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抗SARS-CoV-2 N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1: 2022年; 目的制备针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAbs)并鉴定其生物学特性。方法利用大肠杆菌原核表达重组SARS-CoV-2 N蛋白,通过杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经重组蛋白免疫的BALB/c小鼠的脾细胞进行融合,采用间接ELISA法和有限稀释法筛选出阳性杂交瘤细胞株,并鉴定其亚型,腹水法制备mAbs,Protein G亲和柱纯化后通过SDS-PAGE、间接ELISA和Western blot检测其纯度、效价及特异性。结果获得5株能稳定分泌抗SARS-CoV-2 N蛋白mAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为N1~5。通过腹水法制备获得5个mAbs,亚型鉴定结果显示1个为IgG2a*κ型、4个为IgG1*κ型,其效价均达到2×10^(4)以上。Western blot结果表明5个mAbs都能与重组SARS-CoV-2 N蛋白结合。结论通过杂交瘤技术成功制备了5个能特异性识别重组SARS-CoV-2 N蛋白的mAbs,为开发免疫诊断试剂奠定了基础。; 刘江丽李盈盈王佳雯许喻鈞张艳黄江涛黄江涛曾柱; 关键词：核衣壳蛋白单克隆抗体免疫学检测

白介素10对人成熟树突状细胞蛋白表达的影响被引量：2: 2019年; 利用人外周血淋巴细胞分离液密度梯度离心分离CD14^+的单核细胞,并通过IL-4、GM-CSF、LPS、IFN-γ等重组细胞因子在体外将其诱导为成熟树突状细胞(mature dendritic cells,mDCs),利用10 ng/mL白介素10(interleukin-10,IL-10)处理mDCs 4 h,双向电泳联合MALDI-TOF/TOF MS技术分析差异表达蛋白。结果显示共筛选出35个差异蛋白点,其中21个上调,14个下调,它们的功能主要涉及糖代谢、HIF信号转导通路、细胞骨架和免疫功能等。因此,IL-10可能通过调控mDCs的代谢过程以及细胞骨架或运动能力等相关蛋白来影响其生物学功能,为进一步深入研究IL-10对mDCs的影响具有潜在作用。; 黄江涛赵雪赵雪王赟刘丽娜王赟曾柱; 关键词：白介素10 树突状细胞双向电泳差异表达蛋白

黄曲霉细胞壁蛋白AFLMP1的基因克隆与原核表达被引量：2: 2016年; 根据NCBI数据库中的黄曲霉细胞壁蛋白AFLMP1的基因序列设计特异引物,以黄曲霉菌总RNA逆转录获得的c DNA为模板,PCR扩增目的基因后分别克隆到p GEX-6p-1和p ET-22b原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。重组大肠杆菌经IPTG诱导表达后超声波破碎提取可溶性蛋白,SDS-PAGE电泳和Western杂交检测表达产物,结果表明GST-AFLMP1和AFLMP1-His融合蛋白能够在大肠杆菌中大量可溶性表达,可分别作为制备AFLMP1特异抗体的免疫抗原和筛选抗原。; 周静赵雪夏雪王赟蒙富雪黄江涛郭婷曾柱胡祖权; 关键词：黄曲霉细胞壁蛋白基因克隆可溶性表达

白介素10对成熟树突状细胞蛋白质表达谱的影响: 背景:树突状细胞(Dendritic cells, DCs)作为体内最强大的抗原呈递细胞,在固有免疫应答和适应性免疫应答中均占有重要地位。以DCs为基础的肿瘤疫苗由于肿瘤微环境的影响在临床上的疗效不尽人意,因而如何解除D...; 黄江涛赵雪刘江丽胡祖权刘丽娜曾柱; 关键词：IL-10 蛋白质组免疫学功能; 文献传递

能量耗竭诱导红细胞锚蛋白外翻触发巨噬细胞对红细胞的黏附: 2019年; 该研究的目的是探讨能量耗竭能否诱使红细胞锚蛋白外翻,且巨噬细胞能否黏附锚蛋白外翻的红细胞。在能量耗竭孵育后,该研究分别检测了红细胞锚蛋白外翻水平、胞内ATP浓度、胞内钙离子水平、胞内蛋白激酶C的激活和巨噬细胞对红细胞的黏附数。结果表明,红细胞经能量耗竭孵育后,胞内ATP水平孵育2 h后显著减少,6 h后ATP基本被耗尽;能量耗竭和胞外钙离子的共同孵育,促使红细胞胞内蛋白激酶C的激活以及红细胞锚蛋白外翻;锚蛋白外翻的红细胞能够被巨噬细胞黏附,且整合素αvβ3明显抑制了巨噬细胞对红细胞的黏附。结果分析表明,能量耗竭和胞外钙离子的共同孵育促使红细胞锚蛋白的外翻,这可能是在能量耗竭情况下红细胞被巨噬细胞清除的一个潜在机制,从而为研究能量代谢异常红细胞的清除提供潜在的分子基理。; 王玉林隆耀航叶远浓周厚明陈晋黄江涛唐福州; 关键词：红细胞程序性死亡

原核表达抗伏马菌素单链抗体的条件优化被引量：9: 2015年; 单链抗体可溶性大量表达是其生产应用的前提条件,本研究通过基因工程操作构建含有抗伏马菌素单链抗体基因H3的重组载体p HENHi-H3,转化大肠杆菌XL1-Blue,酶联免疫吸附实验检测不同的诱导温度、IPTG浓度和诱导时间对H3抗体的表达影响。优化后的单链抗体H3的原核表达条件为:菌液培养至OD600达到0.5时加入终浓度为0.1 mmol/L IPTG,30℃诱导表达8 h。本研究通过对蛋白原核表达的主要影响因素进行优化,能够显著提高H3抗体的原核可溶性表达效率。; 王赟夏雪黄江涛黄顺莉吴仪胡祖权; 关键词：单链抗体原核表达酶联免疫吸附实验

蛋白激酶C诱导红细胞锚蛋白外翻促使红细胞力学性能变化的研究: 目的探索蛋白激酶C诱导红细胞锚蛋白外翻能否促使红细胞力学性能的变化。方法首先,不同浓度的PMA孵育红细胞,流式检测PMA对红细胞锚蛋白外翻的影响;其次,检测PMA诱导红细胞膜蛋白的磷酸化、胞内钙离子的流入对红细胞锚...; 唐福州黄江涛赵雪刘江丽胡祖权王赟刘丽娜曾柱; 文献传递

亚硒酸钠对HepG2细胞脂质和葡萄糖代谢相关基因表达的影响: 2021年; 硒是人和动物必需的微量元素,不同浓度的硒可以调节猪、羔羊、小鼠、人和酵母中与脂质和葡萄糖代谢相关基因的表达水平,但是目前尚不清楚低剂量硒对HepG2细胞脂质和葡萄糖代谢相关基因的影响。因此,我们通过实时荧光定量PCR和基因组学分析,研究了亚硒酸钠对HepG2细胞中脂质和葡萄糖代谢相关基因表达水平的影响。结果表明,脂质代谢相关基因FAR1,DGKD和HILPDA在24 h和36 h时表达增加,葡萄糖代谢相关基因UGDH,IRS-2和PEPCK在24 h和36 h时表达增加。与对照组相比,0.1μmol/L亚硒酸钠处理HepG2细胞24 h可以增加TRAP1,HILPDA和PEPCK的表达水平,它们在肿瘤发生发展中起着重要的作用。此外,转录组学分析表明,亚硒酸钠可以改变代谢调控网络,包括萜类骨架的生物合成、胰岛素抵抗、磷酸肌醇代谢和细胞周期途径等。以上结果表明,0.1μmol/L亚硒酸钠可能会影响HepG2细胞的脂质和葡萄糖代谢,影响肿瘤的发生发展。; 张亮亮易婉婷黄江涛代杰曾柱贾义; 关键词：亚硒酸钠脂质代谢葡萄糖代谢 HEPG2细胞

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黄江涛