赵斐
- 作品数:4 被引量:1H指数:1
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 可雾化吸入的抗流感病毒感染的siRNA及其应用
- 本发明公开了可雾化吸入的抗流感病毒感染的siRNA及其应用。该siRNA是名称为siPB2‑1、siPB2‑2、siPB1‑2或siNS‑1的双链RNA分子;siPB2‑1的一条链序列为序列表中SEQ ID No.1;s...
- 张永欣赵斐王臻岑山
- 文献传递
- 以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒的构建
- 2016年
- 目的构建以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒用于药物作用机制的快速鉴别。方法通过使用分泌型荧光素酶(Gluc)序列替代流感病毒HA基因,并利用表达质粒反式提供HA蛋白,借助甲型流感病毒WSN反向遗传学产毒系统,构建带有报告系统的单轮感染流感病毒。结果首轮接种单轮感染流感病毒的细胞上清中可以检测到Gluc信号,但检测不到病毒滴度,而在第二轮感染的细胞上清中检测不到Gluc信号,表明该单轮感染病毒在感染过程中能够分泌Gluc蛋白并且不能产生具有感染性的子代病毒颗粒。通过对复制动力学和时相的观察,明确了单轮感染病毒的生活周期,同时结合4种已知作用机制的抗流感药物的阻断实验结果,证明该系统可以用来快速、有效地鉴别药物的作用机制。结论成功构建了以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒,该系统可以用于抗病毒药物作用机制的快速鉴别。
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- 关键词:流感病毒A型
- 新型siRNA抗流感病毒活性的研究被引量:1
- 2017年
- 目的设计合成具有广谱性抗流感病毒活性的siRNA,分别在细胞内和小鼠体内进行活性评价。方法从甲型流感病毒毒株A/WSN/33的基因(PB2、PB1、PA、M、NS)中提取高度保守的序列设计合成siRNA。通过293T-Gluc系统和单轮感染流感病毒系统对siRNA进行活性筛选。然后在细胞水平检测siRNA对流感病毒复制的抑制作用,并且经雾化给药途径对siRNA的体内抗流感活性进行评价。结果活性筛选得到4条具有50%以上抑制活性的siRNA(siPB2-1、siPB2-2、siPB1-2和siNS-1),EC50值在0.4~1.3 nmol/L之间。4条siRNA对另外两株A/PR/8/34和B/Beijinghaidian/1386/2013(Victoria系)流感病毒均表现出较好的抑制活性。动物实验表明,siPB2-1经雾化给药途径可以对流感病毒感染的小鼠产生一定的保护作用。结论新合成的siRNA在细胞水平和小鼠体内均具有良好的抗流感病毒活性。
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- 关键词:动物实验
- 可雾化吸入的抗流感病毒感染的siRNA及其应用
- 本发明公开了可雾化吸入的抗流感病毒感染的siRNA及其应用。该siRNA是名称为siPB2‑1、siPB2‑2、siPB1‑2或siNS‑1的双链RNA分子;siPB2‑1的一条链序列为序列表中SEQ ID No.1;s...
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