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何夏燕
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1
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成都医学院检验医学院
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王颖
成都医学院检验医学院
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2016
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不同方法对苦瓜核糖体失活蛋白的PEG化学修饰后蛋白浓度测定的差异
2016年
目的探究PEG化学修饰对4种常用蛋白浓度测定方法的影响。方法采用福林-酚试剂法(Lowry法)、二喹啉甲酸法(BCA法)、考马斯亮蓝法(Bradford法)和紫外分光光度法(UV法)分别测定样品中α-苦瓜素和抗人类免疫缺陷病毒植物蛋白MAP30经PEG修饰前、后的蛋白含量;并用Lowry法和BCA法对低浓度游离PEG修饰前、后的样品蛋白含量进行测定。结果发现考马斯亮蓝不与样品发生颜色反应,PEG修饰后会使UV法测定值变大,Lowry法测定值略有变大,BCA法基本不受影响;低浓度的游离PEG对测定方法无影响,但高浓度的PEG会吸附Folin-酚,形成黄色絮状物。结论 PEG化学修饰对蛋白浓度测定方法影响最小的为BCA法,Lowry法最灵敏,Bradford法不适用;而PEG化学修饰会使UV法测定值增大20%~30%,可作为快速测定时的校准参考。
李丹
肖雪
钟春燕
王颖
何夏燕
王复林
金家贵
孟尧
关键词:
核糖体失活蛋白
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