吴永梅
- 作品数:5 被引量:4H指数:1
- 供职机构:成都医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金四川省应用基础研究计划项目四川省教育厅重点项目更多>>
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- 微小染色体维持蛋白5在斑马鱼脑发育中的作用及机制研究
- 2022年
- 目的观察微小染色体维持蛋白5(mcm5)在斑马鱼脑发育中的作用及机制。方法将90枚斑马鱼胚胎分为3组:对照组[CONT组,注射无意义的吗啉基寡核苷酸(MO)]、mcm5 MO组(注射mcm5特异的MO)和mcm5 MO+mcm5mRNA组(同时注射mcm5特异的MO和mcm5 mRNA),每组30枚,观察mcm5 MO组和CONT组脑部发育情况,并用mcm5 mRNA援救敲降造成的发育缺陷;利用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术分析mcm5 MO组和CONT组之间蛋白质组的变化;采用PH3抗体染色和荧光定量PCR(qPCR)检测斑马鱼脑部增殖细胞的变化以及增殖相关基因的表达量。结果与CONT组相比,mcm5 MO组表现出脑部变小的特征,其中眼睛、中脑和后脑脑室变小较明显。iTRAQ实验结果显示,Hippo信号通路中14-3-3蛋白表达量增加。PH3抗体染色结果表明,mcm5 MO组增殖细胞明显减少,增殖相关基因cycline、cdk2、cdc25b的表达量明显降低。结论mcm5通过Hippo信号通路调节斑马鱼脑部细胞的增殖,影响斑马鱼头部发育。
- 吴永梅黄四洲黄四洲
- 关键词:微小染色体维持蛋白5脑发育增殖斑马鱼
- MCM5在后脑面部运动神经元发育中的作用及调控机制的初步研究
- 目的微小染色体维持蛋白(MCM5,minichromosome maintenance proteins5)是微小染色体维持蛋白家族中的一员,在DNA的复制起始和延伸中扮演着重要的角色。MCM5表达量远大于细胞周期中DN...
- 吴永梅
- 关键词:微小染色体维持蛋白MCM5胚胎发育
- 文献传递
- 应用mycalolide B初步建立斑马鱼帕金森病模型被引量:1
- 2018年
- 目的应用mycalolide B(MB)建立斑马鱼帕金森病(Parkison’s disease,PD)模型,观察斑马鱼行为学、形态学及多巴胺神经元的变化并进行系统评价。方法同亲代斑马鱼单次产卵200~300枚,简单随机化分为7组:对照组(0.2%DMSO)、MB10组(10μg/L MB)、MB20组(20μg/L MB)、MB40组(40μg/L MB)、MB80组(80μg/L MB)、MB160组(160μg/L MB)、1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)组(200μmol/L MPTP),每组30枚胚胎,于浓度梯度下培养;统计存活率,分析行为学变化,利用激光共聚焦显微镜观察多巴胺神经元生长情况,并与MPTP组进行比较分析。结果 MB效应浓度33.4~50.3μg/L时,成斑马鱼出现发育迟缓、脊椎畸形、心包水肿、平衡失态、震颤等;运动速率降低明显(P<0.05);Vmat2-GFP标记的阳性细胞减少(P<0.01);synuclein蛋白沉积(P<0.05)。结论建立斑马鱼PD模型的MB效应浓度为33.4~50.3μg/L;MB诱导的斑马鱼PD模型与MPTP模型相比,行为学、多巴胺神经元数量减少方面相似,且较不产生synuclein的MPTP模型更具模式学意义。
- 段凌晗吴永梅李淑蓉苏炳银
- 关键词:6-四氢吡啶帕金森病斑马鱼
- 不同浓度的二甲基亚砜对斑马鱼胚胎及其多巴胺能神经元发育的影响被引量:3
- 2019年
- 目的研究不同浓度的二甲基亚砜(dimethylsulfoxide, DMSO)对斑马鱼胚胎、多巴胺能(dopaminergic,DA)神经元发育的影响。方法收集同亲代Tg(Vmat2:GFP)斑马鱼产下的胚胎,简单随机分为10组:空白对照组,0.1%、0.3%、0.5%、0.8%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%DMSO(体积比)组。于浓度梯度下培养,统计存活率、畸形率、孵化率;分析行为学变化;利用激光共聚焦显微镜观察DA神经元的发育,PH3抗体检测细胞增殖及TUNEL试剂盒检测细胞凋亡。结果 DMSO浓度为2.5%时,斑马鱼存活率明显降低(P<0.01);DMSO浓度为2.0%时,斑马鱼畸形率明显升高(P<0.01)、孵化率明显降低(P<0.05);DMSO浓度为2.5%时,斑马鱼胚胎尾部摆动次数明显减少(P<0.05)。DMSO浓度为0.5%时间脑DA神经元明显减少(P<0.05);DMSO大于0.3%时,间脑细胞增殖明显减少(P<0.01);DMSO浓度≥0.8%时间脑细胞凋亡增加。结论 DMSO会引起斑马鱼胚胎发育障碍,其神经毒性造成间脑DA神经元丢失及细胞增殖的减少。
- 甘津凡吴永梅李淑蓉苏炳银
- 关键词:斑马鱼多巴胺能神经元
- bFGF/EGF和反式维甲酸在神经发生过程中的协同作用
- <正>神经干细胞是新生神经元的重要来源,对于脑损伤及相关疾病中神经元的修复以及神经网络的重建具有重要意义。已有研究表明,许多营养因子或趋化因子可协同调节神经干细胞的神经发生,但是碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生...
- 赵海霞左璇吴永梅李淑蓉苏炳银
- 文献传递