徐艳
- 作品数：3 被引量：8H指数：1
- 供职机构：烟台大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 芹菜不同器官、品种CELⅠ核酸酶提取的比较
- 2015年
- 随着TILLING技术的发展,发挥关键作用的芹菜CELⅠ核酸酶也得到了越来越广泛的应用。鉴于其活性直接影响突变体检测的效果,而芹菜粗提物中CELⅠ核酸酶的含量和活性因提取组织及提取程序不同而有较大变化,所以本研究分析了芹菜不同器官、品种等因素对CELⅠ核酸酶粗提物提取量的影响,并用只含有1个碱基差异的2个目的DNA片段形成的杂交链为底物对其活性进行了鉴定。结果表明:芹菜不同器官和品种间的CELⅠ核酸酶提取量存在较大差异。不同器官的榨汁率和提取量,以茎的出汁率最高,而叶片中的提取量显著高于根和茎中的提取量;在本研究所用的3个品种中,以山东地方品种马家沟芹的提取量最高,山芹次之,西芹的提取量最低;CELⅠ核酸酶的活性鉴定表明,CELⅠ核酸酶粗提物能有效切割DNA双链中的错配碱基。
- 史艳慧赵吉强陈磊李丽霞徐艳张园园郭善利宋建成
- 关键词：芹菜器官TILLING
- 小麦TILLING突变体检测中基因组DNA提取方法的优化被引量：8
- 2017年
- 为了优化小麦高通量TILLING突变体扫描所需基因组DNA提取的方法,对利用SDS法、改良SDS法、CTAB法、改良CTAB法、AxyPrep DNA提取试剂盒、Qiagen DNeasy Plant Mini Kit试剂盒以及再生Qiagen硅胶柱方法提取的小麦基因组DNA进行了系统比较。结果表明,尽管7种方法所提取DNA的纯度及琼脂糖凝胶电泳检测结果均良好,但再生Qiagen硅胶柱方法、CTAB法和改良SDS法的DNA浓度显著高于其他方法。根据小麦细胞分裂素氧化酶基因1(TaCKX1)的DNA序列设计引物,以新鲜DNA样品用于PCR扩增大于1 000bp的片段时,后4种方法扩增效果优于前3种方法;DNA在-20℃下保存100d后重新进行PCR扩增时,则只有Qiagen试剂盒和再生Qiagen硅胶柱2种方法提取的DNA能扩增出大于1 000bp的片段。采用本实验室与新西兰坎特伯雷大学合作建立的再生硅胶柱与自配提取液提取小麦基因组DNA,既保证了DNA的高质量,又降低了使用试剂盒的成本,为小麦TILLING库的构建及其他相关试验提供了一种经济有效的DNA提取方法。
- 徐艳徐继法陈磊赵吉强FU ZeyuJAMESON Paula E宋建成
- 关键词：小麦TILLING基因组DNA
- CRISPR/Cas9系统及其在单子叶植物中的应用
- 2017年
- CRISPR/Cas9系统作为第3代人工核酸内切酶,已经成为继锌指核酸内切酶(zinc finger endonuclease,简称ZFNs)和类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,简称TALENs)之后的新型高效定点的基因组编辑新技术。作为新型的基因编辑技术,CRISPR/Cas9系统拥有突变效率高、构建简单、花费成本低等特点,自其出现之后,受到广泛关注且得到迅速发展,给植物基因组研究和遗传育种带来革命性的变革。目前,该技术已经在多种单子叶植物中实现了基因组定点精确编辑,包括水稻(Oryza sativa)、小麦(Triticum aestivum)、玉米(Zea mays)等单子叶植物。
- 徐继法徐艳赵吉强陈磊郭善利宋建成
- 关键词：单子叶植物植物基因组遗传育种
