方世记
- 作品数：9 被引量：75H指数：5
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省公益性技术应用研究计划项目浙江省重大科技专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丹酚酸A对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的保护作用及其机制被引量：8
- 2017年
- 目的:探讨丹酚酸A(Sal A)对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的保护作用及其机制。方法:采用线拴法构建大脑中动脉缺血再灌注(MCA-IR)模型。将正常SD大鼠随机分为假手术组(对照组)、MCA-IR模型组(MCA-IR组)、Sal A+MCA-IR组(Sal A组);Sal A组于建模前1周每日腹腔注射1.0、2.5、5.0mg/kgSal A。于再灌注后24h取梗死脑组织用TUNEL法检测脑细胞凋亡,Westernblot检测磷酸化Akt(p-Akt)和Akt的表达,免疫组织化学法检测海马区胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)的表达。结果:Sal A组海马CA1区细胞凋亡率和MDA含量较MCA-IR组降低,而SOD量较MCA-IR组显著增加(P<0.05),MCA-IR组海马区p-Akt表达较对照组显著下降(P<0.05),而cPLA2较对照组显著增高(P<0.05),1.0、2.5、5.0mg/kgSal A预处理后,MCA-IR模型大鼠海马区cPLA2表达显著降低(P<0.05),而p-Akt表达显著增加(P<0.05)。结论:Sal A降低缺血再灌注损伤后细胞凋亡,起到损伤保护作用,其机制与其降低cPLA2表达,激活Akt信号通路有关。
- 彭潇方世记郑丽云邱伟文
- 关键词：丹酚酸A细胞凋亡蛋白激酶B脑缺血再灌注
- 肝动脉化疗栓塞术联合胸腺肽α1治疗对中晚期原发性肝癌免疫细胞自噬的影响被引量：22
- 2017年
- 目的探讨肝动脉化疗栓塞术（TACE）联合胸腺肽α1（Tα1）治疗对中晚期肝癌患者免疫细胞自噬水平的改变。
方法收集2015年9月至2016年6月在丽水市中心医院住院的中晚期肝癌患者30例，年龄16～75（56±12）岁，所有研究对象均行TACE治疗，随机分为TACE组和TACE＋胸腺肽组（每组15例），TACE组术后予常规处理；TACE＋胸腺肽组在TACE术后当天即刻给予1.6 mg Tα1皮下注射，每周2次，给药间隔3～4 d，共4周为1个疗程。用流式细胞仪检测两组患者TACE术前、术后1、4周及随访3个月时T细胞亚群百分比。采用密度－梯度离心法分离患者外周血单个核细胞（PBMC），并用蛋白免疫印迹技术（WB）和PCR技术检测PBMC的Beclin－1、LC3蛋白和mRNA水平。
结果两组TACE术前CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞亚群百分比，Beclin－1、LC3蛋白和mRNA差异均无统计意义学（均P〉0.05）。TACE＋胸腺肽组在术后1周时（58.45%±16.34%、38.33%±15.16%、27.31%±12.54%）、术后4周时（62.38%±18.62%、43.19%±13.86%、29.54%±10.33%）和随访3个月时（64.15%±13.76%、41.28%±14.65%、29.38%±15.65%）的CD3＋、CD4＋、CD8＋ T细胞亚群百分比均明显增高于TACE组在术后1周时（53.71%±11.17%、32.12%±10.53%、24.45%±13.72%）、术后4周时（52.12%±14.26%、31.16%±15.43%、23.39%±15.33%）和术后3个月时（54.28%±13.15%、32.17%±14.98%、24.34%±14.12%）的百分比（均P〈0.05） 。TACE＋胸腺肽组在术后1周时（蛋白表达：0.57±0.08、2.26±0.36，mRNA表达：0.62±0.11、2.69±0.27）和术后4周时（蛋白表达：0.66±0.09、3.11±0.45，mRNA表达：0.78±0.13、3.43±0.61）Beclin－1、LC3蛋白和mRNA表达均明显高于TACE组在术后1周时（蛋白表达：0.45±0.16、1.43±0.30，mRNA表达：0.52±0.15、1.15±0.37）和术后4周时（蛋白表达：0.51±0.13、1.81±0.35，mRNA表达：0.56±0.10、1.98±0.41）的表达（均P〈0.05）；但随访3个月时表�
- 方世记郑丽云赵中伟范晓希徐民纪建松
- 关键词：胸腺素免疫
- 索拉非尼联合免疫检查点抑制剂治疗TACE抵抗的中晚期肝癌的疗效及安全性被引量：6
- 2021年
- 目的探讨索拉非尼联合免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)治疗经肝动脉化疗栓塞术(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)抵抗的中晚期肝癌的疗效及安全性。方法回顾性分析2017年1月至2021年3月期间在温州医科大学附属第五医院确诊为TACE抵抗的中晚期肝癌患者的资料,共54例,年龄28~82(56.1±11.8)岁,其中BCLC B期24例,C期30例;Child-Pugh A级34例,B级20例。根据治疗方法不同,分为对照组和联合组,对照组接受单一索拉非尼治疗(n=33),联合组接受索拉非尼联合ICIs治疗(n=21);比较两组患者的一般情况、肿瘤反应性、肿瘤无进展生存时间(progression-free survival,PFS)及不良反应的发生情况。结果联合组(2例CR、11例PR、4例SD和4例PD)的肿瘤反应性明显优于对照组(2例CR、8例PR、10例SD、13例PD)(P=0.041)。联合组的中位PFS明显长于对照组(13.5个月vs 6.8个月,P=0.010);多因素分析显示Child-Pugh B级(HR 2.202,95%CI 1.059~4.581,P=0.035)、BCLC C期(HR 4.077,95%CI 1.902~8.742,P<0.001)、AFP≥400 ng/mL(HR 5.728,95%CI 2.227~14.729,P<0.001)是TACE抵抗肝癌PFS的独立危险因素,索拉非尼联合ICIs(HR 0.180,95%CI 0.082~0.392,P<0.001)是肝癌患者的保护因素。联合组并发皮炎、腹泻的发生率明显多于对照组(P<0.05)。结论索拉非尼联合ICIs治疗提高TACE抵抗中晚期肝癌的肿瘤反应性,延长患者PFS,是一种有效、安全的治疗方案。
- 吴徐璐陈炜越郑丽云方世记吴发宗赵中伟涂建飞陈敏江纪建松
- 关键词：中晚期肝癌索拉非尼
- 不同时间间隔经肝动脉化疗栓塞联合射频消融治疗中晚期肝癌的疗效及安全性被引量：4
- 2021年
- 目的探讨不同时间间隔经肝动脉化疗栓塞术(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)联合射频消融(radiofrequency ablation,RFA)治疗中晚期肝癌的疗效及安全性。方法回顾性分析2012年2月至2017年2月在温州医科大学附属第五医院接受TACE联合RFA治疗的83例经临床或病理诊断中晚期肝癌患者的临床资料。其中男74例,女9例,年龄37~82岁,平均(57.2±9.0)岁。根据TACE和RFA治疗的间隔时间,采用递归分割法将纳入患者分为三组:超短时间隔组(0~5 d,n=14)、短时间隔组(6~22 d,n=35)和长时间隔组(>22 d,n=34)。比较三组的一般临床资料、生存时间(overall survival,OS)、肿瘤无进展生存时间(progressiong-free survival,PFS)及并发症。结果超短时间隔组、短时间隔组和长时间隔组的中位OS分别为31(95%CI 5.4~56.6)个月、28(95%CI 7.2~48.7)个月和23(95%CI 16.4~29.9)个月,三组间无统计学差异(P=0.315)。三组患者的PFS分别为21(95%CI 6.7~35.2)个月、13(95%CI 6.0~19.9)和10(95%CI 7.2~12.8)个月,三组间差异具有统计学意义(P=0.03);短时间隔组(P=0.049)和长时间隔组(P=0.018)的PFS均比超短时间隔组短;长时间隔组PFS短于短时间隔组,但差异无统计学意义(P=0.289)。三组TACE术后发热、腹痛、腹泻、肝功能异常、出血发生率均无统计学差异。三组RFA术后出现血肿形成、皮肤感染,予以对症治疗后缓解,均未见手术相关死亡并发症。结论TACE后5天内行RFA治疗安全可行,比5天后行RFA更有助于延长中晚期肝癌患者的肿瘤无进展时间。
- 陈丽郑丽云方世记陈敏江应希慧吴发宗赵中伟涂建飞纪建松
- 关键词：经导管肝动脉化疗栓塞术射频消融术联合疗法肝癌
- FOX03a-Bim信号通路在雷公藤内酯醇诱导膀胱癌T24细胞凋亡中的作用被引量：9
- 2017年
- 目的探讨FOXO3a-Bim信号通路在雷公藤内酯醇诱导膀胱癌T24细胞细胞凋亡的作用。方法培养膀胱癌T24细胞，将实验分为空白对照组，雷公藤内酯醇组（50nmo/L），MK2206组（50nmo/L雷公藤内酯醇＋5μmol／LMK2206），FOXO3a-siRNA组（50nmo/L雷公藤内酯醇＋100nmo/LFOXO3a-siRNA）和Bim-siRNA组（50nmol/L雷公藤内酯醇＋100nmol/L Bim-siRNA），用噻唑蓝（MTF）法检测124细胞生长抑制率，Annexin V／Propidiumiodide（PI）双染法检测细胞凋亡，Western印迹方法检测p-Akt、Akt、p-FOXO3a、FOXO3a、Bim、Bax、cleaved-caspase3表达。结果25、50、100、250nmo/L雷公藤内酯醇处理24h（17％±9％、24％±5％、43％±8％、61％±8％）、48h（20％±7％、34％±6％、56％±7％、74％±5％）和72h（32％±8％、41％±7％、69％±7％、84％±3％）后细胞生长抑制率均明显高于对照组（P〈0．05）。24、48、72h的Ic。分别为（113±10）、（91±8）、（68±5）nmo/L。24h（10％±4％、15％±5％、29％±8％、46％±8％）、48h（16％±5％、24％±6％、40％±7％、55％±9％）和72h（27％±4％、38％±5％、50％±9％、65％±8％）后细胞凋亡率均明显高于对照组（均P〈0．05）。25、50、100nmo/L雷公藤内酯醇诱导细胞凋亡、降低p-Akt、P-FOXO3a表达同时增高Bim、Bax、cleaved-caspase3表达。FOXO3a-siRNA及Bim-siRNA降低了雷公藤内酯醇诱导Bim、Bax、cleaved-caspase3高表达。雷公藤内酯醇组细胞抑制率（30％±8％）明显高于空白对照组（P〈0．05）。MK2206组（54％±6％）、FOXO3a-siRNA组（18％±7％）和Bim-siRNA组（11％±6％）细胞抑制率亦高于对照组，但与雷公藤内酯醇组相比，MK2206组细胞抑制率明显增高，FOXO3a-siRNA组和Bim．siRNA组细胞抑制率明显降低（P〈0．05）。结论雷公藤内酯醇通过激活FOXO3a-Bim信号通路诱导细胞凋亡，抑制124细胞生长。
- 羊丽丽王晓燕郑丽云方世记徐民赵中伟纪建松
- 关键词：叉头转录因子类雷公藤属细胞凋亡
- 依达拉奉对过氧化氢诱导血管内皮细胞Nrf2/HO-1表达的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨依达拉奉对过氧化氢诱导血管内皮细胞Nrf2/HO-1表达的影响。方法将对数生长期的血管内皮细分为对照组、依达拉奉组、H_2O_2组、依达拉奉+H_2O_2组、H_2O_2+N-乙酰半胱氨酸(NAC)组,用不同条件的培养基培养48 h后用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,活性氧(ROS)检测试剂盒检测细胞内ROS,Western blot方法检测Nrf2/HO-1蛋白表达,PCR法检测Nrf2/HO-1 mRNA表达。结果依达拉奉促进血管内皮细胞的增殖,拮抗H_2O_2诱导血管内皮细胞增殖抑制作用。与对照组比较,依达拉奉组ROS无明显增高(P>0.05),Nrf2/HO-1蛋白和mRNA表达明显增高(P<0.05);而H_2O_2组ROS明显增高(P<0.05),Nrf2/HO-1蛋白和mRNA表达明显下降(P<0.05)。与H_2O_2组比较,依达拉奉+H_2O_2组和H_2O_2+NAC组ROS明显降低(P<0.05),Nrf2/HO-1蛋白和mRNA表达明显增高(P<0.05)。结论 H_2O_2下调血管内皮细胞Nrf2/HO-1表达,而依达拉奉通过清除细胞内ROS,拮抗H_2O_2下调细胞Nrf2/HO-1表达,从而抑制H_2O_2导致血管内皮细胞损伤。
- 黄慧芬郑丽云方世记邱伟文蔡学礼彭潇吴慧华
- 关键词：依达拉奉活性氧血管内皮细胞
- ^125I放射性粒子植入在肝动脉化疗栓塞序贯射频消融治疗包膜下肝癌的临床价值被引量：20
- 2018年
- 目的分析^125I放射性粒子植入联合肝动脉化疗栓塞(TACE)序贯射频消融(RFA)方案治疗包膜下肝癌结节的临床疗效及安全性。方法回顾分析2010年1月至2016年12月丽水市中心医院76例包膜下(肝包膜下<1cm)中晚期肝癌患者资料。男68例、女8例,年龄33~78(58±9)岁,肿瘤最大径3.1~12.0(5.7±2.3)cm,Child-Pugh A级28例,Child-Pugh B级48例,BCLC B期29例,C期47例。按照治疗方式分为两组,其中38例(TACE+RFA组)行TACE序贯RFA治疗,38例(^125I+TACE+RFA组)在TACE序贯RFA治疗后,行^125I放射性粒子植入术。分别计算中位生存时间及肿瘤无进展时间,评价两组患者的肿瘤控制有效率及不良反应。结果TACE+RFA组和^125I+TACE+RFA组患者肿瘤有效控制率分别为63.2%(24/38)和84.2%(32/38),(x^2=4.34,P=0.04);肿瘤无进展时间中位值为11和18个月(x^2=4.84,P=0.03),^125I+TACE+RFA组在6个月(94.7%±3.6%比81.3%±6.4%,Z=24.1>2.58,P=0.00)、1年(89.2%±5.1%比40.7%±8.3%,Z=13.3>2.58,P=0.00)、2年(55.9%±8.6%比29.6%±8.2%,Z=7.2>2.58.P=0.00)的累计肿瘤无进展率高于TACE+RFA组。^125I+TACE+RFA组和TACE+RFA组的生存时间中位值为42和30个月(x^2=4.76,P=0.029)。^125I+TACE+RFA组在1年(92.1%±4.4%比83.8%±6.1%,Z=23.5>2.58,P=0.00)、2年(75.8%.±7.0%比59.8%±8.4%,Z=12.43>2.58.P=0.00)、3年(59.0%±8.2%比41.7%±8.9%,Z=8.3>2.58,P=0.00)、5年(34.2%±8.2%比18.2%±8.1%,Z=5.5>2.58,P=0.00)的累计生存率高于TACE+RFA组。TACE+RFA组和^125I+TACE+RFA组术后肝功能、并发症差异无统计学意义。结论^125I放射性粒子植入能够提高TACE序贯RFA治疗中晚期包膜下肝癌的疗效,是一种有效的、安全的中晚期肝癌治疗方法。
- 方世记高瑞杰郑丽云赵中伟范晓希宋晶晶张登科吴发宗纪建松
- 关键词：碘同位素
- 丹酚酸A对大鼠脑缺血再灌注损伤后胞浆型磷脂酶A2表达的影响及机制研究被引量：5
- 2017年
- 目的探讨丹酚酸A对大鼠脑缺血再灌注损伤后胞浆型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,cPLA2)表达的影响及其机制。方法将SD大鼠65只,随机分为对照组,模型组、丹酚酸A组和联合组(LY294002+丹酚酸A)。分别于再灌注后0、8、24、48h取梗死脑组织,用TUNEL检测脑细胞凋亡,免疫组织化学检测cPLA2表达,Western blot检测蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt在脑组织表达水平。结果模型组和联合组0、8、24、48h海马CAl区TUNEL阳性细胞和cPLA2表达较对照组明显增高,脑组织磷酸化Akt表达较对照组明显降低(P<0.05)。丹酚酸A组0、8、24、48h脑组织磷酸化Akt表达较模型组明显增高,TUNEL阳性细胞和cPLA2表达较模型组明显降低[(10.1±5.3)个/mm^2 vs(12.8±4.7)个/mm^2、(14.6±6.2)个/mm^2 vs(30.1±7.5)个/mm^2、(19.7±6.5)个/mm^2 vs(73.8±11.4)个/mm^2、(22.8±9.6)个/mm^2 vs(94.6±15.2)个/mm^2,(13.6±3.1)个/mm^2 vs(41.3±3.6)个/mm^2、(14.8±4.7)个/mm^2 vs(62.5±6.9)个/mm^2、(16.6±7.1)个/mm^2 vs(72.3±9.6)个/mm^2、(17.0±5.3)个/mm^2 vs(83.2±11.7)个/mm^2,P<0.05]。结论丹酚酸A通过Akt信号通路,降低脑缺血再灌注后脑组织中cPLA2表达,减少脑细胞凋亡,发挥细胞保护作用。
- 彭潇郑丽云方世记邬至平蔡学礼黄良通
- 关键词：脑缺血再灌注损伤蛋白激酶类
- 伊曲康唑对前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响及其机制被引量：1
- 2016年
- 目的 探讨伊曲康唑对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响及其机制.方法 将前列腺癌PC-3细胞分为对照组、伊曲康唑组、伊曲康唑＋神经酰胺合成酶1（CerS1）-shRNA组（伊曲康唑＋CerS1-shRNA组）和伊曲康唑＋1-苯基-2-癸酰基氨基-3-吗啉代-1-丙醇（PDMP）组（伊曲康唑＋PDMP组）,运用噻唑蓝染色法检测PC-3细胞生长,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,高效液相色谱法检测细胞内神经酰胺含量,蛋白免疫印迹方法检测Bax、Bcl-2、cleaved-caspase3和Akt、mTORC1及其磷酸化的表达水平.结果 终浓度为0、5、10、20μmol/L伊曲康唑诱导细胞凋亡和神经酰胺含量增高,各浓度细胞凋亡率分别为3.23％±1.32％、5.87％ ±2.45％、23.22％±5.29％、48.57％±8.37％;其中10和20 μmol/L时与对照组比较,差异有统计学意义（均P＜0.05）.神经酰胺含量百分率分别为100％、109％±18％、156％±12％、197％ ±22％;其中10和20 μmol/L时与对照组比较,差异均有统计学意义（均P ＜0.05）.蛋白免疫印迹结果显示伊曲康唑组和伊曲康唑＋PDMP组Bax、cleaved-caspase 3的表达明显高于对照组,而Bcl-2表达明显少于对照组;伊曲康唑＋CerS1-shRNA组Bax、cleaved-caspase 3表达明显低于伊曲康唑组,而Bcl-2表达明显高于伊曲康唑组.5、10、20 μmol/L伊曲康唑处理的PC-3细胞p-Akt、p-mTORC1的表达明显低于对照组;伊曲康唑＋CerS-1-shRNA组p-Akt、p-mTORC1的表达明显高于伊曲康唑组.结论 伊曲康唑通过增加细胞内神经酰胺含量抑制PC-3细胞生长和诱导细胞凋亡,可能与神经酰胺增加caspase 3活化、Bax及降低Bcl-2表达和抑制Akt-mTORC信号通路有关.
- 赵中伟羊丽丽纪建松郑丽云方世记王均炉
- 关键词：伊曲康唑前列腺肿瘤神经酰胺类
