石祥
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 核内不均一核糖核蛋白与肿瘤的发生发展
- 2016年
- 2015年，在《CA：A Cancer Journal for Clinji-cians》杂志上发表的中国癌症统计数据指出，中国有4292000例癌症新发病例，2814000例癌症死亡。随着癌症的发病率和死亡率急速增长，目前癌症已经成为了中国人死亡的首要原因和威胁公共健康的主要问题。
- 刘瑶石祥方文
- 关键词：肿瘤增殖基因表达细胞凋亡端粒酶
- HnRNPA2／B1shRNA慢病毒载体感染Hela细胞的稳定株筛选被引量：2
- 2016年
- 目的:筛选不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体感染宫颈癌细胞株Hela细胞的稳定细胞株。方法:利用hnRNPA2/B1 shRNA慢病毒载体转染Hela细胞,采用嘌呤霉素抗性方法筛选稳定转染的Hela细胞系;将Hela细胞分为空白组(Hela)、阴性组(NC-shRNA)、干扰组1(shRNA1)、干扰组2(shRNA2)、干扰组3(shRNA3)和干扰组4(shRNA4),实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组细胞hnRNPA2/B1 mRNA表达水平,Western blot检测hnRNPA2/B1蛋白表达水平,筛选干扰沉默效率最高的细胞作为稳定沉默hnRNPA2/B1基因的稳转株。结果:经筛选获得稳定转染的宫颈癌Hela细胞株,干扰组2,干扰组3和干扰组4与空白组比较,hnRNPA2/B1基因和蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05),其中干扰组4沉默效率最高。结论:成功构建hnRNPA2/B1 shRNA慢病毒载体感染的Hela稳定细胞株。
- 刘瑶石祥方文
- 关键词：RNA干扰短发夹RNAHELA细胞慢病毒
- 人hnRNPA2／B1shRNA慢病毒载体的构建被引量：1
- 2016年
- 目的:构建人核内不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体。方法:根据hnRNPA2/B1基因序列,设计4对hnRNPA2/B1 shRNA的干扰序列和1对阴性对照序列(NCShRNA);合成靶序列双链DNA,与p GMLV-SC5RNAi慢病毒载体连接,通过测序鉴定阳性克隆;用构建的慢病毒表达载体和包装质粒共转染HEK293T细胞,荧光显微镜下观察转染病毒72 h后细胞中绿色荧光蛋白的表达,以验证共转染是否成功,超滤法浓缩病毒原液并测定病毒滴度。结果:经酶切和BLAST对测序结果比对,重组克隆中插入的序列与设计合成的4对shRNA及1对阴性对照oligo DNA完全一致,提示慢病毒载体构建成功;荧光显微镜下,HEK 293T细胞可见强绿色荧光蛋白表达,慢病毒载体成功共转染入HEK 293T细胞,病毒滴度为5×1011TU/L。结论:成功构建人hnRNPA2/B1基因shRNA慢病毒载体,病毒滴度达5×1011TU/L。
- 刘瑶石祥方文
- 关键词：慢病毒293T细胞短发夹RNA
- 沉默hnRNP A2/B1基因对人宫颈癌CaSki及Hela细胞株内PI3K/AKT通路及裸鼠体内移植瘤生长的影响
- 目的:在课题组前期研究的基础上继续探讨沉默hnRNP A2/B1基因后对人宫颈癌Hela及CaSki细胞中PI3K/AKT通路中相关蛋白及裸鼠移植瘤生长的影响。方法:慢病毒载体介导shRNA沉默宫颈癌细胞中的hnRNP ...
- 石祥
- 关键词：宫颈癌
- 文献传递
