齐赟
- 作品数:6 被引量:5H指数:2
- 供职机构:北京大学人民医院更多>>
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- 非经典炎症小体通路在视网膜缺血再灌注损伤中的作用
- 齐赟白玉婧黎晓新
- 不同眼内灌注液对视网膜组织学及功能的影响被引量:3
- 2021年
- 目的比较不同眼内灌注液对视网膜组织学及功能的影响。方法取人角膜内皮细胞(HCEC)、人视网膜色素上皮(HRPE)细胞和大鼠视网膜神经节细胞(RGC),分为正常对照组、平衡盐灌洗液(BSS)组和复方电解质眼内灌注液(CEIIS)组,分别在含体积分数10%DMEM/F12培养基、BSS和CEIIS中培养12、24、48 h,采用细胞计数试剂盒8(CCK8)法测定培养细胞的增生A值;采用细胞免疫荧光染色法检测培养细胞中凋亡相关蛋白表达;采用流式细胞术测定细胞凋亡率和细胞周期;采用乳酸脱氢酶(LDH)和琥珀酸脱氢酶(SDH)定量检测试剂盒检测细胞线粒体损伤。选用新西兰大耳白兔15只,采用抽签法随机分为对照组3只、BSS组6只和CEIIS组6只,均取左眼行玻璃体切割术,术中根据分组方法分别采用不同的眼内灌注液。分别于术前和术后24 h采用闪光视网膜电图(ERG)测定术眼视网膜功能,采用光相干断层扫描(OCT)检测实验眼视网膜各层结构变化。收集各时间点术眼眼球,采用TUNEL染色法检测视网膜各层细胞的早期凋亡情况;采用免疫组织化学染色法检测视网膜组织中细胞色素C和bax蛋白表达情况;透射电子显微镜下观察实验眼视网膜超微结构变化。结果BSS组和CEIIS组3种培养细胞均有不同程度的损伤,随培养时间延长,细胞增生减少,凋亡细胞数量增加;与BSS组相比,CEIIS组培养细胞排列致密整齐,细胞形态和大小均一。BSS组HRPE细胞和RGC的细胞凋亡率分别为(37.157±6.918)%和(29.993±12.330)%,明显高于CEIIS组的(4.163±1.310)%和(6.337±1.903)%,差异均有统计学意义(P=0.003、0.045)。正常对照组、BSS组和CEIIS组间HCEC和HRPE细胞的G0/G1+S期比例总体比较,差异均无统计学意义(HCEC:F=2.226,P=0.189;HRPE:F=2.634,P=0.151);BSS组RGC的G2/M分裂阻滞期比例高于正常对照组和CEIIS组,差异均有统计学意义(P=0.047、0.024)。各培养时间点CEIIS组HCEC、HRPE细胞和RGC的增生A值�
- 朱莉苗恒胡钦瑞刘志明白玉婧虞有智傅亚飞夏会卡黄旅珍齐赟邓洵李岩黎晓新
- 关键词:玻璃体切割术灌注液细胞活性视网膜功能
- 玻璃膜疣的主要成分对视网膜色素上皮细胞的作用研究
- 目的:玻璃膜疣与AMD的进展密切相关。但是其作用机制并不清楚。Amyloid-β(Aβ)是玻璃膜疣的主要成分之一,本研究通过观察Aβ对视网膜色素上皮细胞(RPE)的作用,探讨玻璃膜疣在AMD中的作用机制。方法:体外培养人...
- 齐赟白玉婧黎晓新
- 文献传递
- 玻璃膜疣的主要成分对视网膜色素上皮细胞的作用研究
- 目的 玻璃膜疣的在AMD 早期形成,与AMD 的进展密切相关.但是其作用机制目前并不清楚.Amyloid-β(Aβ)是玻璃膜疣的主要成分之一,本研究通过观察Aβ 对视网膜色素上皮细胞(RPE)的作用,探讨玻璃膜疣在AMD...
- 齐赟白玉婧黎晓新
- 关键词:玻璃膜疣视网膜色素上皮NALP3
- 玻璃膜疣的主要成分对视网膜色素上皮细胞的作用研究
- 齐赟白玉婧黎晓新
- p75NTR受体过表达对人RPE细胞氧化应激损伤的促进作用被引量:2
- 2016年
- 背景脉络膜新生血管(CNV)是多种眼底疾病致盲的病理基础,视网膜色素上皮(RPE)细胞氧化应激损伤在CNV生成中具有重要作用。RPE氧化应激损伤能激活肿瘤坏死因子超家族的p75NTR受体,引起血管内皮细胞增生,但其调控机制尚未明确。
目的探讨RPE细胞中p75NTR受体在CNV形成过程中的作用,并对其作用机制进行分析。
方法体外培养人RPE细胞(ARPE19细胞系),用p75NTR受体过表达质粒转染RPE细胞,分别采用逆转录PCR(RT-PCR)和Western blot法进行转染细胞中p75NTR受体基因和蛋白水平检测,以未转染p75NTR受体过表达质粒的RPE细胞作为对照组。采用BrdU法检测各组细胞的增生活性;采用Annexin V-FITC/PI双染法及流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率;用H2DCFDA荧光法和流式细胞计数检测细胞内活性氧簇(ROS)阳性百分数;采用激光扫描共焦显微镜观察各组细胞线粒体标志物的表达(膜电位)及细胞色素C的表达;采用Western blot法检测和比较各组细胞中裂解caspase-3、Fas及血管内皮生长因子165(VEGF165)蛋白的相对表达水平。
结果p75NTR受体质粒转染组细胞中p75NTR受体的mRNA及蛋白表达量分别是对照组的(6.11±0.77)倍和(7.42±0.48)倍,差异均有统计学意义(t=11.49、23.17,均P〈0.01)。BrdU法检测结果显示,p75NTR受体质粒转染12、24、36和48 h组细胞的增生活性(A值)率分别为(93.12±0.56)%、(86.30±0.66)%、(72.53±0.86)%和(60.77±2.81)%,对照组为100%,随着p75NTR受体质粒转染时间的延长,RPE细胞活性值逐渐减低,细胞凋亡百分数明显增加,与对照组比较差异均有统计学意义(均P〈0.05)。p75NTR受体质粒转染组转染后48 h,RPE细胞内ROS相对荧光强度为对照组的2.4倍,差异有统计学意义(t=16.45,P〈0.01);对照组RPE细胞中线粒体标志物阳性细胞比例为100%,而p75NTR受
- 齐赟白玉婧黎晓新石璇
- 关键词:脉络膜新生血管