任守凤
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：温州医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 融合免疫佐剂Lipo多肽与包膜蛋白EDⅢ区的登革病毒四价疫苗的构建及免疫效应研究被引量：4
- 2016年
- 目的构建编码免疫佐剂Lipo多肽与登革病毒1-4型包膜蛋白EDIII区的重组甲病毒载体,并在小鼠体内研究其免疫效应,为研制新型的登革病毒四价疫苗奠定基础。方法先通过GS linker将编码免疫佐剂Lipo多肽的基因序列与编码登革病毒1-4型包膜蛋白EDIII区的基因序列进行串联获得LipoEDIII;然后将LipoEDIII基因插入甲病毒载体DREP的多克隆位点,构建重组甲病毒载体DREP-LipoEDIII;将DREP-LipoEDIII转染293细胞,Western blot检测融合蛋白的表达;随后将DREP-LipoEDIII免疫ICR小鼠,不加任何佐剂,再加强免疫2次后,通过ELISA检测血清中的抗体效价和细胞因子的分泌情况来评价其免疫效应。结果成功构建了含有"融合免疫佐剂Lipo多肽与包膜蛋白EDIII区"的重组甲病毒质粒DREP-LipoEDIII。DREP-LipoEDIII免疫小鼠后可以诱导产生特异性抗体,抗体效价为1∶160。抗原刺激小鼠脾淋巴细胞可以产生IFN-r、IL-4、IL-10细胞因子,实验组的浓度明显高于对照组。结论在不需要加入任何外源佐剂的情况下,本研究构建的融合免疫佐剂Lipo多肽的登革四价疫苗能够诱导小鼠产生特异性的体液和细胞免疫应答,且以细胞免疫应答为主,为今后新型登革病毒四价疫苗的研究奠定了基础。
- 任守凤曹国梅谭峰梁韶晖刘文权潘长旺
- 关键词：登革病毒包膜蛋白
- 融合Lipo多肽的登革病毒四价疫苗的构建及免疫效应研究
- 登革病毒(Dengue virus，DENV)感染引起的登革热是热带和亚热带国家和地区的重要公共卫生问题。DENV主要通过伊蚊（包括埃及伊蚊和白纹伊蚊）的叮咬进行传播。据WHO统计，全世界有超过36亿人生活在登革热流行区...
- 任守凤
- 关键词：登革病毒包膜蛋白免疫佐剂
- 文献传递
- 基于甲病毒复制子的埃博拉(EBOV)VLPs疫苗的构建和免疫机制研究
- 目的 构建基于甲病毒复制子的埃博拉(EBOV) VLPs疫苗并研究其免疫效应.方法 本研究利用甲病毒(Semliki Forest Virus,SFV)复制子载体DREP构建了含EBOV(Zaire型,2014年非洲流行...
- 刘文权任守凤曹国梅梁韶晖
- 关键词：埃博拉病毒疫苗
- 重组登革病毒1-4型包膜蛋白EDⅢ的融合表达和免疫学特性研究被引量：2
- 2016年
- 目的:构建含登革病毒(DENV)1-4型包膜蛋白(E蛋白)EDⅢ区的融合蛋白,并通过动物实验分析该融合蛋白的免疫机制。方法:通过生物信息学分析获得具有广泛代表性的DENV 1-4型EDⅢ区的氨基酸序列;将编码DENV 1-4型EDⅢ区的基因序列通过GS linker进行串联后插入原核表达载体p Cold Ⅱ的多克隆位点,并将构建的重组质粒p Cold Ⅲ-EDⅡ转化至大肠杆菌BL21(DE3);通过SDS-PAGE及Western blot法鉴定目的蛋白表达,采用镍柱亲和层析法纯化目的蛋白。将纯化的蛋白免疫BABL/c小鼠,初次免疫之后再加强免疫2次。通过ELⅢSA法检测血清中的抗体效价和细胞因子的分泌情况来评价其免疫效应。结果:重组蛋白EDⅢ免疫小鼠后可以诱导产生高滴度的特异性抗体,抗体效价为1:40 000。抗原刺激小鼠脾淋巴细胞可以诱导Th1和Th2细胞免疫应答。结论:成功表达了含DENV 1-4型E蛋白EDⅢ的融合蛋白,并通过动物实验证实该融合蛋白能诱导小鼠产生特异性的体液和细胞免疫应答,为DENV四价重组疫苗的研制奠定了基础。
- 任守凤刘文权曹国梅梁韶晖潘长旺
- 关键词：登革病毒包膜蛋白
