张云
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乳酸清除率联合降钙素原清除率对脓毒症休克患者预后的回顾性研究被引量：5
- 2016年
- 目的:回顾性研究乳酸清除率联合降钙素原清除率在脓毒症休克患者预后中的作用。方法:2015年1月至2015年12月中山大学孙逸仙纪念医院ICU收治的78例脓毒症休克患者,包括存活组54例、死亡组24例。记录患者临床特征、入ICU时液体复苏开始前的乳酸值(Lac_0)和降钙素原值(PCT_0)、入ICU第1个24小时内液体复苏完成后的乳酸值(Lac_(24))和降钙素原值(PCT_(24)),并计算乳酸清除率和降钙素原清除率,通过受试者工作特征曲线(ROC)分析各指标的预测效度。结果:乳酸清除率组和降钙素原清除率组两者联合,在预测脓毒症休克患者28 d全因病死率时,可以达到非常高的AUC值(0.911)。结论:乳酸清除率联合降钙素原清除率对脓毒症休克患者预后的预测价值最佳。
- 梁炼张云
- 关键词：脓毒症休克乳酸清除率预后
- miR-505通过靶向核因子-κB调控脂多糖诱导的巨噬细胞活性研究
- 2023年
- 目的:探讨究微小RNA 505(miR-505)通过靶向调控核因子-κB(NF-κB)对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)活性的影响。方法:通过生物信息学方法预测miR-505和NF-κB潜在的结合位点,扩增NF-κB基因的3’端非编码区,同时对结合位点进行突变,将野生型(WT)及突变型(MUT)序列克隆至pSicheck2载体中,进行双荧光素酶报告实验。利用Liposome 3000将miR-505 mimics及inhibitor转染至RAW264.7细胞中,逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot实验检测miR-505、NF-κB的表达。用脂多糖(LPS)及miR-505共处理RAW264.7细胞,采用CCK-8实验检测细胞的活力,ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的表达。结果:双荧光素酶结果表明miR-505可与NF-κB的3’UTR端结合,且miR-505与NF-κB的表达呈负相关。CCK8结果提示miR-505可抑制LPS对RAW264.7细胞的毒性作用;ELISA结果表明miR-505可抑制LPS作用下炎症因子TNF-α和IL-6的分泌。结论:miR-505可通过靶向作用NF-κB基因以抑制TNF-α和IL-6的分泌,并降低LPS对RAW264.7细胞的损伤。
- 凌丽王钰莹曹其莉薄世兴张宗敏张云
- 关键词：核因子-ΚB巨噬细胞脂多糖
- COL4A3基因3'UTR双荧光素酶报告基因载体构建及其与miR-299靶向关系验证
- 2019年
- 目的探讨双荧光素酶报告基因载体构建并鉴定微小RNA-299(miR-299)与Ⅳ型胶原α3链(COL4A3)基因的靶标关系,为miR-299调控COL4A3基因影响干细胞成软骨分化研究奠定基础.方法2018年3月至2018年12月,利用生物信息学方法预测miR-299与COL4A3-3'UTR区(3'端非翻译区)的潜在结合位点,并通过PCR法扩增COL4A3-3'UTR野生和突变序列,将其克隆至psiCHECK-2质粒中构建相应载体,载体鉴定采用酶切法和基因测序法.细胞复苏、扩增并转染,转染分4组,每组3孔,分别为:①COL4A3-WT加miR-299/NC.②COL4A3-WT加miR-299-inhibitor/NC-inhibitor.③COL4A3-MUT加miR-299/NC.④COL4A3-MUT加miR-299-inhibitor/NC-inhibitor;采用双荧光素酶检测试剂盒测定各组荧光素酶活性并行t检验比较组间差异,P<0.05为差异有统计学意义.结果酶切及DNA测序结果显示psiCHECK-2-COL4A3双荧光素酶报告基因载体构建成功.Luciferase检测显示:野生型COL4A3基因组间比较,miR-299转染组(R/F均值为59.38%)较NC组(R/F均值为100%)荧光素酶活性下降,组间差异有统计学意义(P<0.05);野生型COL4A3基因加inhibitor后组间比较,miR-299-inhibitor组(R/F均值为153.98%)较NC-inhibitor组(R/F均值为100%)荧光素酶活性上升,组间差异有统计学意义(P<0.05);突变型COL4A3基因组及突变型组加入inhibitor后组间比较,miR-299转染组(R/F均值为102.09%)及miR-299-inhibitor组(R/F均值为108.51%)较对应NC组(R/F均值为104.70%)及NC-inhibitor组(R/F均值为105.13%)比较,荧光素酶活性差异均无统计学意义(P>0.05).结论COL4A3基因3'UTR双荧光素酶报告基因载体构建成功,并通过双荧光素酶实验进一步验证了miR-299直接作用于靶基因COL4A3-3'UTR区域的真实性.
- 令狐熙涛黄帅罗永祥张云陈佳瑜万雪刘毅瓦庆德
- 关键词：微小RNA软骨分化
