- TNF-α对HepG2细胞LXRα介导的胆固醇外流的影响及其分子机制被引量：6
- 2013年
- 目的:观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肝X受体α(LXRα)启动子活性及其下游ATP结合盒转运蛋白(ABCA1和ABCG1)表达的影响,从而探讨TNF-α加速HepG2细胞内胆固醇积聚的分子机制。方法:构建LXRα基因的启动子表达载体,观察炎症因子TNF-α对LXRα启动子活性的影响,进一步将HepG2细胞分为对照组(control)、TNF-α组(20μg/L)、高脂组(LDL,100 mg/L)及联合处理组(TNF-α20μg/L+LDL 100 mg/L)。采用实时定量PCR和Western blotting检测LXRfα、ABCA1和ABCG1的mRNA及蛋白的表达。[3H]标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。油红O染色和定量比色法分析细胞内胆固醇的含量。结果:成功构建LXRα启动子的萤火虫萤光素酶报告质粒,证明了该启动子有明显活性,TNF-α能明显抑制LXRα启动子的活性。进一步检测发现,和对照组相比,TNF-α下调了LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA与蛋白表达。高脂组胆固醇外流量增加,而TNF-α组胆固醇外流量明显降低。油红O染色显示,TNF-α使细胞内脂质染色明显增加。结论:TNF-α可通过抑制LXRα启动子活性从而抑制HepG2细胞内胆固醇外流导致肝细胞内脂质异常积聚。
- 仝莎陈曜赵蕾黄爱龙阮雄中陈压西
- 关键词：HEPG2细胞肿瘤坏死因子肝X受体Α胆固醇外流
- 在HepG2细胞与HMCs细胞中探讨炎症因子对肝X受体α启动子活性的影响
- 第一部分肝X受体α启动子虫萤光素酶质粒的构建 目的:本部分旨在构建人类肝X受体α启动子的虫荧光素酶重组质粒。 方法:以HepG2细胞DNA为模板扩增肝X受体α启动子序列，将扩增产物经限制性内切酶双酶切后与同样双酶切的...
- 仝莎
- 关键词：HEPG2细胞炎症因子
