陈曜
- 作品数：6 被引量：26H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学脂糖代谢性疾病重庆市重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 西罗莫司抑制脂肪酸摄取改善小鼠肝脏脂质积聚
- 2017年
- 目的:研究西罗莫司对小鼠肝脏脂质积聚的影响及机制初探。方法:6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠,随机分为3组:A组为普通饮食组(n=12),B组为高脂饮食组(n=9),C组为高脂饮食加隔天注射西罗莫司组(n=7),喂养14周。全自动生化分析仪检测血清生化指标。酶联免疫吸附法和酶偶联比色法分别检测肝脏游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)和甘油三酯(triglyceride,TG)的含量。Western blot检测脂肪酸转运酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)蛋白的表达水平。荧光显微镜观察原代肝细胞对荧光标记FFA的动态摄取。结果:与A组相比,B组小鼠体质量(q=6.68,P=0.000),血清TG(q=4.88,P=0.045),高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)(q=6.311,P=0.002),谷草转氨酶(aspirate aminotransferase,AST)(q=8.84,P=0.001)水平明显增高,肝脏组织TG(q=14.4,P=0.000),FFA(q=18.0,P=0.000)也明显增高。C组小鼠较B组体质量(q=7.99,P=0.000),血清TG(q=4.636,P=0.050),AST(q=5.16,P=0.016)及肝脏TG(q=8.91,P=0.000)和FFA(q=14.1,P=0.000)都显著降低。Western blot结果显示C组小鼠肝脏CD36的蛋白表达水平较B组明显降低。FFA动态摄取实验通过定量荧光强度显示西罗莫司能明显抑制肝细胞对FFA的摄取速度(各时间点P均<0.05)。结论:西罗莫司能抑制肝细胞对外源性FFA的摄取,减轻肝脏脂质积聚,其作用机制可能与CD36相关。
- 谭伟陈曜王川阮雄中陈压西杨萍
- 关键词：西罗莫司脂肪酸
- TNF-α对HepG2细胞LXRα介导的胆固醇外流的影响及其分子机制被引量：5
- 2013年
- 目的:观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肝X受体α(LXRα)启动子活性及其下游ATP结合盒转运蛋白(ABCA1和ABCG1)表达的影响,从而探讨TNF-α加速HepG2细胞内胆固醇积聚的分子机制。方法:构建LXRα基因的启动子表达载体,观察炎症因子TNF-α对LXRα启动子活性的影响,进一步将HepG2细胞分为对照组(control)、TNF-α组(20μg/L)、高脂组(LDL,100 mg/L)及联合处理组(TNF-α20μg/L+LDL 100 mg/L)。采用实时定量PCR和Western blotting检测LXRfα、ABCA1和ABCG1的mRNA及蛋白的表达。[3H]标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。油红O染色和定量比色法分析细胞内胆固醇的含量。结果:成功构建LXRα启动子的萤火虫萤光素酶报告质粒,证明了该启动子有明显活性,TNF-α能明显抑制LXRα启动子的活性。进一步检测发现,和对照组相比,TNF-α下调了LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA与蛋白表达。高脂组胆固醇外流量增加,而TNF-α组胆固醇外流量明显降低。油红O染色显示,TNF-α使细胞内脂质染色明显增加。结论:TNF-α可通过抑制LXRα启动子活性从而抑制HepG2细胞内胆固醇外流导致肝细胞内脂质异常积聚。
- 仝莎陈曜赵蕾黄爱龙阮雄中陈压西
- 关键词：HEPG2细胞肿瘤坏死因子肝X受体Α胆固醇外流
- 糖尿病大鼠脉络膜病变超微结构的研究被引量：9
- 2005年
- 周希瑗乔岗陈曜马华锋江文珊阴正勤
- 关键词：糖尿病大鼠吲哚青绿血管造影视网膜脉络膜病变超微结构改变不同病程
- hALR抑制ConA诱导淋巴细胞增殖作用的分子机制研究
- 第一部分运用基因芯片技术研究haLR的免疫调控作用的分子机制
目的：肝再生增强因子(Augmenter of liver regeneration，ALR)是一种非特异性、具有热稳定性、不同于以往已知的促肝细胞...
- 陈曜
- 关键词：肝再生增强因子蛋白质纯化淋巴细胞增殖报告基因肝癌细胞株
- 沉默胆固醇调节原件结合蛋白2基因对炎症因子所致HepG2细胞内胆固醇异常积聚的影响被引量：4
- 2012年
- 目的探讨沉默胆固醇调节原件结合蛋白（SREBP）2对炎症因子所致HepG2细胞内脂质异常积聚的影响。方法通过脂质体转染SREBP2-shRNA质粒、G418抗性筛选HepG2细胞，建立沉默SREBP2的HepG2稳定细胞株（SREBP2 shRNA-HepG2）及阴性对照质粒HepG2稳定细胞株（NC shRNA—HepG2）。对两种细胞分别给予无血清培养处理（对照组）、炎症因子[肿瘤坏死因子（TNF）α 20ng／ml]、高脂[低密度脂蛋白（LDL）100μg／ml]和联合干预（20ng／ml TNFα＋100μg／ml LDL）处理。油红O染色及酶法检测细胞中脂质积聚情况，实时定量PCR和Western blot分别检测SREBP2及其下游靶基因低密度脂蛋白受体（LDLr）和3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A（HMGCoA）还原酶的基因和蛋白表迭隋况。对数据用单因素方差分析及2×2×2析因设计方差分析比较。结果成功建立阴性对照稳定细胞株NC shRNA—HepG2及抑制SREBP2表达的稳定细胞株sREBP2 shRNA—HepG2。在NC shRNA—HepG2细胞中，TNFα处理使细胞内胆固醇积聚增加，并能上调SREBP2下游靶基因LDLr、HMGCoA还原酶基因和蛋白的表达，其mRNA相对表达量分别为1．68±0．03、1．31±0．05，F值分别为107．42，59．08，P值均〈0．01；其蛋白相对表达量分别为1．49±0．10、1．54±0．06，F值分别为46．24，247．10，P值均〈0．01。而在SREBP2 shRNA—HepG2细胞中，TNFα对胞内胆固醇沉积的作用可以被明显减弱，进一步基因和蛋白检测结果显示，炎症因子TNFα对LDLr、HMGCoA还原酶的上调作用亦被明显抑制。结论炎症因子通过促进SREBP2及其下游靶基因表达致HepG2细胞内胆固醇异常积聚，而通过RNA干扰抑制SREBP2的表达，可以明显减轻炎症因子所致的细胞内胆固醇的异常积聚。
- 廖梭蕾赵蕾陈曜李青陈昱杨阮雄中陈压西
- 关键词：脂肪肝胆固醇肿瘤坏死因子
- 炎症干扰PPARγ-LXRα-ABCA1途径介导的肾小球系膜细胞胆固醇外流被引量：7
- 2010年
- 目的:观察炎症能否干扰过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)-肝X受体α(LXRα)-三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)途径介导的人肾小球系膜细胞(HMCs)的胆固醇外流。方法:将HMCs分为4组:对照组、高脂组[细胞给予100 mg/L低密度脂蛋白(LDL)处理]、炎症组[细胞给予20μg/L肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理]、联合干预组(细胞给予20μg/L TNF-α+100 mg/L LDL处理)。采用实时定量PCR和W esternb lotting方法检测PPARγ、LXRα和ABCA1的mRNA及蛋白表达水平。用[3H]标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。用油红O染色法及化学酶促-比色法观察HMCs中脂质积聚情况。结果:与对照组相比,高脂组PPARγ、LXRα和ABCA1 mRNA及蛋白的表达明显增加,单纯的炎症刺激可下调它们的表达,而联合干预组中上述各基因和蛋白表达量比高脂组明显下降。胆固醇外流测定结果显示:与对照组相比,高脂组胆固醇外流量增加,而炎症组胆固醇外流量降低,联合干预组比高脂组胆固醇外流量明显减少。油红O染色提示联合干预组细胞内脂质积聚明显高于其余3组。细胞内胆固醇含量测定亦显示炎症能进一步加重胞内脂质积聚。结论:炎症因子可通过抑制PPARγ-LXRα-ABCA1表达导致HMCs胆固醇外流减少,加重细胞内脂质积聚。
- 陈昱杨陈曜赵蕾李青阮雄中陈压西
- 关键词：炎症三磷酸腺苷结合盒转运体A1人肾小球系膜细胞胆固醇外流
