王赟
- 作品数：39 被引量：87H指数：6
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵阳市科学技术计划项目贵州省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 原核表达抗伏马菌素单链抗体的条件优化被引量：9
- 2015年
- 单链抗体可溶性大量表达是其生产应用的前提条件,本研究通过基因工程操作构建含有抗伏马菌素单链抗体基因H3的重组载体p HENHi-H3,转化大肠杆菌XL1-Blue,酶联免疫吸附实验检测不同的诱导温度、IPTG浓度和诱导时间对H3抗体的表达影响。优化后的单链抗体H3的原核表达条件为:菌液培养至OD600达到0.5时加入终浓度为0.1 mmol/L IPTG,30℃诱导表达8 h。本研究通过对蛋白原核表达的主要影响因素进行优化,能够显著提高H3抗体的原核可溶性表达效率。
- 王赟夏雪黄江涛黄顺莉吴仪胡祖权
- 关键词：单链抗体原核表达酶联免疫吸附实验
- 美洲大蠊i型溶菌酶基因的克隆及其功能预测被引量：4
- 2012年
- 溶菌酶是昆虫先天性免疫系统的重要组成成分。以冈比亚按蚊i型溶菌酶氨基酸序列为种子序列,在美洲大蠊EST库中查找相似序列。通过RT-PCR和RACE PCR技术,克隆获得美洲大蠊i型溶菌酶基因。生物信息学分析表明,所克隆的溶菌酶基因片段长度为525bp,包括5'非编码区12bp,3'非编码区18bp和完整的开放阅读框495bp,其编码164个氨基酸,包括溶菌酶成熟肽137个氨基酸和27个信号肽氨基酸。经同源比对,它与黑腹果蝇和冈比亚按蚊的i型溶菌酶具有同源性,并且具备了异构肽活性的功能位点H,但缺失了抑菌活性的功能位点E/D/S,这为其功能和分子进化研究提供了重要的基础。
- 王赟龙高群张春林田茂
- 关键词：美洲大蠊溶菌酶抑菌活性
- 美洲大蠊3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及表达被引量：1
- 2012年
- 旨在通过5'-RACE获得美洲大蠊3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因的全长cDNA序列,进行生物信息学分析,构建原核表达载体,诱导重组蛋白表达,为进一步研究其功能奠定基础。通过3'-RACE技术,PCR扩增获取编码美洲大蠊GAPDH蛋白的全长cDNA序列;采用生物信息学方法推导出该序列编码的氨基酸序列及其理化性质;预测信号肽、蛋白疏水性、可溶性、跨膜区结构、二级结构、三级结构,并构建系统发育树;构建原核表达载体pET28a-GAPDH,IPTG诱导重组蛋白表达,并用His-tag抗体Western blotting验证。结果显示,美洲大蠊GAPDH基因,其完整阅读框含999个碱基,编码332个氨基酸。序列分析显示,该蛋白与家蚕GAPDH相似性为89%,具有GAPDH保守功能域,经IPTG诱导获得重组蛋白。
- 龙高群王赟张春林
- 关键词：美洲大蠊3-磷酸甘油醛脱氢酶克隆原核表达
- 胃癌中免疫细胞浸润模式及其临床意义被引量：6
- 2018年
- 目的:研究胃癌中免疫细胞的浸润模式,探究浸润的免疫细胞与肿瘤预后的关系。方法:对375个非转移性胃癌患者肿瘤样本的基因表达数据进行计算分析,通过CIBERSORT软件计算22种免疫细胞类型的比例,用Cox回归模型评估肿瘤中浸润性免疫细胞与总生存期(OS)之间的关系。结果:375例胃癌患者肿瘤组织中巨噬细胞(31. 9%)、未活化的CD4+记忆性T细胞(16. 5%)、CD8 T细胞(13. 5%)、调节性T细胞(6. 8%)比较丰富,随着胃癌患者肿瘤分期的增加,γδT细胞和M2巨噬细胞的比例逐渐上升,而活化的自然杀伤细胞和M0巨噬细胞的比例逐渐降低;较高水平的滤泡辅助性T细胞与胃癌患者较长的OS相关,而较高比例的M2巨噬细胞、单核细胞和未活化的树突状细胞与较差OS相关。结论:肿瘤中浸润性免疫细胞的组成在胃癌各个分期中存在较大的差异,浸润性免疫细胞可以作为肿瘤独立的预后因子。
- 欧阳燕张世超贾义胡祖权胡祖权周静王赟唐福州曾柱
- 关键词：胃癌免疫细胞肿瘤浸润预后免疫治疗
- 钛表面纳米拓扑结构对未成熟树突状细胞免疫功能的调控作用
- 2021年
- 目的研究钛表面纳米拓扑结构对未成熟树突状细胞(immature dendritic cells,imDCs)免疫功能的调控,有利于理解钛表面改性对植入后免疫微环境的影响。方法采用电化学阳极氧化法在钛表面构建TiO_(2)纳米拓扑结构。分析纳米拓扑结构对imDCs的免疫功能(抗原吞噬能力、表面成熟相关分子的表达及炎性细胞因子的分泌)。
- 王赟王赟唐开义董美玲龚敏余鹏龚敏陈晋曾柱
- 关键词：未成熟树突状细胞免疫微环境免疫功能钛表面炎性细胞因子表面改性
- 白介素10对人成熟树突状细胞蛋白表达的影响被引量：2
- 2019年
- 利用人外周血淋巴细胞分离液密度梯度离心分离CD14^+的单核细胞,并通过IL-4、GM-CSF、LPS、IFN-γ等重组细胞因子在体外将其诱导为成熟树突状细胞(mature dendritic cells,mDCs),利用10 ng/mL白介素10(interleukin-10,IL-10)处理mDCs 4 h,双向电泳联合MALDI-TOF/TOF MS技术分析差异表达蛋白。结果显示共筛选出35个差异蛋白点,其中21个上调,14个下调,它们的功能主要涉及糖代谢、HIF信号转导通路、细胞骨架和免疫功能等。因此,IL-10可能通过调控mDCs的代谢过程以及细胞骨架或运动能力等相关蛋白来影响其生物学功能,为进一步深入研究IL-10对mDCs的影响具有潜在作用。
- 黄江涛赵雪赵雪王赟刘丽娜王赟曾柱
- 关键词：白介素10树突状细胞双向电泳差异表达蛋白
- 眼蚤属(Ophthalmopsylla)两蚤种的rDNA ITS2序列研究被引量：1
- 2011年
- 目的:研究伏河眼蚤异常亚种Ophthalmopsylla volgensis extrema(Ioffet Scalon,1953)和长突眼蚤Oph-thalmopsylla kiritschenkoi(Wagner,1930)rDNA ITS2序列,为蚤类分子系统发育的研究提供基础资料。方法:PCR扩增两蚤种rDNA ITS2片段并测序,比较两者差异。结果:伏河眼蚤异常亚种rDNA ITS2序列长372 bp,长突眼蚤长380 bp;两蚤种间共有30处碱基不同,包括16处缺失/插入、4处转换、10处颠换,种内无差异。结论:rDNA ITS2序列可用作两蚤种鉴别的分子标记。
- 王赟漆一鸣
- 黄曲霉细胞壁蛋白AFLMP1的基因克隆与原核表达被引量：2
- 2016年
- 根据NCBI数据库中的黄曲霉细胞壁蛋白AFLMP1的基因序列设计特异引物,以黄曲霉菌总RNA逆转录获得的c DNA为模板,PCR扩增目的基因后分别克隆到p GEX-6p-1和p ET-22b原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。重组大肠杆菌经IPTG诱导表达后超声波破碎提取可溶性蛋白,SDS-PAGE电泳和Western杂交检测表达产物,结果表明GST-AFLMP1和AFLMP1-His融合蛋白能够在大肠杆菌中大量可溶性表达,可分别作为制备AFLMP1特异抗体的免疫抗原和筛选抗原。
- 周静赵雪夏雪王赟蒙富雪黄江涛郭婷曾柱胡祖权
- 关键词：黄曲霉细胞壁蛋白基因克隆可溶性表达
- 竹荪提取液对砷中毒小鼠免疫功能的保护作用被引量：9
- 2008年
- 目的:探讨竹荪提取液对As2O3引起小鼠免疫毒性的防护作用。方法:建立As2O3急性砷中毒模型小鼠,研究竹荪提取液对小鼠体重、脏器系数、总补体溶血活性(CH50)、淋巴细胞增殖、巨噬细胞吞噬功能的影响。结果:与正常对照组相比,砷中毒组小鼠体重、脏器指数无明显改变;CH50、淋巴细胞增殖、巨噬细胞吞噬率及吞噬指数明显降低,差异有显著性(P<0.05或P<0.01);与砷中毒组相比,竹荪治疗低剂量组小鼠体重、脏器指数、CH50、淋巴细胞增殖、巨噬细胞吞噬率及吞噬指数无明显改变化;竹荪治疗高剂量组除小鼠体重、脏器指数无明显改变外,CH50、淋巴细胞增殖、巨噬细胞吞噬率及吞噬指数明显升高,差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:竹荪提取液对AsO引起的砷中毒小鼠的免疫毒性有一定的保护作用。
- 王赟罗鹏张爱华张开菊吴海
- 关键词：竹荪砷中毒体重淋巴细胞巨噬细胞
- 川芎嗪调节Bcl-2促进帕金森病小鼠多巴胺神经元存活被引量：5
- 2013年
- 目的探讨川芎嗪对PD小鼠多巴胺神经元的保护作用。方法 30只健康雄性C57BL/6小鼠,随机分为正常对照组、模型组和治疗组。模型组和治疗组给予腹腔注射百草枯和代森锰建立PD模型,建模成功后,治疗组给予川芎嗪腹腔注射2 w,正常对照组给予同剂量生理盐水。观察3组小鼠行为学的改变、并用免疫组织化学、Western印迹法检测中脑多巴胺神经元数量、形态参数及Bcl-2的表达。结果模型组与治疗组比较,爬杆时间明显延长,中脑多巴胺神经元数量显著减少、Bcl-2的表达显著增高。结论川芎嗪治疗可上调Bcl-2的表达,增加黑质TH阳性神经元数量,有明显的神经保护作用。
- 文敏周波王赟王文静李宏伟焦玲张春林何宇红
- 关键词：帕金森病川芎嗪百草枯代森锰BCL-2
