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跨膜蛋白hole在心肌肥大发生中的作用: 人源hole基因(hhole)是我室前期克隆的一个人类心脏发育候选基因, Northern Blot结果显示该基因在心脏组织中高表达,提示其有可能参与心脏的发育及心脏功能的维持。细胞信号途径分析提示其可能通过MAPK信号...; 李永青周军媚徐伟吴秀山

人类新基因WDR24的研究初报: 2009年; WD40家族是一类结构保守、功能复杂的蛋白。目前很多研究显示该家族成员通过参与MAPK信号途径调控细胞内信号转导而影响细胞的基本生命活动。为了鉴定参与细胞生命活动的新基因,运用同源基因克隆法,通过PCR技术扩增获得一个新的人类基因WDR24,其cDNA全长3 302 bp,2 373 bp长的开放阅读框编码由790个氨基酸残基组成的蛋白质。生物信息学分析表明,WDR24蛋白在进化上高度保守,与其他脊椎动物中的同源蛋白组成了一个功能未知的亚家族。蛋白序列分析显示其中有6个WD40重复序列和1个ERK的停泊位点D-domain。RT-PCR分析表明,该基因在所有被检测的人类胚胎组织中表达。; 周云雷满贤龚琳吴秀山李永青; 关键词：基因克隆 RT-PCR

人类锌指蛋自家族新基因ZNF307的克隆、表达和功能研究: 在脊椎动物的发育、细胞分裂分化和疾病发生等方面,锌指蛋白基因起着广泛的作用。C2H2型锌指蛋白是一大类转录调控因子家族基因。结合生物信息学分析、数据库搜索以及利用人类胚胎心脏文库进行巢式PCR、5’和3’RACE PCR...; 王跃群吴秀山李永青袁婺洲朱传炳刘明耀; 关键词：锌指蛋白转录抑制; 文献传递

人类胚胎心血管发生发育的形态学研究被引量：3: 2001年; 心血管系统是胚胎第一个发生作用的系统 ,其形成是在一系列相关基因的调控作用下各种细胞迁移、分化和精确组合的结果 .; 皮花亮李永青吴秀山; 关键词：胚胎心血管系统发生发育影响因素

利用CRISPR/Cas9技术建立斑马鱼Asb11基因敲除品系被引量：1: 2018年; Asb11基因被报道与斑马鱼Notch信号的激活有关,本研究室过去的研究显示该基因在心肌和骨骼肌中特异性表达。因此推测Asb11基因可能是心脏发育相关候选基因。为了阐明Asb11基因在斑马鱼心脏发育过程中的作用,本文利用CRISPR/Cas9打靶技术构建敲除Asb11基因的斑马鱼品系。首先在线分析筛选出Asb11基因最适合的打靶位点,然后PCR扩增出Asb11基因gRNA的双链c DNA,再将Asb11基因的gRNA和Hcas9的mRNA共同注射到斑马鱼胚胎Ⅰ细胞期胚胎中。进行打靶的有效性检测,发现Asb11基因的一号外显子出现了碱基的缺失,表明CRISPR/Cas9系统对Asb11基因的敲除是有效的。对其F0代、F1代、F2代进行筛选,成功获得了Asb11基因敲除的斑马鱼品系,为探究Asb11在心脏发育中的作用奠定了基础。; 尹丽阳罗世锋陈宇漆轲婧彭云万永奇吴秀山李永青; 关键词：斑马鱼

斑马鱼Foxp4基因多克隆抗体的制备及检测被引量：2: 2011年; Foxp4为Fox基因家族的一员,目前研究发现其与怖、肠、心脏以及中枢神经系统的发育有关。为了在斑马鱼模型中进一步研究该基因的功能,有必要制备其多克隆抗体。按照巢式PCR原理,经过两次PCR扩增出亲水性和特异性均好的斑马鱼Foxp4基因片段,将其克隆入表达载体pGEX4T-1,转化至大肠杆菌BL21中,再通过IPTG进行诱导表达GST-Foxp4融合蛋白。融合蛋白先经谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化,再经切胶纯化回收,然后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,分别进行Western-blot实验检测抗体效价和特异性。所得结果显示获得了较高效价和特异性好的斑马鱼Foxp4多克隆抗体,为Foxp4功能的进一步研究奠定了基础。; 刘华友朱玲李帆王琨江志钢吴秀山李永青; 关键词：原核表达多克隆抗体

人类心脏发育缺陷的分子机理被引量：1: 2001年; 为了探索心脏发育的缺陷及遗传机制以及在分子水平上先天性心脏病的发生机理 ,概述了人类心脏发育缺陷的研究进展 ,包括人类心脏不对称发育。; 易正芳李永青吴秀山; 关键词：心脏发育分子机制

人类心脏发育基因的鉴定及分子机理研究: 吴秀山王跃群袁婺洲李永青刘明耀朱传炳邓云莫小阳; 基于目前对控制人类心脏发育的基因仍知之甚少，对其复杂的基因调控机制仍有待阐明的现状，申请人将分子分析、细胞研究、动物模型和人类先心病材料研究相结合，进行了大规模的人类心脏发育候选基因的克隆和鉴定工作，取得了一系列的国际领...; 关键词：; 关键词：心脏发育基因肌细胞

gcm蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备: 2013年; gcm(glial cells missing)是调控神经元细胞和神经胶质细胞相互转化的一个基因开关.在gcm功能缺损的突变体中,预期的神经胶质细胞发育成神经元细胞;而在gcm过表达的突变体中,预期的神经元细胞转化为神经胶质细胞.此外,gcm还调控血浆细胞发育.为了进一步研究gcm在发育中的功能,需要获得gcm蛋白并制备其抗体.根据已报道的gcm基因序列,以果蝇cDNA文库为模板进行PCR扩增得到gcm部分编码区序列,然后将其连接到pET-28a载体以获得原核表达载体.重组载体经酶切测序鉴定确认后,转化大肠杆菌(E.coli)BL21,并用IPTG诱导融合蛋白表达.采用Ni-IDA凝胶柱亲和纯化蛋白,将纯化的His-gcm融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western Blot检测抗体效价.获得的gcm原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗gcm多克隆抗体,为gcm功能的进一步研究奠定了基础.; 赵阳彭佩莹王静周英张义唐超任恋彭夕洋陈思行李永青吴秀山; 关键词：GCM 融合蛋白多克隆抗体

家兔可复性输卵管硅橡胶塞绝育术后输卵管的形态学观察Ⅰ.输卵管的组织学及组织化学的观察被引量：2: 1998年; 对曾接受输卵管硅橡胶塞绝育术的家兔输卵管组织，在堵塞期和取塞后的恢复期应用活体组织解剖、组织学、组织化学（Ｐ．Ａ．Ｓ反应）等方法进行观察．结果发现，堵塞期输卵管组织的粘膜层的萎缩性退变是显著的，平滑肌层受累较轻；而在取塞后的恢复期，输卵管组织基本上恢复正常．本实验证明了可复性输卵管硅橡胶塞绝育术是安全的，可复的．; 李永青刘瑜瑚陈风齐罗瑞娥; 关键词：输卵管绝育组织学

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李永青