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小干扰RNA介导丝氨酸蛋白酶HtrA1沉默对光损伤人视网膜色素上皮细胞的影响被引量：1: 2016年; 目的观察丝氨酸蛋白酶HtrA1沉默对光损伤人视网膜色素上皮（RPE）细胞的影响。方法体外培养人RPE细胞，取第8～12代生长良好的传代细胞用于实验。将细胞分为正常对照组、光损伤模型组。采用波长400 nm的蓝色节能灯以（2000±500） Lux持续光照RPE细胞6 h建立光损伤模型。建模后光损伤模型组再分为针对HtrA1的小干扰RNA（HtrA1 siRNA）组、阴性对照组、空白对照组。应用脂质体RNAimax将HtrA1 siRNA转染至HtrA1 siRNA组细胞；阴性对照组细胞转染非特异的阴性siRNA；空白对照组为单纯光损伤细胞。采用细胞计数试剂盒、transwell小室法及流式细胞仪检测各组细胞增生、迁徙、凋亡以及细胞周期情况；实时聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法检测细胞中HtrA1和血管内皮生长因子A（VEGF-A）mRNA、蛋白质表达。结果光损伤模型组细胞中HtrA1 mRNA、蛋白表达均较正常对照组细胞明显升高，差异有统计学意义（t=17.62、15.09，P＜0.05）。与阴性对照组、空白对照组比较，HtrA1 siRNA组细胞增生（t=6.37、4.52）、迁徙能力（t=9.56、12.13）、凋亡率（t=23.37、29.08）明显下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；细胞停留在G0/G1期数目增多（t=6.24、4.93），差异有统计学意义（P＜0.05）；HtrA1、VEGF-A mRNA（t=17.36、11.32、7.29、4.05）和蛋白（t=12.02、15.28、4.98、6.24）表达均明显降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论特异性沉默HtrA1基因表达可降低蓝光对人RPE细胞增生、迁徙能力的损伤和细胞凋亡率；下调VEGF-A的表达。; 余天邢怡桥陈长征; 关键词：血管内皮生长因子A

视网膜母细胞瘤相关基因研究进展被引量：5: 2017年; 视网膜母细胞瘤（RB）是婴幼儿常见的眼内恶性肿瘤，严重危害患儿的视力、眼球，甚至生命。RB起源于视网膜胚胎发育阶段，其发生和发展与人类第1个分离克隆的抑癌基因RB1密切相关。RB12个等位基因的失活是RB发生和发展的基础。近年来，随着分子生物以及基因工程技术的迅猛发展，RB相关基因研究取得了一定进展。研究发现，RB的发生和发展除了存在RB1基因突变外，还存在许多染色体层面的改变，癌基因MYCN、鼠双微体4（MDM4，又称MDMX）、驱动蛋白家族成员14（K1F14）、DEK、毖丹，以及抑癌基因钙粘连素11（CDH11）等也在RB的发生和发展中发挥驱动作用。现就RB相关基因的研究进展进行综述，从DNA分子水平认识RB的发生和发展规律，为基因治疗RB以及临床医师制定治疗方案提供科学依据。; 余天陈长征邢怡桥; 关键词：视网膜母细胞瘤 RB1 MYCN 基因

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余天

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