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周寅
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1
被引量:7
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相关领域:
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杨国柱
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2015
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TLR4通路关键蛋白MyD88在坏死性小肠结肠炎发病过程中的作用机制研究
被引量:7
2015年
目的探究以MyD88为关键传导分子的TLR4下游炎症-凋亡信号通路在NEC发病过程中的作用机制。方法采用SPF级,新生10日龄MyD88^-/-幼鼠和相应的野生型幼鼠,共32只,分别按照数字表法随机分配进入NEC实验组或对照组;NEC实验组幼鼠置入自制新生保育箱内造模处理(每日人工配置鼠乳代用品喂养,5次/d;每次给予N2缺氧90S后,快速充入O2复氧,再次置入4℃环境冷刺激10min,3次/d,连续3d;LPS10mg/kg稀释于0.1ml灭菌水中,去芯留置针头口腔插管灌胃,1次/d,连续3d);对照组继续与母鼠同笼,鼠乳喂养。实验结束后取材回肠末端肠管组织,HE染色法组织病理评分及液相芯片细胞因子TNF-α及IL-1β检测判断各组肠道NEC炎症程度。TUNEL方法检测各组小鼠肠道细胞的凋亡水平变化。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测各组小肠组织内TLR4炎症-凋亡通路中TRIF、IRF-3、NF-κb、Bax、Bcl-2、Caspases的mRNA表达情况。结果与野生鼠NEC组相比,MyD88敲除鼠小肠炎症程度评分(1.63±0.52比2.75±0.46)、炎症效应分子NF_小表达(1.38±0.25比2.33±0.76)、促炎因子IL-1β(465.57±81.59比863.58±198.28)、TNF-α(5.41±0.83比6.48±1.15)水平明显降低;肠上皮细胞凋亡明显减少(4.44±0.47比9.75±1.00),凋亡效应分子Caspases 8(2.03±0.20比4.06±0.44)、Caspases 9(1.02±0.08比1.93±0.09)、Caspases 3(1.87±0.28比6.75±1.12)和促凋亡基因Bax(1.15±0.25比2.40±0.42)表达降低(P〈0.05)。MyD88非依赖通路中关键因子TRIF(1.85±0.38比1.4±0.19)和IRF-3(2.01±0.41比1.53±0.38)表达上调(P〈0.05);抗凋亡基因Bcl-2(1.18±0.31比1.10±0.20)表达无变化(P〉0.05)。结论①TLR4下游的MyD88-NF-κb信号通路是NE
杨国柱
周寅
吕兆瑛
周斌
陈珂玲
王奕
姚龙沛
李园
关键词:
小肠结肠炎
坏死性
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