张丽娜
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：东南大学医学院理学与病理生理学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 癌蛋白TRE17泛素化位点的初步鉴定
- 2016年
- 目的研究癌蛋白TRE17单泛素化的位点,为深入探讨其单泛素化的机制及鉴定其泛素连接酶E3提供研究基础。方法使用截短体逐步逼近的方法构建了一系列TRE17变异体,包括HA-TRE17(375)和HA-TRE17(303);用重叠延伸PCR方法构建了TRE17的中间缺失变异体HA-TRE17(447,Δ340-361)。随后,变异体质粒被分别转染HEK 293细胞,用Western blot方法鉴定各变异体及其单泛素化条带在HEK 293细胞内的表达。结果 HA-TRE17(447)、HA-TRE17(375)有单泛素化蛋白条带,而HA-TRE17(303)无单泛素化蛋白条带;与HA-TRE17(303)变异体一样,HA-TRE17(447,Δ340-361)也无单泛素化蛋白条带。结论 TRE17单泛素化位点可能位于340-361之间或附近的氨基酸残基。
- 张永臣赵虎子赵蕾张丽娜王北万青沈传陆
- 关键词：癌蛋白泛素
- 沙利度胺联合DVD方案治疗多发性骨髓瘤的疗效观察被引量：1
- 2013年
- 目的分析沙利度胺联合DVD方案（T—DVD）治疗多发性骨髓瘤（MM）的临床疗效。方法观察组25例初治MM患者予以T—DVD方案（T—DVD组），28d为1个疗程，共4个疗程。沙利度胺起始剂量为100mg／d，每周增加50mg／d，最大剂量为200mg／d，持续12周以上。对照组22例初治MM患者予以T—VAD方案（T—VAD组），28d为1个疗程，共4个疗程。4个疗程结束后判定疗效，比较不良反应发生情况。结果T—DVD组完全缓解（CR）8例，部分缓解（PR）8例，进步（I）5例，无效（NR）4例；T—VAD组CR7例，PR8例，I2例，NR5例（其中1例肾衰竭死亡，1例合并败血症死亡），两组总有效率分别为80．00％（20／25）、77．27％（17／22），差异无统计学意义（X2=0．342，P〉0．05）。两组不良反应发生率[32％（8／25）与68％（15／22）]比较，差异有统计学意义（x2=6．131，P〈0．05）。结论T．DVD方案治疗MM患者有效率高、安全性好。
- 孟文俊徐昕戴秋新杨建刚秦茹娟张丽娜
- 关键词：多发性骨髓瘤沙利度胺
- TC-1癌蛋白高表达促进人BT549乳腺癌细胞迁移被引量：3
- 2016年
- 目的:构建甲状腺癌基因-1(TC-1)真核表达质粒,观察TC-1癌蛋白高表达对人乳腺癌细胞迁移的影响。方法:用蛋白质印迹方法检测TC-1癌蛋白在培养的人MCF-7和BT549乳腺癌细胞中表达;从MCF-7细胞中提取总RNA,通过实时PCR(RT-PCR)扩增人TC-1 c DNA全长开放读码框架(ORF),并插入真核表达载体Flag-pc DNA3.0中构建Flag-TC-1-pc DNA3.0重组质粒;经限制性内切酶和DNA测序鉴定后,该重组质粒用于转染BT549细胞,进行蛋白质印迹分析鉴定Flag-TC-1融合蛋白表达;进行细胞划痕实验,观察TC-1对BT549细胞迁移的影响。结果:TC-1蛋白在人MCF-7乳腺癌细胞中显著表达,而BT549细胞中表达极低;人MCF-7乳腺癌细胞TC-1全长ORF的RT-PCR产物为337 bp;重组质粒Flag-TC-1-pc DNA3.0经Bam HⅠ和XhoⅠ双酶切出现特征性的327 bp片段;DNA测序证实TC-1全长ORF序列正确无误,以正确的阅读框架插入Flag-pc DNA3.0载体中。蛋白质印迹结果显示该重组质粒转染的BT549细胞表达的FlagTC-1融合蛋白可被抗Flag抗体特异性识别,分子质量约为13.6 k Da,符合预期;划痕实验结果显示,高表达TC-1的BT549细胞迁移性增加。结论:内源性TC-1蛋白在人BT549乳腺癌细胞中表达极低,Flag-TC-1融合蛋白高表达促进BT549细胞迁移。
- 张丽娜赵虎子张永臣赵蕾王北万青沈传陆
- 关键词：乳腺癌细胞真核表达迁移
