孔园园
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 供职机构：河北农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 不同药物对树突状细胞捕获猪细小病毒样颗粒的影响被引量：2
- 2016年
- 通过磁性筛选的方法从猪的脾脏分离树突状细胞(DC),经低渗和钾离子缺乏处理或与氯丙嗪、二甲基氨基吡咪、松胞素D、菲律平等药物分别在37℃下作用1h后,再与荧光素FITC标记的猪细小病毒样颗粒(FITC-PPVVLPs-E290)在37℃下作用4h,应用流式细胞仪检测在体外DC对PPV-VLPs的捕获情况。结果显示:钾离子缺乏及氯丙嗪对DC的捕获效率无影响,而经二甲基氨基吡咪、菲律平、及松胞素D处理的DC对PPV-VLPs-E290捕获效率明显下降。结果表明:DC对PPV-VLPs-E290的捕获与肌动蛋白及巨胞饮、小窝蛋白介导的方式有关,而与网格蛋白介导的方式无关。
- 邸晶美左玉柱申小强顾文源刘宝京罗尚星代飞常嫣嫣孔园园范京惠
- 关键词：病毒样颗粒树突状细胞
- 猪流行性腹泻IgA抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2017年
- 本实验将构建的重组表达质粒pET-32a(+)-S798转入大肠杆菌中诱导表达,获得表达量较高的包涵体蛋白。以纯化的S重组蛋白作为包被抗原,初步建立了母猪乳汁中IgA抗体的间接ELISA检测方法。抗原包被浓度为0.938ug/mL,乳汁稀释度为1:320,对反应条件进行优化,批内批间重复性试验变异系数均小于10%,与市售试剂盒相比特异性为90%、敏感性为94%、符合率为92%,本方法具有良好的特异性和敏感性,可以对猪乳汁中抗流行性腹泻病毒的IgA抗体水平进行快速检测。
- 孔园园邸晶美罗尚星刘宝京范京惠左玉柱
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S蛋白ELISA
- 猪流行性腹泻病毒抗体间接ELISA检测方法的建立
- 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea，PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)引起的猪的一种急性、高度传染性肠道疾病。近年来，P...
- 孔园园
- 关键词：猪流行性腹泻血清学诊断IGG抗体IGA抗体
- 猪流行性腹泻病毒S基因的研究进展被引量：4
- 2016年
- 猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起的猪的一种急性肠道传染病,是导致仔猪早期死亡的重要疫病之一。近年来,猪流行性腹泻的流行区域有逐渐扩大的趋势,已成为中国甚至世界最常见的猪腹泻传染病之一。通过对猪流行性腹泻病毒基因组概述、S基因及其编码蛋白的功能特性、基于猪流行性腹泻病毒S基因的诊断技术及其疫苗研究进展等方面进行综述,以期对猪流行性腹泻病毒S基因研究以及猪流行性腹泻的预防和控制提供帮助。
- 孔园园范京惠左玉柱邸晶美刘宝京罗尚星
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S基因S蛋白
- 影响猪树突状细胞对猪细小病毒样颗粒提呈方式的因素被引量：1
- 2017年
- 旨在探明猪细小病毒样颗粒(PPV-VLPs)被猪脾树突状细胞(DC)捕获后,被提呈的方式。首先通过磁性筛选的方法从非免疫猪和免疫猪的脾分离CD172a+CD11R+DC及CD4-CD8+T细胞。DC分别与伯氨喹、放线菌酮、氯喹、乳胞素、布雷菲德菌素A及亮抑肽酶、胃酶抑素等作用1h后,再与细小病毒样颗粒PPV-VLPs-E290在37℃作用4h,应用CD8+T细胞的细胞毒性分析检测DC对PPV-VLPs-E290的提呈情况。乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测结果显示,伯氨喹及亮抑肽酶对DC提呈PPV-VLPs-E290的效率无明显影响,胃酶抑素部分抑制,而氯喹、放线菌酮、布雷菲德菌素A及乳胞素则可使DC提呈PPV-VLPs-E290的效率明显下降。结果表明,DC通过交叉提呈的方式提呈PPV-VLPs-E290。晚期内体的酸性环境以及蛋白酶的水解均参与了PPV-VLPs-E290的提呈过程。
- 罗尚星申小强顾文源范京惠邸晶美刘宝京代飞孔园园常嫣嫣左玉柱
- 关键词：病毒样颗粒树突状细胞
- 副猪嗜血杆菌、PCV2及PRRSV多联RT-PCR检测方法的建立及其应用被引量：1
- 2018年
- 副猪嗜血杆菌（H．parasuis）、猪圆环病毒2型（PCV2）及猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒（PRRSV）是引起猪呼吸系统疫病的3种重要病原，根据GenBank中这3种病原的基因组序列，选择基因序列的高保守区，分别设计合成了3对特异性引物进行3种病原的多重PCR，并对反应条件进行优化。利用建立的多重PCR方法，对河北省2012-2013年发生呼吸系统疾病的412份猪病料进行检测，并随机选择其中的57份，同时进行单一PCR检测，以确定2种方法检测结果的符合程度。结果表明，3对引物能特异扩增出大小分别为469，829，219bp的目的条带。灵敏度检测试验表明，H．parasuis，PCV2和PRRSV的最低检测量分别为52．7，335．0，137．0Pg。412份临床样品检测结果显示，H．parasuis在2012年的阳性率为44．2％，2013年为45．1％，提示这2年引起猪呼吸道疫病的主要病原是H．parasuis。
- 罗尚星范京惠刘宝京邸晶美代飞常彦嫣孔园园左玉柱
- 关键词：副猪嗜血杆菌猪圆环病毒2型多重RT-PCR
