高晶
- 作品数:4 被引量:3H指数:1
- 供职机构:湖南师范大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 斑马鱼HFHG45基因影响心脏发育的研究
- HFHG45 基因是我们实验室鉴定的一个心脏发育候选基因,目前尚未见任何功能研究的报道.我们通过整胚原位杂交技术鉴定了HFHG45 基因在胚胎发育中的时空表达谱:该基因在1 细胞就有表达,受精后24 hpf 表达于原始的...
- 陈婷芳屈永贵王飞英吴静于泽阳高晶王跃群邓云吴秀山
- 关键词:斑马鱼心脏发育
- 斑马鱼BSC14基因影响心血管发育的研究
- BSC14基因是我们实验室鉴定的一个心脏发育候选基因,目前尚未见任何功能研究的报道。我们通过整胚原位杂交技术鉴定了BSC14基因在胚胎发育中的时空表达谱:该基因在1细胞就有表达,受精后24 hpf表达于原始的心管,随着心...
- 陈婷芳邓云屈永贵王飞英吴静高晶于泽阳吴秀山王跃群
- 文献传递
- TCF25干扰慢病毒载体的构建与鉴定被引量:2
- 2016年
- 为构建一个针对TCF25(transcription factor 25)基因的慢病毒干扰载体,设计并合成3组针对TCF25的短发夹RNA序列(shRNA),通过基因重组技术连入p LL3.7载体,酶切鉴定及DNA测序后,重组正确的p LL3.7质粒与病毒包装质粒共转染293FT细胞,培养48 h后,分别收集细胞培养上清液,感染H9C2细胞,Western-blot检测TCF25在H9C2细胞中的表达.结果显示TCF25蛋白在H9C2细胞中的表达被抑制.这说明TCF25的慢病毒干扰载体构建成功.
- 李佑锋彭浩高建芳高晶陈宇吴秀山李永青
- 关键词:H9C2细胞慢病毒载体
- 针对Fbxl5基因关键结构域F-box的Crispr/Cas9打靶有效性分析被引量:1
- 2016年
- 为了在动物体内研究Fbxl5基因是通过什么机制导致斑马鱼心脏出现突变表型,本文利用近几年兴起的CRISPR/Cas9打靶技术建立斑马鱼Fbxl5基因敲除品系。本文将打靶位点定位于Fbxl5的F-box结构域,也就是Fbxl5的第五号外显子上。首先经过基因打靶网站分析筛选出针对Fbxl5基因F-box结构域最适合的打靶位点,扩增出Fbxl5基因CRISPR/Cas9打靶双链DNA,并转录为RNA,与Hcas9共注射至斑马鱼胚胎。最后,在注射48 h后对Fbxl5基因CRISPR/Cas9打靶的有效性进行检测。首先在注射48 h之后收集胚胎提取基因组DNA,用特异性引物进行PCR扩增;将纯化后的Fbxl5基因PCR产物连接到p MD18-T载体,再经质粒提取,测序分析,通过与WT斑马鱼基因组序列进行比对发现Fbxl5-9号在PAM序列AGG下游缺失了4个碱基。证明该CRISPR/Cas9系统在敲除心脏发育候选基因Fbxl5是有效的,该研究为最终获得Fbxl5基因敲除斑马鱼奠定了良好的基础。
- 高晶邓云陈宇高建芳傅雪珂尹丽阳万永奇吴秀山李永青
- 关键词:基因敲除