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基于UPLC-MS/MS分析法同时测定健脾解毒方6种活性成分含量被引量：1: 2016年; 目的建立同时测定健脾解毒方中原儿茶酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、芹菜素、异甘草素6种成分的UPLC-MS/MS分析方法,并对健脾解毒方中上述成分进行检测。方法采用液质联用方法,应用Poroshell 120 SB-Aq（50 mm×2.1 mm,1.7μm）色谱柱,流动相为0.1%甲酸的水溶液和0.1%乙腈溶液梯度洗脱,采用电喷雾电离源（ESI）,多反应离子监测（MRM）扫描方式进行检测。结果健脾解毒方中6种成分线性关系、精密度、稳定性、重复性均符合方法学测定要求,加样回收率为95.2%~102.6%。利用建立的方法测定了6批次健脾解毒方中原儿茶酸等6个成分含量。结论利用建立的方法同时测定健脾解毒方中6种成分的方法具有操作简单、重复性好、准确可靠,可为健脾解毒方质量控制提供依据。; 施利张绍钒毛丹黄建华刘新义张英进雷三林马进安向大雄胡春宏张四方; 关键词：健脾解毒方 UPLC-MS/MS

健脾解毒方对大肠癌细胞mTOR信号通路相关蛋白表达的影响被引量：1: 2016年; 目的探讨健脾解毒方对大肠癌细胞增殖的影响及可能作用机制。方法采用水提法制作健脾解毒方提取物,利用超高效液相-高分辨飞行时间质谱法分析健脾解毒方的主要成分,MTT法检测健脾解毒方对大肠癌细胞增殖的影响,Graphpad Prism5软件计算IC50值,流式细胞术检测细胞周期,Western Blot技术检测Phospho-m TOR、Phospho-P53和P21的蛋白表达。结果健脾解毒方能够抑制大肠癌细胞增殖,处理24、48、72 h后四种大肠癌细胞系的IC50值分别为HCT116(6.894、5.668、3.648 mg/m L)、Lo Vo(14.65、8.737、7.849 mg/m L)、SW48(8.029、7.026、5.740 mg/m L)及HT29(13.06、9.646、8.448 mg/mL);健脾解毒方使大肠癌细胞周期阻滞在G1期;并能够下调Phospho-mTOR蛋白表达(P<0.05),上调Phospho-P53和P21蛋白的表达(P<0.05),使大肠癌细胞周期阻滞在G1期。结论健脾解毒方可能通过m TOR-P53-P21途径抑制大肠癌细胞的增殖,这可能是健脾解毒方治疗大肠癌的作用机制之一。; 施利毛丹张绍钒黄建华刘新义张英进雷三林马进安向大雄胡春宏张四方; 关键词：健脾解毒方大肠癌半抑制浓度 TOR

健脾解毒方含药血清通过mTOR信号通路抑制人大肠癌SW48细胞增殖被引量：7: 2016年; 目的:研究健脾解毒方含药血清对人大肠癌SW48细胞增殖的影响及作用机制。方法:采用水提法制作健脾解毒方粗提取物,超高效液相-高分辨飞行时间质谱法分析健脾解毒方粗提取物的主要活性成分,利用血清药理学方法制备低、中、高浓度健脾解毒方含药血清,MTT法检测人结肠癌SW48细胞增殖活性,运用流式细胞术检测细胞周期,RT-PCR技术检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)m RNA表达,Western印迹技术检测磷酸化(phospho,P)-m TOR,P-P53和P21的蛋白表达。结果:通过高分辨质谱结合对照品数据相关分析,对健脾解毒方粗提取物中7个主要成分(毛蕊异黄酮苷、黄芪甲苷、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、甘草酸、芹菜素、白术内酯II)进行了鉴定及分析;健脾解毒方中、高剂量含药血清对SW48细胞有明显抑制增殖作用;健脾解毒方中、高剂量含药血清使SW48细胞周期阻滞在G1期;健脾解毒方含药血清能够下调的m TOR m RNA及P-m TOR蛋白表达,上调P-P53和P21蛋白的表达。结论:健脾解毒方可能通过m TOR-P53-P21途径抑制人结肠癌SW48细胞的增殖,这可能是健脾解毒方治疗结肠癌的作用机制之一。; 林丰夏雷三林马进安施利毛丹张邵钒黄建华刘新义丁登峰张英进张四方; 关键词：健脾解毒方大肠癌哺乳动物雷帕霉素靶蛋白细胞增殖

健脾解毒方联合化疗治疗大肠癌术后患者的临床观察被引量：15: 2016年; 目的观察健脾解毒方联合化疗治疗II-III期大肠癌术后患者的临床疗效及其对免疫功能的影响。方法将40例大肠癌患者按随机数字表法分为治疗组、对照组各20例。两组患者化疗均采用FOLFOX4化疗方案,治疗组加服健脾解毒方汤剂(每日1剂,连服8周),化疗每2周重复1次,1次为1个周期,连用4个周期后观察两组临床疗效及其免疫功能的变化。结果治疗结束后治疗组中医证候改善的总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者的中医证候总积分均较治疗前有所改善,两组间比较差异有统计学意义(P<0.01);治疗后治疗组在KPS评分疗效及体质量增加方面优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);在免疫学指标CD3+、CD4+、CD4+/CD8+值改善方面优于对照组,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。结论健脾解毒方能提高大肠癌化疗患者的临床疗效,改善生活质量,并增强机体免疫力。; 雷彩云毛丹丁陈陈施利张绍钒林丰夏黄建华刘新义马进安雷三林张英进张四方; 关键词：大肠癌健脾解毒方化疗免疫功能

健脾解毒方对大肠癌肿瘤血管形成相关基因表达的影响被引量：5: 2016年; 目的:探讨健脾解毒方对大肠癌肿瘤血管形成相关基因表达的影响。方法:采用水提法制作健脾解毒方粗提取物,MTT法检测健脾解毒方粗提取物对大肠癌HT29细胞增殖的影响,Graph Pad Prism 5软件计算IC50(50%inhibitory concentration)值,Affymetrix基因表达谱芯片检测健脾解毒方干预后有显著差异表达的基因并进行路径富集分析,基于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路利用IPA(Ingenuity Pathway Analysis)软件对肿瘤血管形成的相关差异表达基因进行生物信息学分析并构建网路关系图,Western印迹法验证肿瘤血管形成相关差异表达的关键基因的蛋白表达水平。结果:健脾解毒方粗提取物能够抑制大肠癌HT29细胞增殖,处理24,48及72 h后的IC50值分别为13.060,9.646及8.448 mg/m L。Affymetrix基因表达谱芯片检测健脾解毒方干预后显著上调的基因218个,显著下调的基因252个,主要为生物合成、新陈代谢、细胞凋亡、抗原提取、血管生成等相关基因,其中肿瘤血管形成相关差异表达基因12个。IPA软件分析结果显示健脾解毒方干预后可使大肠癌中的鞘磷脂磷酸二酯酶3(sphingomyelin phosphodiesterase 3,SMPD3),VEGF,血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA),整合数α亚基1(integrin subunit alpha 1,ITGA1),组织蛋白酶B(cathepsin B,CTSB),组织蛋白酶S(cathepsin S,CTSS)等基因下调,GRB2相关结合蛋白2(GRB2 associated binding protein 2,GAB2),PLAUR(plasminogen activator,urokinase receptor)等基因上调。Western印迹检测显示健脾解毒方能明显下调磷酸化mTOR(phospho-mTOR,P-mTOR),信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3),缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和VEGF蛋白表达,明显上调磷酸化P53(phospho-P53,P-P53)蛋白表达。结论:健脾解毒方可能通过影响mTOR-HIF-1α-VEGF信号通路抑制大肠癌肿瘤血管形成,; 毛丹雷三林马进安施利张绍钒黄建华刘新义丁登峰张英进冯磊张四方; 关键词：健脾解毒方大肠癌肿瘤血管形成哺乳动物雷帕霉素靶蛋白缺氧诱导因子1Α 血管内皮生长因子

中医治疗慢性肾衰竭用药规律探析被引量：20: 2015年; 目的基于文献分析,探讨中医治疗慢性肾衰竭的用药规律。方法通过数据库检索2004-2014年发表的有关中药治疗慢性肾衰竭的临床研究文献,运用频数分析、因子分析、聚类分析等方法分析相关方剂的药物组成、功能分类、治法等情况,进而探讨其中的用药规律。结果 1共纳入73篇文献,收集中药方剂73首,涉及药物131味,药物总频次784次。2因子分析及频数分析发现,最能体现本病证治特点的15味药物为大黄、黄芪、丹参、茯苓、白术、当归、淫羊藿、川芎、党参、半夏、土茯苓、山茱萸、枸杞、牛膝、杜仲。3治法频数统计发现,益气健脾、通腑降浊、活血化瘀、补益肝肾法应用最为广泛。4聚类分析发现有意义的两组药物组合,分别为大黄、黄芪、丹参(C1),当归、茯苓、白术(C2)。结论慢性肾衰竭临床常从虚、浊、瘀论治,治法以通腑降浊、扶正补益、活血化瘀、化湿解毒等为主,常用药物如大黄、黄芪、丹参、茯苓、白术等。; 林丰夏雷彩云丁陈陈施利张四方; 关键词：慢性肾衰竭中医药疗法用药规律

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施利

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