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骨肉瘤40例骨形态发生蛋白-2基因启动子区甲基化检测的临床意义被引量：2: 2016年; 目的检测骨形态发生蛋白-2(bone morpgenetic protein 2,BMP-2)基因启动子区甲基化水平,探讨其在骨肉瘤的发生发展过程中的临床意义。方法共收集骨组织标本60例,其中骨肉瘤组织40例,良性病变骨组织10例,正常骨组织10例。应用甲基化特异性PCR法检测60例样本中BMP-2基因甲基化水平。结果骨肉瘤组织中BMP-2基因甲基化水平均低于良性病变组织和正常骨组织,差异有统计学意义(P=0.004 3;P=0.003);而良性病变组织中BMP-2基因甲基化水平低于正常骨组织,但差异无统计学意义(P=0.136)。结论骨肉瘤中BMP-2基因甲基化水平低。选择BMP-2基因甲基转移酶的抑制剂促进高甲基化的抑癌基因的激活,可抑制骨肉瘤的发生发展。; 翁艳张韬陈冬冬周燕芸肖莉莉张怡元; 关键词：基因甲基化骨肉瘤骨形态发生蛋白

白花蛇舌草中多糖抑制骨肉瘤的作用机制被引量：4: 2016年; 为探讨白花蛇舌草(Hedyotis diffusa)活性成分对骨肉瘤的作用及其机制,对白花蛇舌草中分别提取的黄酮类、三萜酸类、香豆素类和多糖类化合物,用噻唑蓝(MTT)法检测不同提取物对MG-63细胞活性的影响;同时建立裸鼠骨肉瘤移植瘤模型,观察不同提取物对移植瘤生长的抑制作用;并通过流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化,蛋白质免疫印记(Western blot)检测Bax及Bcl-2蛋白表达水平.结果显示:4种提取物都对MG-63细胞的增殖具有明显抑制作用,并呈现明显的剂量依赖性,最优药物质量浓度为80μg/mL;在此质量浓度下4种提取物对裸鼠移植骨肉瘤均具有抑制作用,其中多糖类对MG-63细胞活性和移植瘤生长的抑制作用最强,明显促进MG-63细胞凋亡,阻滞细胞周期;Bax表达量在48h内随着白花蛇舌草多糖类提取物作用时间延长而增加,而Bcl-2表达量则降低.由上述结果可知,白花蛇舌草活性成分中多糖类的抗肿瘤活性最强,其作用机制可能是通过抑制骨肉瘤细胞增殖、促进细胞凋亡和阻滞细胞周期来达到抑瘤效果.; 张韬陈冬冬翁艳冯尔宥张怡元; 关键词：白花蛇舌草骨肉瘤凋亡

Sema4D介导的IRS-1信号通路在抑制成骨细胞分化中的作用机制研究被引量：2: 2016年; 目的通过siRNA干扰技术沉默轴突导向因子4D(Sema4D)基因,探讨Sema4D基因对成骨细胞分化的影响。方法采用RT-PCR、细胞免疫荧光法和Western blot测定Sema4D基因表达情况,分析沉默效率;采用ALP染色、VonKossa染色及ALP活性观测成骨细胞分化。结果 siRNA干扰技术下调了Sema4D的表达,成功构建了Sema4D基因沉默体系;Sema4DsiRNA中成骨细胞的分化明显增强,出现了一定程度的钙化。结论沉默Sema4D基因与成骨细胞的分化有关。; 张韬翁艳陈冬冬周燕芸肖莉莉张怡元; 关键词：成骨细胞分化

Noggin基因过表达重组腺病毒载体的构建及其对骨肿瘤细胞MG63迁移侵袭能力的影响被引量：2: 2017年; 目的:研究Noggin基因对骨肿瘤细胞MG63中Noggin,BMP-2,血管内皮生长因子(VEGF)及结缔组织生长因子(CTGF)的表达及细胞迁移侵袭的影响,探讨Noggin基因在骨肿瘤的发生和发展过程中的作用机制。方法:通过构建Noggin基因过表达重组腺病毒载体,并将其转染到骨肿瘤细胞MG63中,采用RT-PCR和Western blot分别检测空白对照组、过表达重组腺病毒组中Noggin,BMP-2,VEGF和CTGF的mRNA水平和蛋白水平,Transwell细胞迁移和侵袭能力实验考察两组细胞的迁移和侵袭能力。结果:成功构建Noggin基因过表达重组腺病毒载体,将其转染到骨肿瘤细胞MG63后,Noggin的mRNA及蛋白表达水平显著升高,BMP-2,VEGF及CTGF的mRNA及蛋白表达水平显著降低,转染Noggin基因过表达重组腺病毒的骨肿瘤细胞MG63迁移和侵袭的能力明显下降。结论:过表达Noggin基因能成功抑制骨肿瘤细胞MG63的侵袭和转移,有望成为骨肿瘤基因治疗的新方法。; 张韬翁艳陈冬冬周燕芸肖莉莉张怡元; 关键词：迁移

Sema4D基因沉默对骨髓间充质干细胞成骨及成脂肪分化相关基因表达的影响被引量：4: 2017年; 为了探讨Sema4D基因对绝经后骨质疏松患者骨髓间充质干细胞(BMMSCs)成骨及成脂肪分化能力的影响,设计3条Sema4D基因的siRNAs,分别通过显微观察和蛋白质免疫印迹(Western blot)鉴定其对BMMSCs生长形态以及对Sema4D蛋白表达的影响.进一步利用实时荧光定量PCR(real-time PCR)和Western blot检测Sema4D基因沉默对成骨指标抗碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)和成脂肪分化指标脂蛋白酶(LPL)、脂肪细胞结合蛋白2(AP-2)、瘦素(Leptin)表达的影响以及对骨保护素和可溶性细胞核因子-κB受体活化因子及配基(OPG/RANKL/RANK)系统的影响.结果显示Sema4D基因沉默后,绝经后骨质疏松患者BMMSCs中ALP、BGP、CollagenⅠ的表达水平明显升高,LPL、AP-2、Leptin的表达水平也明显升高;OPG的表达水平明显升高,而RANKL和RANK的表达水平明显下降.由上述结果可知,Sema4D基因可以抑制BMMSCs成骨分化和成脂肪分化相关基因的表达,可能通过下调OPG/RANKL/RANK系统相关基因的表达来实现.; 张韬陈冬冬翁艳冯尔宥张怡元; 关键词：基因沉默骨髓间充质干细胞

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陈冬冬