刘瑶
- 作品数:6 被引量:2H指数:1
- 供职机构:贵州医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 核内不均一核糖核蛋白与肿瘤的发生发展
- 2016年
- 2015年,在《CA:A Cancer Journal for Clinji-cians》杂志上发表的中国癌症统计数据指出,中国有4292000例癌症新发病例,2814000例癌症死亡。随着癌症的发病率和死亡率急速增长,目前癌症已经成为了中国人死亡的首要原因和威胁公共健康的主要问题。
- 刘瑶石祥方文
- 关键词:肿瘤增殖基因表达细胞凋亡端粒酶
- HnRNPA2/B1shRNA慢病毒载体感染Hela细胞的稳定株筛选被引量:2
- 2016年
- 目的:筛选不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体感染宫颈癌细胞株Hela细胞的稳定细胞株。方法:利用hnRNPA2/B1 shRNA慢病毒载体转染Hela细胞,采用嘌呤霉素抗性方法筛选稳定转染的Hela细胞系;将Hela细胞分为空白组(Hela)、阴性组(NC-shRNA)、干扰组1(shRNA1)、干扰组2(shRNA2)、干扰组3(shRNA3)和干扰组4(shRNA4),实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组细胞hnRNPA2/B1 mRNA表达水平,Western blot检测hnRNPA2/B1蛋白表达水平,筛选干扰沉默效率最高的细胞作为稳定沉默hnRNPA2/B1基因的稳转株。结果:经筛选获得稳定转染的宫颈癌Hela细胞株,干扰组2,干扰组3和干扰组4与空白组比较,hnRNPA2/B1基因和蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05),其中干扰组4沉默效率最高。结论:成功构建hnRNPA2/B1 shRNA慢病毒载体感染的Hela稳定细胞株。
- 刘瑶石祥方文
- 关键词:RNA干扰短发夹RNAHELA细胞慢病毒
- 人hnRNPA2/B1shRNA慢病毒载体的构建被引量:1
- 2016年
- 目的:构建人核内不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体。方法:根据hnRNPA2/B1基因序列,设计4对hnRNPA2/B1 shRNA的干扰序列和1对阴性对照序列(NCShRNA);合成靶序列双链DNA,与p GMLV-SC5RNAi慢病毒载体连接,通过测序鉴定阳性克隆;用构建的慢病毒表达载体和包装质粒共转染HEK293T细胞,荧光显微镜下观察转染病毒72 h后细胞中绿色荧光蛋白的表达,以验证共转染是否成功,超滤法浓缩病毒原液并测定病毒滴度。结果:经酶切和BLAST对测序结果比对,重组克隆中插入的序列与设计合成的4对shRNA及1对阴性对照oligo DNA完全一致,提示慢病毒载体构建成功;荧光显微镜下,HEK 293T细胞可见强绿色荧光蛋白表达,慢病毒载体成功共转染入HEK 293T细胞,病毒滴度为5×1011TU/L。结论:成功构建人hnRNPA2/B1基因shRNA慢病毒载体,病毒滴度达5×1011TU/L。
- 刘瑶石祥方文
- 关键词:慢病毒293T细胞短发夹RNA
- 程序性死亡受体1抑制剂通过促进细胞焦亡加重放射性心肌损伤的研究
- 2024年
- 目的探讨程序性死亡受体1(PD-1)抑制剂通过细胞焦亡通路对放射性心肌损伤的影响。方法20只C57BL/6雄性小鼠按随机数字表法分为4组:健康对照组;PD-1抑制剂组;单纯照射组(胸部单次照射20 Gy);照射联合PD-1抑制剂组,每组5只。超声心动测试评价受照后1个月小鼠左室射血分数(LVEF)、每搏输出量(SV)、左室缩短率(FS);采用苏木精-伊红(HE)、Masson染色观察心肌组织病理学改变;蛋白免疫印迹、实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测心肌组织焦亡关键因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达水平;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测白介素18(IL-18)、IL-1β表达;流式细胞术检测心肌淋巴细胞浸润情况。结果照射后1个月,照射联合PD-1抑制剂组的LVEF、FS、SV较单纯照射组下降(t=4.50、27.93、3.11,P<0.05);照射联合PD-1抑制剂组小鼠心肌损伤及纤维化较单纯照射组更明显,心肌胶原容积分数较单纯照射组升高[(2.88±0.27)%vs.(3.81±0.57)%,t=2.90,P<0.05];与单纯照射组比较,照射联合PD-1抑制剂组心肌Caspase-1、Caspase-1 p20、GSDMD、GSDMD-N、ASC蛋白表达量增高(t=3.14、3.22、8.83、20.29、2.79,P<0.05),Caspase-1、GSDMD、ASC的mRNA表达量也升高(t=3.09、2.91、2.53,P<0.05);照射联合PD-1抑制剂组心肌及血清IL-18、IL-1β表达较单纯照射组均升高(t=3.46、3.75、7.58、8.24,P<0.05),CD8+T淋巴细胞百分比高于单纯照射组[(38.33±7.92)%vs.(54.70±4.01)%,t=3.29,P<0.05],而CD4+T淋巴细胞在各组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论PD-1抑制剂可通过Caspase-1/GSDMD促进细胞焦亡,进而加重放射性心肌损伤。
- 赵沙沙吴碧波柏杰王刚王刚王羽刘瑶欧阳伟炜王羽苏胜发
- 关键词:心肌损伤
- 咽炎片制剂及其包衣工艺
- 本发明提供一种咽炎片制剂及其包衣工艺,其中所述咽炎片制剂通过将咽炎片进行薄膜包衣制备而成,所述薄膜包衣包括薄膜材料、掩盖剂、增塑剂和色素。本发明制备的咽炎片制剂,其片衣增重少,生产工艺简单,不易吸潮,对车间操作工的依赖性...
- 黄静王澧毛政益刘珈伲刘瑶刘丽娜李桂兰
- 文献传递
- 慢病毒介导shRNA沉默hnRNPA2/B1基因对宫颈癌细胞化疗敏感性的影响及作用机制初探
- 目的:分析不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoproteinA2/B1,hnRNPA2/B1)基因对宫颈癌细胞的平板克隆形成、转移、侵袭能力和增殖能力、细胞周期的影...
- 刘瑶
- 关键词:宫颈癌