL2组Raptor、Vimentin与Fibronectin的m RNA、蛋白表达水平与NPRL2组和BLANK组相比明显降低(P<0.05),而E-cadherin的mRNA、蛋白表达水平与NPRL2组与BLANK组相比明显升高(P<0.05)。结论 NPRL2可能通过与Raptor相互作用影响mTORC1的活性,进而调节EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin、Fibronectin的表达量,影响肾癌细胞的迁移侵袭能力。
- 史晓博叶茂曾洋陈明龙陈志雄熊晶吕不凡唐伟
- 关键词：迁移上皮间质转化
- 特殊类型肾结石应用输尿管软镜治疗的临床评估被引量：8
- 2016年
- 目的:探讨输尿管软镜钬激光碎石术(flexible ureteroscopy combined holmium laser lithotripsy,f-URS)治疗特殊类型肾结石的有效性和安全性。方法:回顾分析我院2014年1月至2015年8月收治的经f-URS治疗的22例特殊类型肾结石患者,包括过度肥胖2例,脊柱侧弯1例,盆腔异位肾1例,不完全输尿管畸形2例,肾盏憩室5例,独肾10例,马蹄肾2例。结石单发12例,多发10例。结石平均大小为(1.50±0.82)cm。术前10例尿常规白细胞计数>500个/μL,6例合并肾功能不全。结果:21例术中成功探及结石并粉碎,1例马蹄肾患者术中软镜无法粉碎到全部结石。平均碎石次数1.3次,平均手术时间(66±24)min,平均术后住院时间(1.73±1.15)d。1例术后发热,静脉应用抗生素后治愈。术后4周复查3例结石残留,肾功能不全均有改善。结论:输尿管软镜钬激光碎石术治疗特殊类型肾结石有效、安全。
- 陈明龙史晓博唐伟
- 关键词：输尿管软镜钬激光结石
