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张翼
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
国家工程研究中心
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
张晓娜
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佘晓东
中国医学科学院北京协和医学院皮...
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2008
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阴道念珠菌病患者阴道分泌物总RNA提取方法的研究
被引量:3
2008年
目的探索一种简单有效的人体阴道分泌物标本总RNA提取方法并验证其可行性。方法采用人体上皮细胞与念珠菌标准菌株的混合物(10^6:10^6),对匀浆、玻璃珠和液氮研磨三种破壁方法,纯化柱、酚两种提取方法组合产生的5种不同RNA提取方法进行比较:并将提取效果最好的方法应用于临床标本。结果5种方法均可提取出总RNA,其中,热酚法提取质量浓度最高,达到0.6546g/L,其次为RNeasy试剂盒提取方法为0.6010g/L.玻璃珠法为0.2678g/L,匀浆后TRlzol法为0.2284g/L,液氮研磨后TRlzol法为0.2115g/L。但电泳结果显示,以液氮研磨后TRlzol提取质量最好,而且标准菌株及培养细胞混合物两种细胞成分RNA均被提取,RT—PCR以及荧光定量PCR验证结果显示,该方法可以应朋于临床标本RNA提取,结论液氮研磨后TRlzol法是一种简单而有效的阴道分泌物临床标本RNA提取方法,而且提取物可以满足常规下游实验的需求。
佘晓东
韩峻松
吕雪莲
张晓娜
占萍
张翼
刘维达
关键词:
念珠菌病
外阴阴道
黏液
RNA提取
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