韩敏敏
- 作品数：9 被引量：27H指数：3
- 供职机构：安徽农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金国家级星火计划安徽省长三角科技联合攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 宠物犬及犬粮源沙门氏菌的耐药性分析及PFGE分型被引量：10
- 2017年
- 为了解宠物犬和犬粮源沙门氏菌的耐药表型特征与耐药基因分布,以及不同分离菌株之间的同源性,本研究采用K-B法测定27株分离菌的药物敏感性、PCR检测耐药基因、脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行基因分型。结果显示,27株沙门氏菌分离株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、链霉素、复方新诺明、强力霉素耐药率在29.63%~22.22%,33.33%分离菌对3种及3种以上抗生素耐药,其中阿莫西林/克拉维酸-氨苄西林-复方新诺明-强力霉素所占比率最大,为66.67%(6/9);74.07%分离菌至少含有1种耐药基因,以str A-B、bla PSE、tet B、sul1检出率最高,分别为40.7%、37.0%、29.6%、25.9%,四环素类、氯霉素类、磺胺类、β-内酰胺类耐药基因与耐药表型符合率较高,分别为100%、100%、87.5%、72.7%;27株分离菌形成12种PFGE基因型,优势型别为pt1和pt7型。本研究结果表明宠物犬和犬粮源沙门氏菌呈现多重耐药,耐药表型与其相对应的耐药基因间存在密切的相关性;PFGE基因型呈多态性,而其与血清型之间不呈相关性,但与多重耐药菌株(耐>8)间存在一定程度的关联性。
- 陈传荣周妮妮韩敏敏魏建忠孙裴李郁
- 关键词：沙门氏菌耐药表型PFGE
- 腹泻仔猪源致病性大肠杆菌生物膜、耐药性、毒力的分析
- 目的：探讨腹泻仔猪源致病性大肠杆菌生物膜形成能力及其与耐药性、毒力之间的相关性.
方法：收集临床分离鉴定的129株致病性大肠杆菌,采用96孔微量板法、K-B法、微量稀释法、寇氏改良法分别测定体外生物膜形成能力、...
- 陈传荣韩敏敏张乃嘉王婉冰姚焱彬肖珊李郁
- 关键词：腹泻仔猪生物膜耐药性毒力测定
- 文献传递
- 鼠伤寒沙门氏菌hilD基因缺失株的免疫效果评价
- 2021年
- 为探究鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)hilD基因缺失株的免疫效果,本研究利用鼠伤寒沙门氏菌亲本株S.T(pcDNA3.1)、hilD基因缺失株S.T(ΔhilD+pcDNA3.1)和回补株S.T(ΔhilD+pcDNA3.1-hilD)免疫小鼠,通过比较小鼠的血清Ig G抗体效价、血清抑菌能力、白细胞吞噬细菌能力、CD4^(+)/CD3^(+)与CD8^(+)/CD3^(+)比率、相关细胞因子(IL-4,IL-10,IFN-γ,TNF-β,MCP-1)水平、脾淋巴细胞增殖指数SI和肠粘膜s Ig A抗体水平等指标,以评价S.T(ΔhilD+pcDNA3.1)的免疫效果。结果显示,与S.T(pcDNA3.1)和S.T(ΔhilD+pcDNA3.1-hilD)相比,S.T(ΔhilD+pcDNA3.1)免疫小鼠后,除白细胞吞噬细菌能力、CD4^(+)/CD3^(+)与CD8^(+)/CD3^(+)比率优于S.T(pcDNA3.1)与S.T(ΔhilD+pcDNA3.1-hilD)外,血清IgG抗体效价、血清抑菌能力、相关细胞因子水平(IL-4,IL-10,IFN-γ,TNF-β,MCP-1)、脾淋巴细胞增殖指数SI及肠粘膜s Ig A抗体水平均显著优于S.T(pcDNA3.1)与S.T(ΔhilD+pcDNA3.1-hilD);小鼠经二次免疫后攻毒,S.T(ΔhilD+pcDNA3.1)对鼠伤寒沙门氏菌提供的免疫保护率可达100%,且小鼠各脏器损伤程度最低;对肠炎沙门氏菌提供的交叉免疫保护率也达到60%。结果表明S.T(ΔhilD+pcDNA3.1)免疫小鼠后能诱导产生良好的体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫,在攻毒后能提供良好的免疫保护力及交叉免疫保护力。
- 张丽唐正露韩敏敏罗聪玉曹堃魏建忠李郁
- 关键词：鼠伤寒沙门氏菌免疫效果昆明小鼠
- 肠炎沙门氏菌ssrAB、hilA、hilD基因缺失菌株的构建及其生物学特性被引量：3
- 2021年
- 【背景】沙门氏菌(Salmonella)是重要的人畜共患病原菌,由于耐药菌株的不断出现,新型防治方法的研究迫在眉睫。【目的】探究ssrAB、hilA、hilD基因对肠炎沙门氏菌致病作用的影响,筛选安全可靠的沙门氏菌减毒活疫苗或载体用菌株。【方法】采用自杀性质粒介导的同源重组技术,分别构建ssrAB、hilA、hilD单基因缺失株(ΔssrAB、ΔhilA、ΔhilD)、双基因缺失株(ΔssrABhilA、ΔssrABhilD、ΔhilAhilD)和三基因缺失株(ΔssrABhilAhilD),并比较上述缺失菌株与亲本菌株间生物学特性的差异。【结果】基因缺失后菌株的生长速率无显著变化(P>0.05);除ΔhilD生物膜形成能力最强外,其他基因缺失菌株生物膜形成能力变化不显著(P>0.05);ΔssrABhilAhilD和ΔssrABhilA的LD50值最高,ΔssrAB、ΔhilA、ΔhilD次之;亲本菌株引起的小鼠十二指肠的病变程度较所有缺失菌株明显严重;在所有缺失菌株中,ΔssrABhilAhilD对HeLa细胞的黏附力最低,ΔhilD在小鼠体内的定殖率最高;而机体分泌IL-1、IL-18、IFN-γ的能力与沙门氏菌ssrAB、hilA、hilD基因无显著相关性(P>0.05)。【结论】构建的7株基因缺失株中,ΔssrAB、ΔhilA、ΔhilD、ΔssrABhilA和ΔssrABhilAhilD有致病力低、生长速率良好、能有效刺激细胞因子产生等特性,具备作为沙门氏菌减毒活疫苗或载体的潜质。
- 唐正露曹堃张丽韩敏敏罗聪玉李郁
- 关键词：肠炎沙门氏菌生物学特性
- 腹泻仔猪源致病性大肠杆菌生物膜与耐药性及毒力的相关性被引量：14
- 2016年
- 【目的】探讨腹泻仔猪源致病性大肠杆菌生物膜形成能力及其与耐药性、毒力之间的相关性。【方法】收集临床分离鉴定的129株致病性大肠杆菌,采用96孔微量板法、K-B法、微量稀释法、寇氏改良法分别测定体外生物膜形成能力、耐药表型、生物膜菌与浮游菌的最小抑菌浓度(MIC)、对小鼠的半数致死量(LD_(50))。【结果】129株致病性大肠杆菌生物膜阳性率为96.1%,以弱阳性(1+)为主;分离株对四环素、氨苄青霉素、阿莫西林的耐药率分别为92.2%、92.2%、93%,对亚胺培南的耐药率最低为1.6%,共呈现94种多重耐药谱,其中以阿莫西林-氨苄青霉素-四环素-强力霉素-复方新诺明-甲氧苄啶构成比最大,为86.0%,且其与环丙沙星、氟苯尼考、左氧氟沙星、诺氧沙星、头孢拉定及头孢哌酮的耐药性有相关性(P<0.05),环丙沙星和氟苯尼考对生物膜形成菌的MIC较对应浮游菌分别提高2-16倍和8-16倍;生物膜形成能力3+的菌株LD_(50)最大。【结论】腹泻仔猪源致病性大肠杆菌普遍具有生物膜形成能力,呈现多重耐药,生物膜形成菌对环丙沙星及氟苯尼考的耐药性与生物膜形成能力呈正相关,但随着生物膜形成能力的增强,LD_(50)值则相应增大。
- 陈传荣韩敏敏张乃嘉王婉冰姚焱彬肖珊李郁
- 关键词：致病性大肠杆菌生物膜耐药性半数致死量
- 基于GFP观察鼠伤寒沙门氏菌HilD介导ssrAB表达的初探
- 2018年
- 目的以绿色荧光蛋白(GFP)标记的鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium,S.Typhi)为研究对象,秀丽隐杆线虫为模式生物,初步探究体内环境下HilD对ssrAB表达的调控作用。方法通过基因工程技术分别构建携带gfp基因的亲本株S.Typhi(ssrAB-gfp+pcDNA3.1)、hilD基因缺失株S.Typhi(ΔhilD+ssrAB-gfp+pcDNA3.1)和hilD基因回补株S.Typhi(ΔhilD+ssrAB-gfp+pcDNA3.1-hilD)标记菌。利用荧光显微技术,观察3株标记菌在饲喂感染秀丽隐杆线虫体内外的GFP表达状况及其定殖分布,并通过ImegJ软件进行荧光强度的比较。结果成功构建的3株标记菌在秀丽隐杆线虫体内外均呈现绿色荧光,荧光强度为S.Typhi(ssrAB-gfp+pcDNA3.1)高于S.Typhi(ΔhilD+ssrAB-gfp+pcDNA3.1-hilD)和S.Typhi(ΔhilD+ssr AB-gfp+pcDNA3.1),S.Typhi(ΔhilD+ssrAB-gfp+pcDNA3.1-hilD)高于S.Typhi(ΔhilD+ssrAB-gfp+pcDNA3.1);3株标记菌在线虫体内主要定殖分布于口咽部和肠道中,荧光强度为口咽部较肠道高。结论GFP在鼠伤寒沙门氏菌中得到稳定表达,感染秀丽隐杆线虫后同样获得GFP的稳定表达,且在线虫的口咽部和肠道具有良好的定殖分布,首次初步证明体内环境下HilD介导ssrAB表达,但并非为单一的调控作用。
- 韩敏敏张丽周妮妮陈传荣曹堃李郁
- 关键词：鼠伤寒沙门氏菌GFP秀丽隐杆线虫
- 腹泻仔猪源沙门氏菌生物膜与耐药性及毒力的相关性
- <正>引言沙门氏菌是引起仔猪腹泻的主要细菌性病原之一,可加重腹泻的严重程度,增加腹泻仔猪的死亡率。临床上长期乱用或滥用抗生素,以及动物饲料中抗生素添加剂的使用,导致沙门氏菌耐药性的产生且日趋加重、临床用药效果不明显。细菌...
- 韩敏敏罗聪玉周妮妮李郁
- 文献传递
- 肠炎沙门氏菌基因工程减毒株的免疫效果及安全性评价
- 2021年
- 【背景】相较于灭活疫苗和弱毒疫苗,沙门氏菌(Salmonella)基因工程减毒活疫苗具有的优越性逐渐显现,研究也不断深入。【目的】探究肠炎沙门氏菌G9菌株的4株基因缺失株G9(ΔhilA)、G9(ΔhilD)、G9(ΔssrABhilA)和G9(ΔssrABhilAhilD)的免疫效果及生物安全性。【方法】以肠炎沙门氏菌基因缺失菌株G9(ΔhilA)、G9(ΔhilD)、G9(ΔssrABhilA)、G9(ΔssrABhilAhilD)及其亲本菌株G9的最佳免疫剂量接种小鼠后,利用间接ELISA法、流式细胞术、MTT法、小鼠攻毒试验及倾注平板法等对各缺失株的免疫效果和安全性进行评价。【结果】G9(ΔhilD)诱导血清IgG抗体效价最高,G9(ΔhilD)和G9(ΔssrABhilAhilD)产生肠黏膜IgA抗体效价最高,4株缺失菌诱导IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-β、MCP-1细胞因子的能力与亲本株G9差异不显著(P>0.05),产生的CD4^(+)/CD3^(+)、CD8^(+)/CD3^(+)T细胞比率呈上升趋势,而且G9(ΔssrABhilA)和G9(ΔssrABhilAhilD)最高;G9(ΔssrABhilAhilD)诱发的脾淋巴细胞增殖指数最高;免疫小鼠后4株缺失株对G9攻毒提供的保护率为80%−100%,而且小鼠肝脏、脾脏及小肠绒毛无明显病理变化,对鼠伤寒沙门氏菌攻毒提供的保护率为50%−80%;接种后12 d,小鼠肝脏、脾脏及小肠中定殖的菌株能基本清除,而且在体外能连续稳定传代30代。【结论】G9(ΔhilA)、G9(ΔhilD)、G9(ΔssrABhilA)和G9(ΔssrABhilAhilD)对小鼠的免疫效果和生物安全性均良好,有成为肠炎沙门氏菌基因工程减毒活疫苗的可能。
- 唐正露韩敏敏曹堃李亮李郁
- 关键词：肠炎沙门氏菌免疫原性免疫保护力生物安全性
- 肠炎沙门菌基因工程减毒株对小鼠的免疫效果
- [目的]沙门菌(Salmonella)具有极其广泛的动物宿主,是一种重要的人兽共患病原菌。随着多重耐药沙门菌不断出现,疫苗接种免疫预防沙门菌病成为理想选择。沙门菌基因工程减毒活疫苗较灭活疫苗和亚单位疫苗更能有效激发宿主的...
- 唐正露韩敏敏张丽韩雪姣曹堃李郁
- 文献传递
